脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制真核表达载体构建及最佳短发夹样RNA分子筛选

目的构建并筛选大鼠胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达抑制短发夹样RNA（shRNA）真核表达载体。方法针对GFAP基因全编码序列设计并合成三对9bp茎环结构、19bp干扰序列特异性shRNA模板，体外定向克隆构建特异性重组质粒真核表达载体；通过体外大鼠脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制模型，脂质体介导RNA干扰分子转染，实时荧光定量RT—PCR及Wesem blot技术观察RNA干扰后原代星形胶质细胞GFAP表达抑制效果．筛选最佳GFAP表达干扰抑制真核表达载体。结果序列测定证实GFAP—shRNA重组质粒真核表达载体构建成功，三对shRNA模板在mRNA及蛋白表达水平抑制靶基因表达效率分别为81％、63％、56％。结论高效率的GFAP—shRNA真核表达载体在大鼠原代星形胶质细胞GFAP表达抑制模型中能高效抑制GFAP基因表达，为后续多靶点RNA干扰技术在脊髓损伤胶质瘢痕抑制基因治疗中的应用奠定了前期基础。     

血管生成素-2在食管鳞癌中的表达及意义

目的初步探讨血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与肿瘤病理分级、浸润和转移的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法,对85例食管鳞癌及22例正常食管组织中的Ang-2表达水平进行检测,并与肿瘤病理分级、浸润深度及淋巴结转移情况进行统计学分析。结果85例食管鳞癌组织中,57例Ang-2表达呈阳性,阳性率为67.06%,显著高于Ang-2在正常食管组织中的表达(P<0.05)。Ang-2表达与肿瘤病理分级和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论Ang-2的表达与食管鳞癌的临床分期及病理分级呈正相关,提示Ang-2促进肿瘤新生血管形成,参与食管鳞癌的发生和发展,可作为反映食管癌进展的生物学指标。     

山莨菪碱和无创面罩正压通气治疗急性呼吸窘迫综合征的临床观察

目的比较山莨菪碱联合无创正压面罩通气（654-2＋NIPPV）和传统机械通气（CMV）治疗急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的临床效果，评估山莨菪碱联合无创正压通气在ARDS治疗中的作用。方法将各种原因所致ARDS患者42例随机分为654-2＋NIPPV组（21例）和CMV组（21例），在给予病因治疗同时分别实施654-2＋NIPPV和CMV。观察分析两组患者在治疗过程中动脉血气变化、并发症的发生率及治疗效果。结果654-2＋NIPPV组有8例（38．1％）治疗失败转为气管插管实行CMV，其中6例（28．6％）死亡。CMV组死亡7例（33．3％），两组病死率无显著差异（P〉0.05）。两组治疗有效的患者在分别接受654-2＋NIPPV和CMV治疗后1h和6h动脉血气有相似的显著改善。654-2＋NIPPV组患者机械通气时间和住院时间短于CMV组（P〈0.05）。654-2＋NIPPV组的并发症发生率低于CMV组（P〈0.05）。结论在经过选择的ARDS患者中，应用654-2＋NIPPV治疗的临床效果与CMV相似。实施654-2＋NIPPV可缩短机械通气和住院时间，减少并发症。654-2＋NIPPV可作为经过选择的ARDS患者首选的通气支持治疗手段。     

2,4-二氨基-5-取代苯胺基嘧啶类化合物的合成及抗菌活性

在嘧啶类化合物中,以2,4-二氨基嘧啶类化合物对二氢叶酸还原酶的抑制作用较强。甲氧苄胺嘧啶(TMP)已作为磺胺类药物及某些抗生素的抗菌增效剂广泛用于临床。为了寻找抑酶活性或对细菌选择性抑制作用比TMP更强的化合物,对2,4-二氨基-5-取代苄基嘧啶类的苯环上取代基的改造已做了大量的工作;对这类化合物抑酶活性的构效关系也进行了较多的研究。但对这类化合物中嘧啶环与苯环间的桥键次甲基的改造则报道不多。为了     

人骨形态发生蛋白-2基因转染脂肪源性间充质干细胞的成骨研究

目的 探讨人骨形态发生蛋白-2（hBMP-2）基因修饰的人脂肪源性间充质干细胞（ADSCs）的成骨能力及基因转染对ADSCs成骨分化的生物学调控。方法 流式细胞技术鉴定从人脂肪组织中提取的细胞为间充质来源的干细胞。将ADSCs转染hBMP＋2基因，免疫沉淀＋Western blotting法和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测hBMP-2表达，确定hBMP-2表达量及表达稳定性，碱性磷酸酶（ALP）染色、ALP定量测定、钙结节染色及RT—PCR分析hBMP-2基因转染对ADSCs向成骨细胞转化的调控，并将转基因细胞注入裸鼠股部肌内，通过X线及组织学检查观察体内成骨情况。结果 流式细胞术证实从脂肪中提取的细胞为间充质来源的干细胞。转基因后免疫沉淀＋Western blotting法和ELISA法显示转染hBMP-2的ADSCs具有较高且稳定的hBMP-2的表达，转染21d后表达量无明显降低。ALP染色、ALP定量测定、钙结节染色及RT—PCR发现转基因ADSCs向成骨细胞方向发生分化。裸鼠肌内注射转基因细胞后2周即显示有异位骨形成，4周明显增多，对照组无骨组织形成。结论 转染hBMP-2基因的ADSCs在持续稳定高表达目的蛋白的同时，自身向成骨细胞发生分化，并在裸鼠体内形成异位骨。因此，ADSCs有望作为新的基因工程种子细胞。     

