东部马脑炎病毒E2基因与GM-CSF共表达质粒的构建及其免疫原性初步研究

目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位点(IRES)的真核表达载体中,构建共表达质粒.Lipofectamine2000介导转染真核细胞BHK-21,反转录PCR检测E2和GM-CSF两个基因的转录,Western印迹法和间接免疫荧光法(IFA)检测细胞内E2基因表达产物的抗原性.通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,IFA法测定血清抗体效价,FACS测定免疫小鼠脾细胞中CD4 /CD8 淋巴细胞构成比,初步观察共表达质粒的免疫原性.结果:经酶切鉴定与序列测定证明重组共表达质粒中含有E2和GM-CSF两个基因且序列正确.转染细胞的反转录PCR可见E2和GM-CSF两个基因的转录.Western印迹结果可见转染细胞的裂解液在相对分子质量50 000位置有特异性条带.将转染细胞制成荧光抗原片,经IFA检测可见胞浆中出现特异荧光.免疫小鼠的最高血清抗体效价为1:160,但细胞免疫未观察到明显的提高.结论:构建的共表达质粒pE2-IRES-mGM-CSF具有良好的免疫原性,能有效刺激小鼠特异性体液免疫应答,提高了E2基因重组质粒诱导的血清抗体效价.     

EFFECTS OF LIFELONG ETHANOL CONSUMPTION ON RAT LOCUS COERULEUS

The effects of lifelong ethanol consumption and ageing on themorphology of locus coeruleus (LC) were studied in alcohol-preferringAA (Alko Alcohol) rats of both sexes. Ethanol (12% v/v) wasthe only available liquid for the ethanol-consuming rats from3 months up to 24 months of age. Young (3-month-old) and old(24-month-old) control groups were included in the measurements.The LC morphometry was performed by an unbiased disector method.In the old control rats, the total neuron number, neuronal densityand the volume of the LC proper did not differ from the youngcontrols. In the ethanol-exposed rats, the total neuron numberof the LC was decreased by 30% and the LC neuronal density by22%, compared to the age-matched controls. No gender differencewas found in the vulnerability of LC neurons to ethanol-induceddegeneration. The results suggest a remarkable sensitivity ofthe LC neurons to the ethanol-induced degeneration in both maleand female rats. The possible mechanisms and functional implicationsof this neuronal loss are discussed.     

后房型人工晶状体植入术后的超声生物显微镜观察

目的：探讨后房型人工晶状体植入术后眼前节结构的改变。确切定位人工晶状体襻的位置。观察人工晶状体襻对于周围组织的影响。方法：白内障摘除及后房型人工晶状体植入术的50名患者（50眼）于术前，术后1周及三个月进行超声生物显微镜观察。结果：术后前房深度，房角宽度押送术前显著增加。人工晶状体中囊袋内植入者36枚（72%）。睫状沟植入者6枚（12%），不对称植入者8枚（16%）。人工晶状体光学部倾斜1眼（2%）。人工晶状体襻推挤虹膜根部2眼（4%）。人工晶状体襻睫状沟侵蚀3眼（6%）。术后1周2眼（4%）眼压升高。皮质少量残留5眼（10%）。结论：囊袋内为后房型人工晶状体植入的理想位置。可保证人工晶状体的良好位置。避免人工晶状体襻对于色素膜组织的干扰及对血-房水屏蔽的损伤，从而减少并发症的发生。     

