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121.
大鼠骨髓间质干细胞体外分离培养及生物学特性研究 总被引:6,自引:5,他引:1
目的:建立大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离培养方法,并对大鼠MSCs的生物学特性进行研究。方法:分离5~8周龄的大鼠股骨骨髓进行体外培养,取5代以后的MSCs观察形态特征,绘制生长曲线,进行细胞化学染色,并用流式细胞仪检测其表面标志和进行细胞周期分析。结果:大鼠MSCs细胞形态呈长梭形或多边形,细胞生长曲线呈S形,群体倍增时间为30h,细胞化学染色显示碱性磷酸酶(ALP)、过氧化物酶(POX)、苏丹黑B(SB)阴性,而*醋酸萘酚醋酶(α-NAE)与糖原(PAS)阳性,流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD90表达阳性,而CD34、CD38、CD45表达阴性;细胞周期分析显示,G0/G1期:79.48%,G2/M期:6.10%,S期:14.42%。结论:本方法分离纯化出的是MSCs,其在体外具有生长稳定,增殖较快的特点,是组织工程研究中良好的细胞来源,也是转基因研究优良的载体细胞。 相似文献
122.
目的 探讨全胃切除术后保留幽门间置空肠代胃术的临床应用。方法 1987年至今,对60例胃癌患者临床应用保留幽门的间置空肠代胃术式,评估其疗效。结果 60例患者无手术死亡,术后幽门舒缩功能及代胃的食糜搅拌、贮存功能良好,无返流性食管炎、倾倒综合症、营养不良等并发症。结论 保留幽门的间置空肠双腔代胃术能明显地改善全胃切除术后患者的生活质量。 相似文献
123.
目的 比较CCl4 法和PS法两种肝纤维化制模方法在肝纤维化形成进程中时效关系和病理学特征。方法 采用CCl4 和PS法制作SD大鼠肝纤维化模型 ,分别观察在造模第 6、10、14、2 0周时肝脏组病学特征 ,Masson三色染色和计算机图像分析系统进行分析。结果 CCl4 法于制模第 6周即可见肝脏假小叶形成 ,于第 10周始最为典型 ;随着假小叶的形成和造模方法停止 ,肝脏病理结构变化趋于稳定 ;肝细胞脂肪变性尤为突出 ,与模型制作进程相平行。PS法于造模第 10周即造模结束时方见纤维间隔形成 ,造模虽已停止但肝纤维化进程加速完成 ,肝组织分隔严重 ,假小叶形成较多并进展到第 2 0周 ;制模自始至终 ,肝细胞未见明显脂肪变性。结论 CCl4 和PS两种制模方法在肝纤维化形成进程中所表现出的时效关系和病理特征有所不同 ,提示两种制模方法在形成肝纤维化机制方面有所不同。结合使用两种方法研究肝纤维化更为合理 ;以抗肝纤维化干预因子进行干预研究时 ,干预因子的持续时间宜延长至肝纤维化形成之高峰期或之后 ,持续时间至少 14周 ;预防和治疗用药干预研究时 ,其起始时间宜分别以造模开始前 4周和造模停止前 4周为宜 相似文献
124.
异丙酚预处理对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的影响 总被引:6,自引:2,他引:4
目的 探讨异丙酚预处理对心肌缺血-再灌注(I-R)损伤的作用及其机制。方法 成年雄性 SD 大鼠18只,随机分为对照组(C组)、I-R 组、50μmol/L 异丙酚预处理组(P组),每组6只。建立Langendorff 离体心脏灌流模型,平衡35min 后 I-R 组和 P 组均停灌30min,然后复灌120min。其中 P 组停灌前用含50μmol/L 异丙酚的 K-H 液灌流10min,并用无异丙酚的 K-H 液冲洗10min。C 组不停灌,也不用异丙酚处理。灌流结束后,制备心肌组织匀浆,测定 NO 含量、总 NOS 及超氧化物歧化酶(SOD)活性,用免疫组化 SABC 染色检测诱导型 NOS(iNOS)蛋白与血红素氧化酶-1(HO-1)蛋白表达水平,同时行光镜及透射电镜观察。结果病理学显示 C 组正常,I-R 组心肌组织严重损伤,P 组轻度损伤;与C 组相比,I-R 组和 P 组 iNOS、HO-1蛋白表达量和 iNOS 活性均升高,cNOS 活性均降低(P<0.05或0.01);I-R 组总 NOS 活性和 NO 含量、Cu.Zn-SOD、Mn-SOD 和总 SOD 活性均降低(P<0.05或0.01),但P 组无变化(P>0.05)。与 I-R 组比较,P 组除 iNOS 活性不变外,其余指标均升高(P<0.05或0.01)。结论 异丙酚预处理对心肌 I-R 损伤具有保护作用,其机制在于抑制或清除氧自由基以降低氧化应激水平,并通过恢复 cNOS 活性而增加 NO 的含量。 相似文献
125.
