经导管子宫动脉注药治疗子宫疤痕异位妊娠的临床分析

目的 探讨子宫疤痕异位妊娠的最佳治疗方法。方法 12例子宫疤痕异位妊娠首先行导管双侧子宫动脉注入二氢叶酸还原酶抑制剂（MTX）和明胶海绵条栓塞术后，在超声监视下再行清除胚胎（清官）术。结果 12例子宫疤痕异位妊娠均一次性彻底清除妊娠胚胎组织，出血极少，无1例发生子宫穿孔或术中、术后大出血，术后月经恢复正常。结论 子宫疤痕异位妊娠首先行经导管双侧子宫动脉注药加柽塞术后再行清官术，是避免清官术中发生大出血而切除子宫的有效方法，更是一种安全可靠方法。     

低氧反应元件介导的低氧调控的神经营养因子-3表达上调减少低氧诱导的PC12细胞凋亡

目的 在体外培养的PC12细胞中观察低氧反应元件（HRE）介导的神经营养因子-3（NT-3）对低氧反应性表达上调及其对低氧诱导的PC12细胞凋亡的影响。 方法 用分子生物学方法将5拷贝HRE（5HRE）和NT-3克隆入反转录病毒载体中构建HRE介导的低氧调控表达载体,并转导入PC12细胞,ELISA法检测NT-3的表达和分泌,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blotting检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK）和Caspase-3激活情况。 结果 成功构建重组反转录病毒载体,并将外源基因转导入PC12细胞中（PC12-NT3-EGFP、PC12-5HRE-NT3-EGFP和PC12-5HRE-EGFP）。在正常条件培养下,PC12-5HRE-NT3-EGFP细胞中NT-3表达水平较低,但在低氧处理后,NT-3表达明显升高（n=3,P<0.05）。在低氧处理后,与PC12细胞组相比,PC12-5HRE-NT3-EGFP组中细胞凋亡明显减少（n=3,P<0.05）,且p38 MAPK和Caspase-3磷酸化也明显减少（n=3,P<0.05）。 结论 在PC12细胞中HRE介导的低氧反应性调控NT-3的表达上调可以对PC12细胞产生保护作用。     

姜黄素对骨髓间充质干细胞诱导肾移植免疫耐受的影响

背景：已有研究显示在大鼠肾移植时连续给予1×10⁷细胞浓度的骨髓间充质干细胞可诱导免疫耐受,但临床上尚未发现姜黄素对肾移植具有免疫调节作用。目的：在对肾移植后的大鼠给予骨髓间充质干细胞的基础上,同时给予不同剂量姜黄素,观察其免疫耐受的效果。方法：建立大鼠肾移植模型,随机分为4组：纯肾移植组,无治疗措施;骨髓间充质干细胞组：关腹前左骼静脉注射1×10⁷/kg骨髓间充质干细胞,第2天起尾静脉注射等量细胞,共10 d;骨髓间充质干细胞+低/高剂量姜黄素组：除给予骨髓间充质干细胞外,分别以2,10 mg/kg姜黄素溶液灌胃,共10 d。免疫组织化学染色法检测各组肾组织中转化生长因子β1的蛋白表达水平,酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素2,6水平。结果与结论：大鼠经肾移植后,纯肾移植组中肾小管上皮细胞以及间质细胞的转化生长因子β1蛋白表达、白细胞介素2,6水平均高于其他各组(P < 0.05)。与骨髓间充质干细胞组比较,骨髓间充质干细胞+低/高剂量姜黄素组的转化生长因子β1的蛋白表达降低(P < 0.05),血清白细胞介素2,6水平均低于骨髓间充质干细胞组(P < 0.05)。结果证实,大鼠肾移植时同时给予姜黄素与骨髓间充质干细胞注射,可有效地进行免疫调节,抑制性免疫排斥反应的发生,保护肾功能。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞细胞色素C及pro-Caspase-9、3的影响

