GDNF基因修饰的NSCs移植对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用研究

目的　探讨移植胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF）基因修饰的神经干细胞（neural stem cells,NSCs）对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护。 方法　用GDNF重组腺病毒载体转染新生大鼠NSCs（GDNF/NSCs）,分化培养7 d后,行免疫细胞化学染色检测微管相关蛋白2（MAP2）。采用改良的插线法制作暂时性脑缺血再灌注模型,3 d后经脑室分别移植生理盐水、NSCs和GDNF/NSCs。于再灌注后1、2、3、5、7周末处死大鼠,行免疫组织化学染色观察移植细胞在脑内的神经元分化及星形胶质细胞在缺血区形成胶质界膜情况,行Luxol fast blue（LFB）染色显示神经纤维损伤情况。 结果　GDNF/NSCs体外分化为MAP2+细胞的比例显著高于NSCs的分化。移植细胞在脑内分化为MAP2+细胞,于再灌注第5周分化达高峰,GDNF/NSCs组于再灌注第3~7周,其MAP2+细胞显著高于NSCs组。各组缺血区由星形胶质细胞形成的血管胶质界膜存在不同程度的破坏,其连续性中断。对照组在各个时间点,血管胶质界膜损伤严重,完整性差,两细胞移植组,其胶质界膜随时间延长逐渐完整,GDNF/NSCs组早于NSCs组完善对胶质界膜的修复。此外,GDNF/NSCs组的神经纤维损伤修复优于NSCs组。 结论　GDNF/NSCs比NSCs对暂时性缺血性脑卒中大鼠模型有更好的神经保护作用,可能是与GDNF提高了NSCs在脑内的神经元分化,增强了NSCs对胶质界膜及神经纤维修复有关。     

肿瘤细胞诱导T细胞下调表达腺苷脱氨酶

目的 蛋白质组学分析鉴定与肿瘤细胞共培养T细胞的表达差异蛋白.方法 双向电泳分离有/无肿瘤细胞共培养的T细胞蛋白,PDQuest软件分析筛选肿瘤细胞诱导表达异常的蛋白点,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF MS)对酶解消化样品进行肽质量指纹图谱(PMF)分析,结合数据库搜索鉴定蛋白质.结果 PDQuest分析有/无肿瘤细胞共培养的T细胞蛋白双向电泳图谱,70余个蛋白点表达水平差异显著,其中与肿瘤细胞共培养的T细胞有一明显表达下调的蛋白点,质谱分析结合数据库检索表明该蛋白点为腺苷脱氨酶.结论 肿瘤细胞诱导T细胞下调表达腺苷脱氨酶.     

基质细胞衍生因子-1α和白细胞介素-1β诱导淋巴管内皮表型的作用

目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及白细胞介素-1β(IL-1β)诱导内皮细胞表达淋巴管表型的作用。方法 SDF-1α和IL-1β分别诱导内皮细胞株CRL-1730,用Real-time PCR、Western blotting及免疫细胞化学等方法检测其内皮及淋巴管标志物,的表达情况。结果 SDF-1α诱导培养之后,CRL-1730细胞株的内皮细胞标志物血管性血友病因子(vWF)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)2随其浓度增高而表达降低,淋巴管标志物平足蛋白(podoplanin)、同源异形盒蛋白-1(Prox-1)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)随其浓度增高而表达增高。IL-1β诱导之后,CRL-1730细胞株的vWF、VEGFR2和podoplanin、prox-1、LYVE-1的变化趋势同SDF-1α,而VE-cadherin的表达量基本不变。结论 SDF-1α和IL-1β都能够诱导血管内皮细胞表达淋巴管标志物。     

128层螺旋CT对肾上腺病变的临床诊断

目的：探讨128层螺旋CT在临床肾上腺病变中的诊断价值,并总结肾上腺病变患者的临床鉴别特点。方法回顾性地分析我院在2013年3月~2014年4月收治的50例肾上腺病变患者的128层螺旋CT的表现资料,并通过随访获得患者的病理结果或是临床证实,获得了患者病变的具体位置、形状与大小等表现特征。结果经过验证,有5例为肾上腺增生,5例为肾上腺囊肿,4例为嗜铬细胞癌,27例为肾上腺腺瘤,4例为皮质腺瘤,2例为髓样脂肪瘤,3例为肾上腺转移瘤。结论128层螺旋CT影像学检查方法的有效应用与推广,在临床上肾上腺病变患者的早期诊断与鉴别诊断中发挥着重要的作用。     

载白细胞介素18基因多聚复合物纳米粒的性质及表达研究

 目的载小鼠白介素18重组质粒纳米粒的性质及其表达研究。方法以无毒的可生物降解的高分子材料聚乙二醇/乙交酯丙交酯作为载体材料,采用双乳化溶剂蒸发法制备了载聚阳离子-DNA复合物纳米粒(polymer-polycationic peptide-DNA,PPD),用透射电镜观察该多聚复合物的形态,用激光粒度仪测定其粒径和Zeta电位,琼脂糖电泳分析抗核酸酶和抗超声的能力,用Westernblot检测在HepG₂肝癌细胞中的表达情况。结果制得的纳米粒,形态圆整,大小均匀,平均粒径(155±2.97)nm,平均Zeta电位为(-27.31±2.02)mV,平均包封率91.12%,质粒制成纳米粒后提高了质粒对抗超声剪切及核酸酶降解的能力,细胞转染表达效率也显著优于裸质粒。结论PPD纳米粒是基因治疗的临床应用中一种很具前景的多聚复合物载体系统。     

