表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫的构建

H9N2亚型禽流感病毒已经被证实可以传播到人类,对它存在的潜在危害已受到越来越多的关注。因此,研究安全而有效的H9N2禽流感病毒疫苗已迫在眉睫。为研究和缓艾美耳球虫作为活载体表达及运输禽流感病毒抗原的潜能,本研究构建了可稳定表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫。利用黄色荧光蛋白（YFP）及融合的乙胺嘧啶抗性基因（DHFR-TSm2m3）作为报告基因及筛选基因,我们将表达H9N2禽流感病毒HA1抗原的质粒载体核转球虫子孢子,接种鸡后在乙胺嘧啶药物的选择压力下进行筛选并连续传代获得转基因和缓艾美耳球虫系。利用染色体步移和免疫印迹证实了HA1基因的成功插入和表达;利用间接免疫荧光证实HA1蛋白定位于球虫子孢子细胞膜表面和头部。研究进一步发现,转基因球虫的繁殖力与野生球虫相当,感染后亦于第6d达到排卵囊高峰。该转基因和缓艾美耳球虫株具有作为疫苗活载体的潜能。     

脊柱导航辅助机器人技术的现状及远期展望

椎弓根螺钉内固定技术是脊柱外科固定技术的核心。自1985年机器人PUMA 200参与完成了历史上第一台机器人辅助手术以来,已有18款脊柱外科领域相关的辅助机器人出现。本文在概述传统椎弓根螺钉内固定技术的基础上,首先分析了导航辅助机器人辅助椎弓根螺钉置入技术的重要性。其次,比较了串联式及并联式脊柱导航辅助机器人各自的特点,即串联式脊柱导航辅助机器人结构简单、控制简单、灵活性高、运动空间大,而并联式机器人具有体积小、定位精度高、状态维持性好等优点。最后,提出了脊柱导航辅助机器人技术现阶段的问题,并展望了该技术的发展前景。     

贬低-歧视感知量表中文版测评社区人群病耻感的信效度

目的:考察贬低-歧视感知量表(PDD)测评社区人群病耻感的信效度。方法:采用多阶段分层整群抽样,于2011年7月-12月对抽取的天津市1621位18岁及以上社区居民进行贬低-歧视感知量表及心理健康知识问卷调查,按照40%的比例随机抽取被试完成美国精神障碍诊断及统计手册第4版(DSM-IV)轴I诊断临床定式检查患者版(SCID-I/P)的定式访谈,共有668人完成精神科诊断访谈,401人不存在任何精神障碍诊断,267人有精神障碍诊断。使用Cronbachα系数及条目与总分之间的相关系数检验量表的内部效度;探索性因素分析和验证性因素分析PDD量表的因子结构;在无任何DSM-IV轴I障碍诊断的人群中使用多元线性回归分析PDD总分的相关因素。结果:PDD的Cronbachα系数为0.70。各条目与总分呈相关系数在0.31~0.56之间。设定2个因子进行探索性因子分析发现两因子分别为肯定语句条目与否定语句条目。验证性因子分析发现在5个模型中,用潜在方法因子调整肯定与否定语句带来的方法效应时,单一因子(感知的贬低-歧视)模型4与2个独立的因子(感知的贬低,感知的歧视)模型5拟合程度好(GFI=0.96,TLI=0.83,CFI=0.88,RMSEA=0.06;GFI=0.97,TLI=0.84,CFI=0.89,RM SEA=0.06)。在无任何DSM-IV诊断人群中多元线性回归分析显示,PDD量表总分与城乡、性别、职业、婚姻状况、年龄、平均收入及教育程度的相关无统计学意义,仅有心理健康知识问卷得分进入回归方程(β=-0.40,R2=0.02)。结论:贬低-歧视感知量表具有可接受的内部一致性信度,回归分析结果符合构建此量表的"修正标签"理论,可用于国内社区人群精神疾病病耻感研究。     