经前路颈椎多节段椎管扩大术的实验研究

目的设计颈椎前路椎管扩大术式并探讨该术式的可行性,为颈椎管多节段狭窄症提供新的手术方法。方法标本实验:选用4具C1～T1尸体颈椎标本,去除前方肌肉,保留后侧肌肉及固有韧带,解剖出横突孔,沿椎动脉走行,穿入直径3mm橡胶管,注入造影剂。沿C4～6椎体前正中纵行劈开,依次横向撑开3、6、9、12mm,并用木块填塞,三维CT下观察椎管前后径、横径、截面积、两侧椎动脉的直径、间距,神经根管变化。动物实验:用4只成年绵羊,麻醉后暴露出C3,4颈椎前方,将C3,4椎体纵向劈开,横向撑开9mm,取同侧胫骨9mm×9mm×15mm骨块植入撑开区。术后观察四肢运动恢复情况。结果标本在撑开3、6、9mm后,椎管前后径平均增加1.14%、3.53%、5.15%,横径增加7.92%、14.62%、22.74%,截面积增加8.52%,17.99%,25.01%;在撑开3、6、9mm时,两侧椎动脉走行间距平行,撑开12mm时,在C3,4和C6,7椎间椎动脉间距相差2mm,但走行无折屈、受压。撑开前后神经根管各径及长度无变化。标本在撑开3、6、9mm时未见骨折,撑开12mm时2具左侧、1具右侧椎板靠近棘突部骨折,均为裂纹骨折,无移位。4只绵羊术后第2d四肢可以自由行走,无神经、血管损伤征兆。结论经前路颈椎体纵向劈开扩大术,可以增加椎管容积、不影响脊柱三柱稳定结构。动物实验表明椎体横向撑开一定范围内(≤9mm)对颈髓及周围组织无损伤迹象。实验结果初步证实经前路颈椎椎管扩大术安全有效。     

Psychoactive substance use in three sites in China: gender differences and related factors

One year prevalence rates far psychoactive substance use are reported based on a community survey in Hunan, Helongjiang and Jiangsu. Data were gathered on more than 14 000 respondents (15–65 years old). The drinking rates ranged from 58.3% to 82.6% for men and from 16.3% to 31.4% for women. Smoking rates ranged from 64.9% to 68.1% for men and from 0.1% to 20.5% for women. Most drinkers were light users and most smokers were heavy users, Illicit drug use was found in the Hunan site. For both frequency and quantity of psychoactive substance use, women are lighter consumers than males (except for the use of minor tranquilizers and analgesics). Psychosocial factors related to drinking and smoking are also investigated in this study.     

云芝多糖对小鼠超氧化物歧化酶活力的影响(英文)

目的:研究云芝多糖(CVP,ip)对小鼠有关组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力的作用。方法:实验在正常,荷瘤和~(60)Co-γ线辐射损伤小鼠中同步进行。SOD活力测定采用肾上腺素自氧化法。结果:CVP既能不同程度地增强正常小鼠和正常迟发型超敏感性(DH)小鼠淋巴细胞,脾及胸腺中SOD的活力,又能明显恢复或防止肿瘤或辐射对小鼠DH和淋巴细胞,脾及胸腺中SOD的抑制效应。CVP对肿瘤生长和肿瘤组织中SOD活力均有明显抑制作用。结论:CVP对小鼠SOD活性有促进作用,CVP的抗肿瘤和免疫恢复作用与其对SOD的作用有一定的联系。     

内皮超极化因子的研究进展

内皮超极化因子（EDHF）是由内皮释放的NO和PGI_2以外的另一种舒张因子,它通过使平滑肌细胞膜超极化而舒张血管,是内皮依赖性血管松驰的第3种重要机制。EDHF可能是花生四烯酸的细胞色素P450代谢产物EET-s,乙酰胆碱、缓激肽等激动剂作用于内皮细胞,使细胞内游离钙浓度升高,合成和（或）释放EDHF,作用于平滑肌细胞膜,激活钙依赖性钾通道,使细胞膜超极化,抑制电压依赖性钙通道的开放,引起血管松弛。在大血管中NO-cGMP松弛机制可能占主导地位,并且抑制EDHF生成;而在阻力小血管,EDHF则可能是引起血管松弛的主要因素。     

