人类Foxm1b基因的原核表达、抗体制备及其对肝癌细胞中Foxm1b蛋白的识别

 【目的】构建人类Foxm1b基因的原核表达载体，表达并纯化蛋白，制备多克隆抗体，并用此抗体检测肝癌细胞中Foxm1b基因的表达，为进一步研究Foxm1b基因的功能奠定基础。【方法】从GenBank中下载人类Foxm1b基因全长cDNA序列并用Pegene软件分析其可能的抗原表位，设计引物．应用RT—PCR获得含抗原表位的Foxm1b基因片段，重组人原核表达载体pET-28a，在大肠杆菌BL-21（DE31中诱导表达，应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫大鼠制备多克隆抗体，用ELISA检测抗体滴度并用免疫细胞化学的方法检测此抗体对肝癌细胞中天然Foxm1b蛋白的识别。【结果】成功构建了Foxm1b基因重组表达载体pET-28a—Foxm1b，表达的蛋白经纯化后免疫大鼠得到了高滴度的多克隆抗体．该抗体可以识别肝癌细胞中的天然抗原。【结论】人类Foxm1b基因的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及有诊断价值的抗体的制备为后续的研究提供了基础。     

腰围动态变化与高血压发病关系的前瞻陛研究

目的 探讨腰围(WC)在随访过程中的动态变化对队列人群高血压发病率的影响.方法 采用前瞻性研究方法,以江苏省多代谢异常和代谢综合征综合防治研究队列满足2次随访的人群为研究对象.第一次随访时WC与基线WC之间的差值来衡量WC的动态变化量,并按照基线和第一次随访是否为腹型肥胖分为控制组和非控制组;以第二次随访是否为高血压作为结局变量(高血压=1,正常血压=0).运用Cox比例风险模型分析WC的变化量以及WC控制与否与随访新发高血压关系.结果 2778名研究对象中,660例为新发高血压患者.不论基线WC正常与否,WC水平在后两组的人群随访中发生高血压的RR值均高于第一组人群.基线WC正常组和腹型肥胖组中,非控制组的高血压累积发病率均高于控制组(基线WC正常组:35.0％vs.18.4％;基线腹型肥胖组:34.7％vs..21.4％).在基线腹型肥胖组中,其随访时仍为腹型肥胖的人群相比WC转为正常的人群发生高血压的RR值(95％CI)为1.95(1.19 ～ 3.19);基线WC正常组中,随访时转为腹型肥胖人群相比WC仍保持正常的人群发生高血压的RR值(95％CI)为2.38(1.89～2.99).调整基线性别、年龄和高血压一般危险因素后,基线腹型肥胖和WC正常组中,非控制组人群相比于控制组人群发生高血压的RR值(95％CI)分别为4.36( 1.69～9.74)和1.44( 1.03～2.35).结论 WC动态变化与高血压发病密切相关,控制WC的增长或降低WC是高血压早期预防的有效措施之一.     

柱前衍生化RP-HPLC同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量及其多元统计分析

目的:建立柱前衍生化反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量的方法并进行多元统计分析。方法:采用柱前衍生化RP-HPLC检测,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Wonda Sil C18-WR色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相A为0.05 mol·L^-1乙酸钠缓冲液(pH 6.5),流动相B为乙腈-甲醇-水(3∶1∶1),梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温35℃。建立主成分分析(PCA)及系统聚类分析(HCA)模型进行多元统计分析并进行质量评价。结果:从锁阳中共分离鉴定了17种氨基酸,含7种人体必需氨基酸。17种氨基酸在各自质量浓度范围内呈良好线性关系,r在0.9990~0.9999;平均回收率在98.03%~103.89%,RSD均<3.5%。PCA和HCA结果基本一致,均可将12个市级产区明显区分为6个区域;PCA可根据不同市级或省级产区对锁阳进行聚类,而HCA可根据省级产区对锁阳进行归类,说明不同市级、省级产区锁阳的氨基酸含量具有产区差异性,且含量分布表现出明显的地域聚集性特点;PCA表明甘肃、内蒙古所产锁阳氨基酸含量较高,质量较佳。结论:所建方法可用于不同产区锁阳中17种游离氨基酸的含量测定,为其综合质量评价提供参考。     

中医气虚体质影响因素的性别差异分析——基于22332例一般人群数据

[目的]探讨中医气虚体质影响因素的性别差异。[方法]应用已建立的健康状况调查数据库中的22 332例数据进行研究。样本数据来自中国江苏、安徽、甘肃、青海、福建、北京、吉林、江西、河南、广东10个省市。采用中医体质量表的气虚质亚量表对气虚体质进行评价。应用单因素分析和多元逐步回归分析法探讨不同性别人群的气虚体质得分影响因素。[结果]多元逐步回归分析结果显示,按照标准回归系数(绝对值)大小从高到低依次排序,影响男性气虚体质评分的因素为有慢性疾病、不太运动、出生后非母乳喂养、婚况因素(未婚)、喜热、喜咸、喜冷(凉)、喜清淡、喜甜饮食;女性为有慢性疾病、不太运动、喜热饮食、出生后非母乳喂养、喜清淡、喜甜饮食。其中共同的影响因素为有慢性疾病、不太运动、出生后非母乳喂养、喜热、喜清淡、喜甜饮食;不同因素为婚况因素(未婚)、喜咸、喜冷(凉)饮食。[结论]不同性别人群的气虚体质得分影响因素虽大致相同,但又有其不同特点。在进行气虚体质调节时,应对性别加以区分。     