刺葡萄籽油对匹伐他汀健康人体药动学的影响

 目的研究健康志愿者服用刺葡萄籽油后对匹伐他汀药动学的影响。方法用自身前后对照随机交叉的试验方法,筛选8名健康受试者,男女各半,一组连续7d口服匹伐他汀钙片,另一组连续7d同时口服刺葡萄籽油软胶囊和匹伐他汀钙片,洗脱2周后,两组交叉服用药物。用HPLC-MS/MS测定血浆匹伐他汀的浓度,用DAS2.0软件计算药动学参数。结果联用刺葡萄籽油软胶囊和匹伐他汀钙片与单用匹伐他汀钙片的主要药动学参数:AUC分别为(152.9±66.26)和(135.556±76.133)μg·h·L^-1,ρ_max分别为(33.51±15.121)和(33.109±21.324)μg·L^-1,t_max分别为(0.688±0.259)和(0.875±0.443)h,t_1/2分别为(15.76±12.118)和(11.753±6.892)h,CL分别为(15.4±1.764)和(17.106±5.027)L·h^-1。结论在健康受试者体内连续服药时,除半衰期延长外,刺葡萄籽油对匹伐他汀的其他主要药动学参数未产生显著性影响。     

应变率显像评价高血压患者左室功能

目的探讨高血压患者左室心肌应变特征。方法90例原发性高血压患者及30例正常人,行常规超声心动图检查并测量左房、左室大小;室间隔和左室后壁厚度及其室壁增厚率,左室短轴缩短率和射血分数;同时测定舒张早期左室充盈峰速度(E)、心房收缩期左室充盈峰速度(A)、E/A比值等参数。依据左室心肌质量指数(LVMI)将90例原发性高血压患者分为两组左室肥厚组52例(LVH,左室质量指数男≥134g/m2,女≥110g/m2);无左室肥厚组38例(NLVH,左室质量指数男<134g/m2,女<110g/m2)。应用应变率显像技术(SRI)分别测定其应变与应变率参数。结果与对照组及NLVH组相比,LVH组收缩期峰值应变(PSS)、收缩期应变率峰值(SRs)及舒张早期应变率峰值(SRe)均降低(P均<0.05),而各组心房收缩期应变率峰值(SRa)无明显差别。结论应变率显像技术可评价不同程度原发性高血压患者的左室心肌收缩、舒张功能。     

P-糖蛋白的免疫斑点定量分析

目的：建立改良的斑点酶联免疫吸附分析，用于膜表达抗原P—gP的血清学鉴定。方法：常规筛选mdr-1稳定表达的K562细胞系；免疫组化和阿霉索抗性鉴定。细胞固相化于圆形硝纤膜纸片，BSA和H2O2封闭。纸片置入ELISA测量井；按照ABC—ELISA程序测定mdr-1基因疫苗免疫小鼠血清抗P—gP的滴度。结果：免疫组化显示稳定表达mdr-1的K562细胞系膜P—gP阳性率近100％，阿霉素IC50较之对照细胞提高100％。斑点酶联免疫吸附分析中，全部对照血清OD450〈0．1（1：2000）；而mdr-1基因疫苗免疫的血清（1：2000）OD450均〉0．496；平行样的变异系数微小。结论：改良的免疫斑点方法可作为测量细胞表达抗原之快速、敏感的测量方法，用于特异性抗体的大样本筛选。     

慢性特发性血小板减少性紫癜患者血清转化生长因子β1测定的意义

目的 探讨血清转化生长因子β1(TGF-β1)在慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)中的临床意义.方法 采用ELISA法检测38例初治CITP患者治疗前后TGF-β1水平.结果 CITP患者治疗前TGF-β1水平[(132.57±5.17)μg/L]明显高于对照组[(76.81±4.42)μg/L],差异有统计学意义(P<0.01).经治疗缓解后血清TGF-β1水平[(81.26±3.78)μg/L]与治疗前相比明显下降(P<0.01).未缓解者TGF-β1水平[(123.49±4.31)μg/L]与初诊患者无明显差异(P>0.05).TGF-β1水平与血小板数呈负相关(r=-0.342,P<0.05),与巨核细胞数呈正相关(r=0.409,P<0.01).结论 TGF-β1参与了CITP的发病,检测TGF-β1水平变化有助于CITP病情判断,可作为疗效观察的辅助指标.     

单孔三通道后腹腔镜肾切除的手术配合

腹腔镜手术在泌尿外科的应用始于20世纪90年代,目前大多数泌尿外科手术都能在腔镜下完成。我院采用单孔三通道后腹腔镜肾切除手术治疗1例左肾实质萎缩,术中出血少、无并发症,手术效果良好。现将手术配合体会报告如下。