纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究

[目的]制备血管生成素-2小干扰RNA(Ang-2siRNA)质粒纳米微粒,并观察其基因转染能力和基因沉默效果.[方法]应用分子克隆的方法构建Ang-2siRNA质粒,将其与聚乳酸、O羧甲基壳聚糖用水/油/水(W/O/W)双乳化溶剂蒸发法制备纳米微球,扫描电镜观察其形态和粒径.然后转染原代人脐带静脉内皮细胞,观察纳米Ang-2siRNA微粒干扰Ang-2基因表达的效果及其细胞保护功能.[结果]扫描电镜观察到Ang2siRNA纳米微球呈球形和椭球形,粒径150～200 nm,大小分布均匀,包封完整,分散性良好.有较强转基因能力,良好的RNA干扰效果和血管内皮细胞保护功能.[结论]成功制备纳米Ang-2siRNA微粒,并证实其载基因能力和RNA干扰效果,对血管内皮细胞损伤因素有良好保护作用,为进一步研究心肌梗死的血管修复机制奠定了坚实的基础.     

免疫荧光检测人乳头状瘤病毒新技术

利用过氧化氢的氧化作用参与抗原抗体反应,使细胞的膜通透性增强,利于荧光标记抗体染液渗入,从而更快速、广泛地接触抗原,更有效的抗原抗体的嵌合交联。新技术的应用,增强了染色效果,缩短了实验时间,简化了操作,提高了阳性检出率,使实验准确性提高,为临床确诊、疗效观察及预后提供了可靠依据。     

超声电丛刺治疗后急性脑梗死患者神经功能缺损及实验室相关指标的变化

目的:观察超声电丛刺头穴丛刺法治疗急性脑梗死的效果,以及治疗前后体感诱发电位指标及血液生化指标变化。方法:①选择2003-01/2005-06在沈阳脑科医院神经内科住院的急性脑梗死患者261例,男160例,女101例。均为首次患病,且对治疗方案知情同意。将上述患者随机分为2组:丛刺治疗组131例,对照组130例。②丛刺治疗组:采用超声电丛刺治疗仪于头部电丛刺顶区(运动区),以100～200Hz疏密波电针通过6～8h,1次/d,1个疗程30次。对照组:均予以常规脑血管病药物同等治疗。丛刺治疗组和对照组均干预30d。两组疗效判定标准:治疗后神经功能缺损评分减少91%～100%为基本恢复,减少46%～90%为显著进步,减少18%～45%为进步。③采用酶联免疫法测定血浆α-颗粒膜蛋白水平;应用放射免疫法测定血浆血栓素A2水平;采用酶联免疫吸附法双抗体夹心法测定血浆D-二聚体水平;采用免疫透射比浊方法测定脂蛋白(a)水平。应用神经电生理检测仪检测体感诱发电位。④计数和计量资料差异比较采用χ2检验和t检验。结果:急性脑梗死患者261例均进入结果分析。①丛刺治疗组131例中:基本恢复31例,显著进步80例,进步15例,总有效率为96%(126/131);对照组130例:基本恢复14例,显著进步68例,进步12例,总有效率为72%(96/130);丛刺治疗组总有效率明显高于对照组(P<0.01)。②丛刺治疗组治疗后血浆α-颗粒膜蛋白、血栓素A2、D-二聚体和脂蛋白(a)含量较治疗前明显降低(P<0.01)。③丛刺治疗组治疗后体感诱发电位的波潜伏期与传导时间较治疗前明显缩短(P<0.01)。结论:超声电丛刺治疗急性脑梗死效果显著,可显著改善急性脑梗死患者体感诱发电位指标及血液生化指标。     

大咯血的急诊外科治疗

目的　总结 4 4a急诊手术治疗大咯血经验。方法　回顾性研究 195 8～ 2 0 0 1年在本院急诊手术的 89例大咯血患者 ,收集临床表现、诊断方法、原发病因、治疗和结果等相关资料。结果　 85 4 %病例的X线表现与出血部位一致 ,其它诊断方法 (支气管镜、CT、血管造影术等 )作为重要补充。由于 1982年后的早期外科干预 ,术前咯血总量、咯血平均量和低血压、休克发生比例较前明显减少 ,术后并发症从 1982年前的 2 2 2 %降至 17 1% ,围手术期死亡率从 9 3%降至 0。急诊全肺切除术并发症 ( 2 3 3% )高于肺叶切除术 ( 15 2 % )。在过去 4 4a肺结核一直是大咯血的主要原发病因。结论　符合新的外科治疗标准的患者应及早手术 ;选择切除范围要保守 ,首选叶切     

成人阴茎的三维数字化图像分析

目的对成人阴茎进行三维数字化图像分析,为阴茎整形修复获得手术前后形变参数及手术方案的选择,提供精确的形态学数据。方法采用Angel数字快速测量诊断系统,分别测量200例正常成人阴茎安静状态和勃起时的长度、周长、以及勃起时角度与阴茎长度、周径的关系。结果随着年龄和身高增长,阴茎也随之增长;身高与阴茎长度不成正比;阴茎勃起时随着角度的增加硬度增强,但勃起硬度变化时阴茎体积无明显变化。结论从不同径线不同角度对阴茎进行计算机三维测量分析,为阴茎整形修复术前设计、术后效果评价提供重要的量化指标。     