内镜辅助下后鼓室微创手术入路的临床解剖学研究

目的　为内镜辅助下后鼓室微创手术入路提供解剖学基础。  方法　利用成人15例（30侧）头部标本,解剖并测量后鼓室及其与周围结构之间的位置关系。  结果　面神经锥段中点分别到水平半规管最凸点、鼓室窦前缘中点、卵圆窗中点、圆窗中点、岬小桥下端、岬后脚下端的距离是（3.21±0.41）、（2.79±0.25）、（3.97±0.37）、（6.48±0.53）、(4.85±0.39)、(6.21±0.57)mm;砧骨窝中点至锥隆起顶端、面神经锥段中点、镫骨头中点、圆窗中点、卵圆窗中点、匙突顶点的距离分别为（4.43±0.36）、（3.10±0.28）、(6.55±0.55)、(9.56±0.82、(6.67±0.65)、(4.63±0.39)mm;鼓室窦的深度、横截面短径、横截面长径分别是（3.10±0.27）、（1.05±0.10 ）、（1.89±0.19）mm;后鼓室窦深度、横截面长径、横截面短径分别是(1.15±0.10)、(0.83±0.29)、(0.63±0.51)mm;外侧鼓室窦横截面近似椭圆型,其深度、上下径、左右径分别是 (1.63±0.12)、（0.36±0.03）、(0.74±0.09）mm;面隐窝外侧气房直径(0.28±0.13)mm。  结论　后鼓室解剖结构精细复杂,对其解剖结构的精准定位有利于彻底清除病变和防止术后并发症的发生。     

1178例筛查高风险孕妇的产前诊断

目的评价羊水细胞染色体分析对诊断胎儿染色体异常的临床应用价值。方法对23 288例孕14~21w的孕妇采用时间分辨免疫荧光法（DELFLA）进行血清AFP、Free-βHCG和uE3浓度的检测,结合孕周、体重、年龄等因素,通过风险评估软件进行风险评估。将筛查结果与B超、羊水染色体分析、新生儿检查结果对照。结果 23288例孕妇中筛查出唐氏综合征高危妊娠1178例,筛查阳性率为5.06%（1178/23 288）,经羊水染色体核型分析确诊6例唐氏综合征患儿;18-三体高风险者95例,筛查阳性率为0.41%（95/23 288）,经羊水染色体分析确诊2例;神经管缺陷高危者130例,筛查阳性率为0.56%（130/23 288）,其中确诊为神经管缺陷胎儿30例。结论产前筛查和产前诊断可减少缺陷儿的出生,具有明显的经济效益和社会效益,是落实优生优育政策非常有效的技术手段。     

腰椎骨折围手术期的护理

目的：对腰椎骨折围手术期的护理进行分析,探讨护理效果。方法对130例腰椎骨折患者实施术前心理护理、术前适应性锻炼、术后病情观察、饮食护理、并发症的预防、指导功能锻炼等多种护理措施。结果患者均骨性愈合出院,肢体功能恢复良好。结论腰椎骨折围手术期细致、周到地护理可有效减少患者的并发症,减轻患者痛苦,促进患者早日康复。     

吉林省2009-2012年肠道病毒71型VP1编码区氨基酸位点的变异分析

目的分析2009--2012年引起吉林省手足口病（handfootandmouthdisease,HFMD）流行的肠道病毒71型（EV—A71）的VP1区氨基酸位点的特征性变异位点。方法对2009--2012年分离于吉林省HFMD病例的70株EV—A71分离株的VPl编码区进行逆转录．聚合酶链反应,然后对扩增产物进行核苷酸序列测定,使用Bioedit软件和MEGA4．0软件分析VPl区氨基酸位点的变异特征以及基因亲缘关系。结果2009--2012年在吉林省分离到的70株EV—A71均属于C4a基因亚型,其中69株与2008年安徽阜阳的分离株亲缘关系最近,并且这69株病毒在VPl编码区第22位氨基酸位点均由谷氨酰胺转变为组氨酸（Q—H）,与2008年安徽阜阳株一致。结论引起2009-2012年吉林省HFMD流行的EV-A71可能：来源于安徽阜阳流行株延续传播。     