背景：前期研究表明细胞凋亡是关节软骨细胞的中心性特征,对软骨破坏起着支配性的作用,是关节软骨退行性改变的病理因素之一。目的：观察独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞释放细胞色素C、proCaspase-9和proCaspase-3的影响,探讨独活寄生汤治疗骨性关节炎的可能分子生物学机制。方法：建立体外退变软骨细胞模型,分别给予独活寄生汤含药血清或空白血清干预24,48 h,收集软骨细胞,Western Blot法检测干预后退变软骨细胞细胞色素C、proCaspase-9和proCaspase-3蛋白表达。结果与结论：随着干预时间的延长,在胞浆中空白血清组和含药血清组细胞色素C蛋白释放均逐渐降低,含药血清组释放较空白血清组明显减少(P < 0.05);线粒体中空白血清组和含药血清组细胞色素C蛋白外漏均逐渐降低,含药血清组外漏较空白血清组明显减少(P < 0.05)。空白血清组和含药血清组proCaspase-9、proCaspase-3蛋白量均逐渐升高,含药血清组升高更显著,且24 h组与48 h组之间差异有显著性意义(P < 0.01)。结果提示独活寄生汤可以通过减少细胞色素C的释放,减少Caspase-9、Caspase-3的前体裂解,推测能有效抑制软骨细胞凋亡。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

重组H9N2禽流感病毒的构建及其在不同细胞中的复制特性

目的利用反向遗传学技术构建具有感染性的H9N2亚型禽流感病毒,并揭示其在不同细胞中的复制特性。方法以A/Quail/Hong Kong/G1/97(H9N2)禽流感病毒基因组RNA为模板,用RT-PCR技术获得该病毒的8条完整基因片段,并分别将它们插入到p HW2000载体上,最终在293T细胞中包装产生重组H9N2病毒。并将重组的H9N2病毒感染不同细胞,观察病毒在不同细胞上的增殖状况来揭示该病毒在不同细胞上的复制特性。结果应用流感病毒8质粒反向遗传学技术,成功获得重组病毒,并揭示了该毒株在不同细胞(A549,MDCK,Vero)中的复制特性,发现A549人肺腺癌细胞更适宜H9N2病毒的正常复制。此外还分析总结了该毒株的与病毒毒力相关的重要位点特征。结论成功建立了H9N2禽流感病毒的反向遗传系统,该系统的建立为在分子水平研究H9N2病毒以及制备H9N2禽流感疫苗提供了依据。     

13-甲基十四烷酸对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用

目的探讨13-甲基十四烷酸(13-MTD)对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用。方法原代培养大鼠胚脑皮质神经元,并以神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光法鉴定。将神经细胞随机分为正常对照组、模型组和不同剂量13-MTD组,每组设6个复孔。氧糖剥夺3h/再复氧糖24h(OGD3h/R24h)方法制备神经元氧反常模型,于再复氧糖即刻分别给予13-MTD 5、10、20、40mg/L干预。倒置相差显微镜下观察神经细胞形态改变;磺酰罗丹明B(SRB)法测定神经细胞存活率;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色法观察神经细胞凋亡;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的改变。结果与正常组比较,模型组神经元呈现病理改变,神经细胞存活率显著下降(P0.01),细胞凋亡显著增多(P0.01),神经元超微结构损伤明显,可见核内染色质边集或凝聚成块状,胞质内细胞器明显减少甚至消失,线粒体肿胀、嵴断裂甚至消失等;与模型组比较,不同剂量的13-MTD可有效改善上述变化(P0.05,P0.01),使神经元形态及其超微结构损伤明显恢复,且存在剂量依赖关系,以13-MTD 20mg/L改善更显著(P0.01)。结论 13-MTD对氧反常诱导的大鼠胚脑皮质神经元损伤具有明显保护作用,其可能通过改善神经细胞形态和线粒体超微结构损伤,减少神经元凋亡,提高细胞存活率。     