sCD14、Ang2、CRP与急诊创伤骨折伴多发伤患者病情转归关系探究

目的 探讨可溶性白细胞分化抗原14（soluble cluster of differentiation antigen 14,sCD14）、血管生成素2（angiopoietin 2,Ang2）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）与急诊创伤骨折伴多发伤患者病情转归的关系及意义。 方法 选取创伤骨折伴多发伤患者324例,根据患者出院时病情转归情况分为良好组（275例）、不良组（49例）,比较2组一般资料、sCD14、Ang2、CRP水平,应用Pearson分析sCD14、Ang2、CRP与损伤严重程度评分（injury severity score,ISS）关系,采用Cox回归分析急诊创伤骨折伴多发伤患者病情转归的相关影响因素,采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic,ROC）分析sCD14、Ang2、CRP对病情转归预测价值。 结果 不良组ISS评分高于良好组（P＜0.05）;不良组sCD14、Ang2、CRP高于良好组（P＜0.05）;sCD14（r=0.785）、Ang2（r=0.778）、CRP（r=0.842）与ISS评分呈正相关（P＜0.05）;sCD14、Ang2、CRP均是预后相关独立危险因素（P＜0.05）;sCD14、Ang2、CRP预测病情转归的ROC下面积（area under the curve,AUC）依次为0.813、0.757、0.749;挑选出预测敏感度最高（sCD14）、特异度最高（Ang2）的两个指标进行sCD14+Ang2的联合ROC分析显示,两者联合预测病情转归的AUC为0.935,大于任一单一指标（P＜0.05）。 结论 sCD14、Ang2、CRP与急诊创伤骨折伴多发伤患者病情严重程度及病情转归有关,均可作为预测病情转归的标志物,但联合检测sCD14、Ang2能提高预测可靠性,为临床诊疗及护理提供更准确的参考信息。     

胎盘生长因子串联scFv质粒构建表达及亲和力测定

目的:构建并表达胎盘生长因子串联scFv,提升对胎盘生长因子的亲和力。方法:设计不同长度的柔性连接子连接的串联scFv,构建串联scFv质粒,并分别将串联scFv与亲本scFv于原核表达系统进行表达。通过间接ELISA分别测定串联scFv及对应亲本scFv亲和力,分别对数据进行单因素ANOVA方差分析,并使用Dunnett-t检验进行组间比较。结果:柔性连接子长度的不同,会对串联scFv亲和力造成差别。单因素ANOVA方差分析结果表明,各组亲和常数间存在明显的统计学差异,Dunnett-t检验组间比较结果可知,当串联scFv间柔性连接子（GGGGS）n长度n=4和n=5时,亲和力较亲本提升不明显（P＞0.05）;但亲和力在n=6（t335=33.90,t7A10=32.00,均P<0.000 1）及n=7（t335=91.68,t7A10=90.71,均P<0.000 1）时较两亲本均有明显提升。结论:串联scFv可以明显提高单体scFv亲和力。     

骨转换标志物PINP和β⁃CTX在帕金森病患者发生骨质疏松中的预测价值

目的：研究骨转换标志物Ⅰ型胶原氨基端前肽（procollagen type Ⅰ N-terminal propeptide,PINP）、Ⅰ型胶原羧基端前肽（β-cross-linked ctelopeptide of type I collagen,β-CTX）在帕金森病（Parkinson’s disease,PD）并发骨质疏松中的预测价值。方法：纳入PD患者105例,根据是否合并骨质疏松分为骨质疏松组和非骨质疏松组,对所有患者检测25（OH）D、甲状旁腺激素、骨钙素、β-CTX、PINP等骨代谢指标,分析各指标与骨质疏松发生之间的关系。结果：①骨质疏松组少动强直型比例、女性比例、PINP、骨钙素、β-CTX水平均高于非骨质疏松组,骨质疏松组25（OH）D水平低于非骨质疏松组,差异均具有统计学意义; ②相关分析结果显示PD患者骨质疏松发生与骨钙素（r=0.28,P=0.005）、β-CTX（r=0.36,P=0.001）、PINP（r=0.40,P＜0.001）均呈正相关,与25（OH）D（r=-0.30,P=0.002）、PINP/β-CTX（r=-0.56,P＜0.001）均呈负相关,差异具有统计学意义;③多因素二元Lo- gistic 回归分析显示,25（OH）D（OR=0.95,95%CI：0.84~0.98,P=0.041）、PINP/β-CTX（OR=0.90,95%CI：0.83~0.98,P=0.017）是 PD病合并骨质疏松的独立危险因素;④ROC曲线分析示25（OH）D联合PINP/β-CTX时ROC曲线下面积最大,AUC=0.82,灵敏性=0.80,特异性=0.84,P＜0.001。结论：血清25（OH）D水平及PINP/β-CTX比值与PD患者骨质疏松发生密切相关,在PD患者骨质疏松的发生中具有重要的预测价值,二者联合检测时诊断价值更高。