七种恶性肿瘤患者血清CK和CK-MB含量分析

目的比较肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)在正常人群和恶性肿瘤患者的含量及其异常率。方法检测前列腺癌组患者108例,胃癌组患者139例,乳腺癌组患者101例,胰腺癌组患者160例,结肠癌组患者101例,肺腺癌组患者71例,宫颈癌组患者72例,和健康对照组200名人群血清CK和CK-MB含量。结果前列腺癌组CK含量与正常对照组相比较,有显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);而六种恶性肿瘤组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。七组恶性肿瘤患者CK-MB含量与正常对照组相比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。七组恶性肿瘤患者CK-MB异常率与正常对照组相比,均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组的异常率最高,乳腺癌组次之。结论前列腺患者CK含量会异常升高,胃癌与乳腺癌患者CK-MB异常率较高。     

静脉注射丙种球蛋白治疗对急性期川崎病IgGFc受体和TLR4表达的影响

目的 探讨静脉注射丙种球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)治疗对川崎病(Kawasaki disease,KD) Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)表达的影响.方法 急性KD患儿25例,正常同龄对照儿童15例.流式细胞术检测单核细胞(monocyte cells,MC) TLR4表达水平;双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆TNF-α浓度;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量PCR检测MC FcγRⅡb、TLR4信号转导途径分子(MyD88、TRAF-6、TAKl)和细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)mRNA表达.结果 急性期KD患儿MC TLR4及其转导分子表达明显高于同龄对照组(P＜0.05),IVIG治疗后较治疗前明显降低(P＜0.05);急性期KD患儿MC FcγRⅡb明显低于同龄对照组(P＜0.05),IVIG治疗后明显升高(P＜0.05);急性期KD患儿IL-1β、IL-6、TNF-α表达及血浆TNF-α浓度显著增高(P＜0.05),IVIG治疗后下降(P＜0.05);急性期KD患儿MC FcγRⅡb表达与TLR4表达及炎症细胞因子呈相关性(P＜0.05).结论 IVIG可能上调FcγRⅡb表达,下调TLR4表达,从而抑制炎症反应.     

妊娠相关血浆蛋白A及其基因IVS6＋95（C／G）多态性与急性冠状动脉综合征的相关性研究

目的研究湖北省十堰地区妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）及其基因IVS6＋95（C／G）多态性与急性冠状动脉综合征（ACS）的相关性。方法随机选择ACS患者219例,其中男性125例。女性94例．平均年龄63．25岁。健康对照者212例,其中男性114例．女性98例,平均年龄59．66岁。取血液标本．应用荧光探针聚合酶链反应和基因芯片技术对其PAP-A基因IVS6＋95（C／G）多态性进行基因分型,用电化学发光法检测PAPP—A浓度。结果ACS组PAPP—A显著高于对照组[（45．92±18．39）pg／mL vs 5（4．11±0．83）pg／mL],差异有显著统计学意义（P〈0．01）;亚组急性心肌梗死（AMI）组[（82．42±26．41）pg／mL]和不稳定心绞痛（UAP）组[（30．52±12．62）pg,mL]血浆PAPP-A都显著高于对照组,差异有显著统计学意义（P〈0．01）．AMI组与UAP组相比差异也有显著统计学意义（P〈0．01）。ACS组GG、GC、CC基因型频率分别为43．38％、41．09％、15．53％,对照组GG、GC、CC基因型频率分别为50．00％、43．40％、6．60％,差异具有统计学意义（P〈0．05）。G、C等位基因频率在ACS组和对照组分别为63．93％、36．07％和71．70％、28．30％,差异也具有统计学意义（P〈0．05）。在ACS组和对照组．各类基因型人群PAPP—A浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PAPP-A及其基因IVS6＋95（C／G）多态性与ACS相关．C等位基因和CC基因型是ACS发病的易感危险因素之一。