增龄过程中咽食管管腔宽度的变化

目的 探讨增龄过程中咽食管(PES)管腔宽度的变化。方法 运用局部解剖技术,对60例成人尸体咽食管段标本管腔进行观测。结果 按形态将咽食管段管腔分紧缩型和平滑型,将咽食管段从上至下分为４个平面：环咽侧三角上缘平面、甲状软骨下角下缘平面、内腔最窄处平面和环状软骨下缘平面,从环咽侧三角上缘平面至内腔最窄处平面管腔逐渐缩窄(P<0.05),老年组管腔较中青年组及青少年组同平面管腔宽度增宽(P<0.05)。 结论 老年组咽食管段管腔比青少年组和中青年组均增宽,可能是老年化过程中的代偿性改变。     

体外培养的小鼠子宫自然杀伤细胞与树突状细胞的相互影响

目的:探讨小鼠子宫自然杀伤细胞(uterine natural killer cells,uNK细胞)与树突状细胞(dendritic cells,DC)之间的相互影响。方法:①妊娠12~13d昆明小鼠子宫腺细胞区组织块培养后,分离出uNK细胞,单独培养(uNK组);②从小鼠骨髓分离得到未成熟DC,单独培养(DC组);③DC和uNK细胞直接接触共培养(共培养组)。观察各组细胞的生长状况,ELISA法检测培养上清液中IL-4、IL-10、IL-12、IL-15及IFN-γ的浓度,流式细胞术检测细胞表面CD40、CD86和CD83的表达。结果:与uNK组和DC组比,共培养组DC和uNK细胞生长聚集现象减少,2种细胞间相互接触,DC细胞表面CD40和CD86表达增高,但是CD83表达仍很低;培养上清液中IL-4、IL-10、IL-12、IL-15及IFN-γ的浓度均增加,尤以IL-4和IL-10增加显著。结论:uNK细胞和DC两者相互作用,DC参与介导uNK细胞的激活,促进其增殖,同时uNK细胞诱导DC呈部分激活状态,使其具有更好的耐受性。     

乙型脑炎野毒株和弱毒株（SA14-14-2）在豚鼠体内的病毒血症比较试验

目的 利用豚鼠病毒血症的产生强度对乙型脑炎野毒株和弱毒株病毒毒力进行评价.方法 以不同乙脑野毒株和减毒株及其母株病毒分别接种豚鼠,观察不同时间产生病毒血症的水平.结果 接种后1 d和3 d,不同乙脑野毒株均可检测到不同水平的病毒血症（1.00～3.40 lg pfu）,以相同滴度（104pfu）的病毒接种豚鼠时,疫苗株母株SA14产生较高水平的毒血症（2.41～3.40 lg pfu）并至少持续3 d,而SA14-14-2疫苗株未产生毒血症.结论 豚鼠病毒血症的产生强度可以作为一种新的方法对乙型脑炎病毒的减毒和疫苗株的毒力进行评价.     

铜绿假单胞菌密度感应系统自体诱导因子3OC12-HSL对人肠道上皮细胞Caco-2凋亡的影响及其机制

目的 探讨铜绿假单胞菌密度感应系统自体诱导因子3OC12-HSL对肠道上皮细胞Caco-2凋亡的影响及其深入机制.方法 3OC12-HSL干扰Caco-2细胞4 h后,采用MTT法检测Caco-2细胞干扰前后细胞活性变化;Annexin V-FTTC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测Caco-2细胞中凋亡相关蛋白p-p38/MAPK及NF-κB表达变化.结果 MTT结果 显示,3OC12-HSL可以抑制Caco-2细胞活性,并呈剂量依赖性(P<0.05).流式细胞术结果 表明,Caco2细胞凋亡率随3OC12-HSI干扰浓度增加而增加(P<0.05).Western blot结果 显示,3OC12-HSL处理后,细胞p-p38/MAPK及NF-κB蛋白表达水平增加.结论 3OC12-HSL可以抑制肠道上皮细胞Caco-2活性,诱导细胞发生凋亡,这种作用可能和p38/MAPK通路激活以及NF-κB的激活有关.