介入治疗下肢深静脉血栓的临床应用

目的 探讨介入治疗下肢深静脉血栓(deep venous thrombosis,DVT)的效果. 方法 38例DVT均行深静脉置管接触性溶栓,12例联合血管球囊扩张及血管内支架置入术.按我院疗效观察标准:治愈,造影检查示血栓完全溶解,静脉壁光滑;显效,静脉回流通畅,静脉内有附壁血栓,管腔内径≥2/3;有效,静脉内仍有血栓残留,管腔内径＜2/3;无效,造影检查示静脉回流不通畅. 结果 治愈22例,显效14例,有效2例.治疗中无严重并发症发生.34例随访3～24个月,其中3～6个月7例,7～12个月12例,13～24个月15例,血栓复发2例,经再次深静脉置管接触性溶栓治疗后部分再通. 结论 介入治疗DVT操作简便,安全有效.     

腹腔镜规则性左肝外侧叶切除术15例

目的探讨腹腔镜左肝外侧叶切除术的可行性。方法2004年12月-2006年8月对病灶位于左肝外侧叶原发性肝细胞癌10例，肝海绵状血管瘤3例，结肠癌肝转移2例，腹腔镜下应用电刀或超声刀、线性切割器等切除左肝外侧叶。结果15例均在完全腹腔镜下行规则性左肝外侧叶切除，无中转开腹。手术时间65—120rain，平均100min；术中出血量50—100ml，平均80ml。肿瘤全部完整切除，无破裂，完整取出标本的边界距肿瘤切缘1cm以上，术后病理证实切端未见癌细胞侵犯。术后无出血及胆漏，术后腹腔引流管3—4d。术后住院3—5d。12例肝癌术后随访1-20个月，平均12．5月，未见肝内复发及手术切口肿瘤种植，所有患者均健康存活。结论腹腔镜规则性左肝外侧叶切除可行、安全。     

与甲壳素缝线体外复合培养大鼠成肌细胞株L6细胞的形态学

目的：探讨甲壳素作为骨骼肌组织工程支架材料的可行性。 方法：实验于2002-06／12在南方医科大学应用解剖学研究所完成。大鼠成肌细胞株L6与甲壳素医用缝合线体外复合培养。倒置相差显微镜下观察细胞的形态和排列情况。并分别在体外复合培养的第1，2，3，4，5，6天，取出细胞支架复合体，扫描电镜观察成肌细胞的形态和排列情况。 结果：①扫描电子显微镜观察显示，甲壳素医用可吸收缝线的表面比较粗糙。②倒置相差显微镜下可见大鼠L6细胞与甲壳素制备的医用可吸收缝合线间黏附良好，细胞沿缝线排列呈现串珠样，并可以见到细胞聚集现象。③扫描电子显微镜观察，接种24h后，细胞主要为圆球形，随后细胞迁移、伸展、并见突起；第3天，成肌细胞主要为梭形，并见融合趋势；4d后，细胞沿材料纵轴排列并相互融合，并见肌小管样结构形成及细胞外基质分泌。 结论：甲壳素具有作为支架以构建组织工程化骨骼肌的潜能，支架的平行排列有助于工程化骨骼肌纤维良好方向性的形成。     

留置超滑乳胶气囊导尿管并发症的原因分析及对策

目的探讨留置超滑乳胶气囊导尿管并发症的原因及对策。方法对586例留置超滑乳胶气囊导尿管患者进行观察,回顾分析。结果留置超滑导尿管并发症与导尿方法、规范操作、留置导尿管的时间及相关知识宣教有关。结论严格无菌操作,选择合适的导尿管、缩短留置尿管的时间是降低并发症的重要措施。     

Global transcriptional profiling demonstrates the combination of type I and type II interferon enhances antiviral and immune responses at clinically relevant doses.

A role for type II interferon (IFN-gamma) in resolving viral infection is suggested by the correlation of hepatitis C virus (HCV) clearance with enhancement of IFN-gamma-producing activated T cells in the resolution of acute HCV infection. Using vesicular stomatitis virus (VSV), a synergistic direct antiviral effect was documented using IFN-gamma1b and a potent, consensus type I IFN (IFN alfacon-1). Global expression profiling following EC50 exposure to IFN alfacon-1, IFN-gamma1b, or a cocktail of the two allowed the antiviral state to be correlated with induction of a subset of IFN-stimulated genes (ISGs). Genes identified through this analysis corresponded to classic antiviral components, ISGs more recently associated with direct antiviral functions, as well as expressed sequence tags (ESTs) and hypothetical proteins. The magnitude of these antiviral EC50-correlated expression events in human hepatoma (Huh7) cells exposed to clinically relevant doses of IFN alfacon-1, IFN-gamma1b, or a cocktail of the two was also probed because the standard of care for patients with chronic hepatitis C is type I IFN-containing regimens. Relative to type I IFNs used alone, the addition of type II IFN caused enhanced expression not only of many of the genes correlated with the direct antiviral state but also of genes involved in (1) antigen presentation to cytotoxic T lymphocytes (CTLs), (2) macrophage, natural killer (NK), and T helper 1 (Th1) cell recruitment and activation, (3) complement system function, (4) apoptosis, and (5) ISGs with unknown functions. As many of these processes are correlated clinically with resolution of chronic HCV infection, the combined use of these IFNs could display a beneficial effect on viral clearance in patients infected with HCV and other viruses through enhancement of one of these processes or of the direct antiviral state.