抗HBV药物对小鼠早期胚胎发育的影响

目的　观察拉米夫定 (3TC)和干扰素 (IFNα) 2种抗乙型肝炎病毒 (HBV)药物对早期胚胎发育的影响 ,探讨妊娠早期用药的可能性。方法　收集昆明种小鼠的单细胞受精卵 ,采用微滴培养法连续培养 72h ,观察不同浓度3TC和IFNα对胚胎发育的影响 ,以胚胎发育到各期的比例为判断发育效果的标准。结果　当IFNα浓度高达 1 0 0 0u/m ;3TC 50 0 μmol/L时 ,胚胎发育率呈下降趋势 ,尤其是培养液中 3TC浓度达 50 0 μmol/L时 ,发育至 4 -细胞、8-细胞及桑椹胚期的胚胎数明显减少 (P <0 .0 5) ,但在IFNα浓度 <50 0U/ml;3TC <30 0 μmol/L时 ,对小鼠早期胚胎发育基本无抑制作用。结论　在正常治疗剂量下 ,IFNα和 3TC对早期胚胎发育无影响     

活体胃血供的特点及其临床意义

目的 了解活体胃血供的特点，旨在探索中晚期胃癌的局部灌注化疗方法。方法 对36例胃溃疡患者在行胃大部切除治疗时，进行亚甲蓝染色，观察活体胃各分支动脉自然血供区域和血流阻断后血供范围的变化。结果 术中见左、右胃网膜动脉和左、右胃动脉分别为胃大、小弯近、远段相应区域提供血液，胃壁组织染色时间很短；阻断动脉血流后，染色范围扩展，染色时间延长；阻断伴行静脉后，染色范围进一步扩展，染色时间再度延长。结论 胃左动脉和胃网膜右动脉为胃血供的主要动脉，其他动脉分支为辅助性动脉；一般情况下，经动脉灌注的亚甲蓝在胃组织停留时间极短；阻断伴行静脉后，可使该染料在组织停留时间延长。推测此法可使化疗药物在胃组织中存留时间延长，从而有利于胃癌的局部化疗。     

神经外科手术患者芬太尼-异丙酚-琥珀胆碱麻醉诱导时颅内压的变化

目的 评价神经外科手术患者芬太尼-异丙酚-琥珀胆碱麻醉诱导时颅内压（ICP）的变化。方法择期神经外科手术患者20例，采用硬膜外间隙穿刺针于L3.4或L2.3椎间隙行蛛网膜下腔穿刺，监测脑脊液压力（CSFP）。麻醉诱导时，静脉注射芬太尼2～3μg／kg，5min后以50mg／min静脉注射异丙酚2mg／kg，3min后静脉注射琥珀胆碱1．5mg／kg，达满意肌松后气管插管。记录麻醉诱导前（基础值）、注射芬太尼后5min、注射异丙酚后1、2、3min、肌颤时和气管插管后即刻CSFP。结果与基础值相比，注射异丙酚后1、2、3min及肌颤时CSFP均降低（P〈0．05），气管插管后即刻CSFP差异无统计学意义（P〉0．05）。结论神经外科手术患者芬太尼-异丙酚-琥珀胆碱麻醉诱导可降低ICP，且可避免气管插管引起的ICP升高。     

多层螺旋CT对肝移植术后并发症诊断价值评价

1963年Starzl成功开展了世界上第1例肝移植术（1iver transplantation，LT），自此揭开了治疗终末期肝病的新篇章。截止2001年底，全世界共有100179例病人接受了LT；至2002年底，国内的LT数也已累计达到1840例。然而，随着LT在国内外的蓬勃开展，不可避免地会带来各种类型的术后并发症。为了进一步提高LT术患者后近远期的存活率，及早发现并干预各型并发症就显得尤为重要。     

健康相关生命质量评价研究与应用现状

健康相关生命质量(HRQOL)是近年来发展起来的一种全新的医学概念,在国外已得到广泛的应用。着重介绍了健康相关生命质量的概况、研究与应用进展,阐述了健康相关生命质量的研究背景,以及新近发展的有关健康相关生命质量的观点和测评工具。对健康相关生命质量评价研究的前景和启示作了相关探讨。