前列腺癌中E-钙粘素、p16及雌激素受体基因甲基化的检测及其临床意义 总被引:5,自引:2,他引:3
目的:研究前列腺病变中E-钙粘素、p16和雌激素受体(ER)基因启动子CpG岛甲基化状况及其与临床资料的关系,探讨基因过甲基化在前列腺癌(PCa)发生发展中的作用及其临床意义。方法:收集石蜡包埋前列腺全切术标本:良性前列腺增生(BPH)13例,高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)10例,有随访记录的PCa 20例。采用甲基化特异性PCR(MSP)技术对E-钙粘素、p16和ER基因CpG岛甲基化进行检测。结果:E-钙粘素、p16和ER基因过甲基化在PCa中的发生率分别为30%、25%和65%。非恶性病变(BPH和HGPIN)很少发生DNA过甲基化。结论:PCa的发生及进展与E-钙粘素、p16和ER基因过甲基化密切相关,检测甲基化状况对HGPIN与PCa的鉴别诊断可能有辅助作用。E-钙粘素和ER基因过甲基化可能提示预后差。 相似文献
126.
内源性转化生长因子β1对膀胱癌细胞体外生长的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究内源性转化生长因子β1(TGFβ1)对膀胱癌细胞增殖的影响及机制。方法:构建携TGFβ1反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体pRevTβ-AS,转染膀胱癌EJ细胞株,观察抑制内源性TGFβ1表达对EJ细胞体外增殖的影响;流式细胞仪分析转染后细胞周期时相分布的改变。结果:将TGFβ1反义RNA导入EJ细胞并有效表达;抑制TGFβ1表达可以降低靶细胞的生长速度和克隆形成率,使细胞增殖指数下降12%;反义RNA转染的EJ细胞G0和G1期细胞占65.7%,高于对照组细胞,S期细胞占20.5%,低于对照组细胞。结论:内源性TGFβ1通过诱导膀胱癌细胞G1→S期转换,促进肿瘤细胞体外增殖。 相似文献
127.
中期因子在胰腺癌组织中的定位与表达特点 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 探讨中期因子(MK)的mRNA及其蛋白在胰腺癌(PC)组织中的定位与表达特点。方法采用原位杂交和免疫组织化学方法检测52例PC、12例慢性胰腺炎及6例正常胰腺组织中MK mRNA及蛋白的定位与表达水平。结果MK mRNA及蛋白水平在PC组织均呈过度表达,表达阳性率分别为71.2%和73.1%,都定位于PC细胞质,有淋巴结转移和Ⅱ-Ⅳ期的患者,MK阳性表达率明显高于无淋巴结转移和Ⅰ期患者(P<0.01)。在PC细胞外组织中也有MK表达,尤其在血管密集处明显。而在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中MK表达阴性。结论 MK mR-NA及其蛋白在PC组织中呈过度表达,并可能与促进PC血管生成和转移有关。检测MK表达情况可作为PC的辅助诊断指标之一。 相似文献
128.
129.
高迁移率族蛋白B1对大鼠脾脏树突状细胞表面共刺激分子表达的影响 总被引:10,自引:1,他引:9
目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对树突状细胞(dendritic cells,DC)表面共刺激分子表达的影响,并对其机制进行初步探讨。方法分离正常Wistar大鼠脾脏DC后置于96孔培养板(1×10~5/孔),采用HMGB1刺激,观察HMGB1刺激与DC表面共刺激分子CD80、CD86和主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ表达的时间-效应关系及剂量-效应关系。结果HMGB1刺激后,DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ表达分别于24~72 h明显上调(P<0.05,0.01),其中以作用48 h后DC表面共刺激分子表达上调尤为显著(P<0.01);0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml的HMGB1刺激均可诱导DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ表达增强(P<0.05,0.01),其中HMGB1的浓度在1μg/ml时,大鼠DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ的表达增强最明显(P<0.01)。结论HMGB1能诱导DC表面共刺激分子表达增强,HMGB1可能是诱导DC成熟的免疫刺激信号。 相似文献
130.
输精管结扎术后附睾精子超微结构的变化 总被引:1,自引:1,他引:0
目的分析输精管结扎术后附睾精子超微结构的变化.方法38例输精管吻合术者分3组(B组结扎后<2年,C组结扎后2~5年,D组结扎后>5年),13例输精管结扎为对照组(A组).在手术时取出近睪端输精管液和附睾液,光镜和电镜对精子形态学进行观察分析.结果A组左右侧附睾精子正常形态的差异无统计学意义(P>0.05).电镜和光镜观察结果显示A组与输精管结扎术后3组的精子正常形态(a)、头部畸形(b)、颈部畸形(c)和尾部畸形(d)差异均有统计学意义(均P<0.001),扫描电镜分别是(a)(40.28±11.53)%比(16.80±7.93)%,(6.29±4.57)%,(4.63±5.06)%;(b)(35.00±14.18)%比(59.05±14.44)%,(63.43±15.23)%,(82.05±16.71)%;(c)(20.83±6.40)%比(13.60±6.78)%,(14.71±6.82)%,(9.00±7.18)%;(d)(3.89±4.44)%比(10.55±11.73)%,(15.57±9.81)%,(4.32±7.65)%.光镜分别是(a)(49.12±20.55)%比(19.95±15.42)%,(10.00±9.50)%,(5.84±9.63)%;(b)(35.00±14.55)%比(22.55±16.24)%,(14.71±15.78)%,(10.68±18.65)%;(d)(15.80±9.55)%比(57.50±24.74)%,(75.29±23.90)%,(78.21±30.33)%.透射电镜可见精子头、颈、尾等各个部位各种细胞器均有结构异常.结论输精管结扎术后附睾精子的退变是全方位的,包括头、颈、尾部和多个细胞器的异常.输精管结扎术后时间越长,异常情况越严重,比例更高. 相似文献