陕西省咸阳市医院感染管理专职人员现状分析

目的了解咸阳市医院感染管理专职人员的现状,探讨影响医院感染管理队伍不稳定的原因。方法采用分层随机抽样法,按照医院级别分为二级和三级医院,对不同级别医院分别编号,随机抽取调查医院,抽取咸阳市29所二级及二级以上医院52名医院感染管理专职人员一般情况、专业情况以及医院感染管理队伍不稳定的原因等进行调查。结果医院感染管理专职人员以女性为主,占89.13%;年龄30~50岁最多,占54.35%;学历以本科及以上为主,占47.83%;职称以中级为主,占41.30%;专业以护理为主,占65.22%;从事医院感染工作年限9年比率最高,占91.30%;二级医院和三级医院在年龄、文化程度方面存在统计学差异(均P0.05)。从事医院感染工作前岗位以护理为主,占63.04%;从事医院感染工作主要原因为领导安排(占63.04%)。医院感染管理专职人员队伍不稳定居前3位的原因依次为工作压力大(91.30%)、领导不够重视(78.26%)和待遇低(63.04%)。结论咸阳市医院感染管理专职人员结构不合理,医院感染管理队伍不稳定,工作压力大、领导重视不足以及待遇低是影响医院感染管理队伍不稳定的主要原因。     

膜活性肽在胞内靶向给药系统中的应用

药物的靶向给药从到达的部位讲可以分为 3级 ,第 1级指到达特定的器官或组织 ;第 2级指到达器官或组织内的特定的细胞 (如肿瘤细胞而不是正常细胞 ,肝细胞而不是Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞 ) ,第 3级指到达靶细胞内的特定的细胞器 (例如溶酶体 ,线粒体 ) [1] 。至今 ,前两级的靶向给药系统研究已经取得了长足的进步。如 80年代发展的微粒类被动靶向给药系统已经在制备方法、质量标准、体内分布、药效、毒性等方面有了许多研究报道。又如很多学者致力于将药物与配体通过共价的或物理的方式相连 ,配体与细胞表面的特异性受体接合 ,而到达器官或组织内…     

苍蝇诱捕器灭蝇效果观察

目的通过对电子灭蝇器与"亨科"牌苍蝇诱捕器的对比试验,评价两种产品优劣,寻找最佳灭蝇诱捕器的产品.方法通过目测利用相关密度指数(RPI)和F测验的方法.结果在室外两组数据均表现为F＞F0.01＞F0.05,差异为极显著;室内两种产品F0.01＞F＞F0.05,差异为显著.结论"亨科"牌苍蝇诱捕器比电子灭蝇灯在效果上要明显,是值得推广的环保、高效灭蝇产品.     

皮肤交感反应在糖尿病周围神经病早期诊断中的价值

目的　探讨皮肤交感反应 (SSR)与糖尿病自主神经系统交感神经病变的关系 ,为糖尿病自主神经系统病变的早期诊断提供客观依据。方法　对 80例糖尿病患者及 30名健康人四肢进行SSR测定 ,对两组SSR各波潜伏期及波幅的均值行t检验。结果　两组SSR的起始潜伏期、N波、P波潜伏期比较差异有显著意义 (P <0 0 0 1) ;N波波幅、P波波幅差异无显著意义 (P >0 0 5 )。健康对照组全部可引出SSR ,而糖尿病组仅 2例患者四肢可正常引出SSR ,78例 (97 5 % )患者至少有一肢SSR潜伏期异常。结论　SSR为糖尿病性自主神经系统交感神经病变的早期诊断提供了新的方法和客观依据 ,可发现糖尿病自主神经系统交感神经纤维的早期病变。     

地塞米松对大鼠肝细胞球状体细胞骨架再建的影响

探讨地塞米松对大鼠肝细胞球状体细胞骨架再建的影响机制。肝细胞球状体培养于胶原三维基质中，行ZO-l免疫组化染色；抽提蛋白行蛋白质的印记杂交。ZO-l在肝细胞球状体空泡壁聚集，地塞米松促进Pgp及细胞粘连相关蛋白质的表达，促进小GTPase超家族蛋白Rho A和ERM超家族radixin的表达，Rho A、radixin表达水平与空泡形成率相一致。地塞米松促进大鼠三维培养的肝细胞胆汁分泌，在Rho A和radixin介导下肌动蛋白重新分布，细胞骨架再建，调节紧密连接功能和聚集，导致空泡样结构的形成。     

银杏叶提取物EGB761对AS家兔PON-1和ox-LDL的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对动脉粥样硬化家兔对氧磷酶-1(PON-1)和氧化低密度脂蛋白(oxLDL)的影响。[方法]将24只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、EGB761组(n=8)。正常组给予普通饮食,模型组和EGB761组高脂饮食10周。EGB761组从第7周起给予EGB761 50 mg/(kg·d)灌胃4周,正常组和模型组给予等量生理盐水。采用酶免疫吸附法(ELISA法)和生化法检测PON-1的活性和含量,ELISA法检测ox-LDL的含量。[结果]模型组PON-1活性和含量明显降低(P0.05),ox-LDL的含量明显升高,银杏叶提取物组PON-1活性和含量明显升高,ox-LDL明显降低(P0.05)。[结论]银杏叶提取物EGB761降低ox-LDL、抗动脉粥样梗化(AS)的机制可能与其上调PON-1活性和含量有关。