基质细胞衍生因子-1α和白细胞介素-1β诱导淋巴管内皮表型的作用

目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及白细胞介素-1β(IL-1β)诱导内皮细胞表达淋巴管表型的作用。方法 SDF-1α和IL-1β分别诱导内皮细胞株CRL-1730,用Real-time PCR、Western blotting及免疫细胞化学等方法检测其内皮及淋巴管标志物,的表达情况。结果 SDF-1α诱导培养之后,CRL-1730细胞株的内皮细胞标志物血管性血友病因子(vWF)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)2随其浓度增高而表达降低,淋巴管标志物平足蛋白(podoplanin)、同源异形盒蛋白-1(Prox-1)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)随其浓度增高而表达增高。IL-1β诱导之后,CRL-1730细胞株的vWF、VEGFR2和podoplanin、prox-1、LYVE-1的变化趋势同SDF-1α,而VE-cadherin的表达量基本不变。结论 SDF-1α和IL-1β都能够诱导血管内皮细胞表达淋巴管标志物。     

冠状动脉病变程度与血浆B型利钠肽对冠心病的影响因素

目的 探讨冠心病患者冠状动脉病变程度与血浆B型利钠肽的关系。方法 选择我院2017年1月~8月住院的冠心病患者54例为A组,同时选择冠脉血管无狭窄的患者26例作为B组,收集所有研究对象的年龄、性别、血糖、血脂、血压、血浆脑钠肽（BNP）浓度、冠状动脉的病变部位及程度等临床资料,观察不同程度冠状动脉病变患者的血浆BNP水平。结果 血浆BNP水平A组较B组升高,统计学意义显著（P＜0.001）。Logistic回归分析显示,年龄、BNP水平、舒张压是冠状动脉狭窄的独立危险因素。在A1、A2及A3组中随着Gensini评分增加,血浆BNP水平逐渐升高,Gensini评分与血浆BNP水平呈明显的正相关（r=0.594,P＜0.05）。结论 血浆BNP参与了冠状动脉狭窄的病理生理过程,是冠状动脉病变的独立危险因素之一;血浆BNP的水平能一定程度上的反映冠脉病变程度。     

化疗药集中调配对临床护士生活质量和生理功能的影响

目的 调查启用静脉用药调配中心前后相关科室临床护士生活质量和生理功能的变化,为相关制度的制订与实施提供依据。方法 根据文献报道和临床经验,设计与临床护士的生活质量和生理功能密切相关的30个问题,采用无记名问卷方式进行调查,以某三甲医院启用PIVAS后最近1年在肿瘤内科、放疗科、血液科等6个病区工作1年以上的临床护士作为调查对象,组成观察组;以启用PIVAS前1年在上述科室工作1年以上的临床护士作为对照组。将有关数据输入计算机中,借助SPSS17.0软件包进行统计分析,比较两组护士生活质量和生理功能的变化。结果 观察组中有45.90%受调查者认为自己目前的健康状况较PIVAS启用前1年有所改善。观察组中经常脱发和乏力、嗜睡、头晕等症状,较对照组减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组上呼吸道感染30.30%、尿路感染32.80%,高于观察组20.50%和25.40%,差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组月经异常者38例（31.15%）,低于对照组50例（40.98%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组发生病理妊娠者6例（4.92%）,低于对照组13例（10.65%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组中有68.90%的受调查者感觉到精神压力减少;96.70%认为工作环境改善;97.50%认为工作效率提高;75.40%认为幸福指数提高。观察组有77.9%受调查者发现输液反应减少。结论 建立PIVAS可减少临床护士的职业危害,改善健康状况和生活质量,提高工作效率和静脉用药的安全性,值得在临床深入研究并推广使用。     

弓形虫慢性感染小鼠的系统性细胞免疫应答规律

弓形虫感染可激发宿主产生Th1型免疫反应,因此研究弓形虫疫苗尤其需要关注系统性T细胞免疫应答与保护力的关系。本研究被弓形虫Pru株包囊口服感染BALB／c小鼠,成功建立了弓形虫慢性感染小鼠模型。慢性感染小鼠的脾细胞用弓形虫可溶性抗原刺激后可以产生特异性增殖。进一步分析发现弓形虫特异性CD3＋T、CD4＋T和CD8＋T细胞都可以产生IFN-γ。本研究建立的弓形虫慢性感染小鼠模型可以产生较强的系统性T细胞免疫应答,为弓形虫疫苗研制的效果评价提供重要参考。     

表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫的构建

H9N2亚型禽流感病毒已经被证实可以传播到人类,对它存在的潜在危害已受到越来越多的关注。因此,研究安全而有效的H9N2禽流感病毒疫苗已迫在眉睫。为研究和缓艾美耳球虫作为活载体表达及运输禽流感病毒抗原的潜能,本研究构建了可稳定表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫。利用黄色荧光蛋白（YFP）及融合的乙胺嘧啶抗性基因（DHFR-TSm2m3）作为报告基因及筛选基因,我们将表达H9N2禽流感病毒HA1抗原的质粒载体核转球虫子孢子,接种鸡后在乙胺嘧啶药物的选择压力下进行筛选并连续传代获得转基因和缓艾美耳球虫系。利用染色体步移和免疫印迹证实了HA1基因的成功插入和表达;利用间接免疫荧光证实HA1蛋白定位于球虫子孢子细胞膜表面和头部。研究进一步发现,转基因球虫的繁殖力与野生球虫相当,感染后亦于第6d达到排卵囊高峰。该转基因和缓艾美耳球虫株具有作为疫苗活载体的潜能。     

GDNF基因修饰的NSCs移植对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用研究

目的　探讨移植胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF）基因修饰的神经干细胞（neural stem cells,NSCs）对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护。 方法　用GDNF重组腺病毒载体转染新生大鼠NSCs（GDNF/NSCs）,分化培养7 d后,行免疫细胞化学染色检测微管相关蛋白2（MAP2）。采用改良的插线法制作暂时性脑缺血再灌注模型,3 d后经脑室分别移植生理盐水、NSCs和GDNF/NSCs。于再灌注后1、2、3、5、7周末处死大鼠,行免疫组织化学染色观察移植细胞在脑内的神经元分化及星形胶质细胞在缺血区形成胶质界膜情况,行Luxol fast blue（LFB）染色显示神经纤维损伤情况。 结果　GDNF/NSCs体外分化为MAP2+细胞的比例显著高于NSCs的分化。移植细胞在脑内分化为MAP2+细胞,于再灌注第5周分化达高峰,GDNF/NSCs组于再灌注第3~7周,其MAP2+细胞显著高于NSCs组。各组缺血区由星形胶质细胞形成的血管胶质界膜存在不同程度的破坏,其连续性中断。对照组在各个时间点,血管胶质界膜损伤严重,完整性差,两细胞移植组,其胶质界膜随时间延长逐渐完整,GDNF/NSCs组早于NSCs组完善对胶质界膜的修复。此外,GDNF/NSCs组的神经纤维损伤修复优于NSCs组。 结论　GDNF/NSCs比NSCs对暂时性缺血性脑卒中大鼠模型有更好的神经保护作用,可能是与GDNF提高了NSCs在脑内的神经元分化,增强了NSCs对胶质界膜及神经纤维修复有关。     

医疗器械临床观察浅议

医疗器械产业发展越来越快,新的医疗器械在批准用于公共健康的程序之前,必须要对它的质量、功效、可靠性和安全性进行临床试验.我院根据自身科室特点,利用我院医疗资源开展医疗器械临床观察.积累了一些经验,总结出来,供大家参考.     

PBL教学法在手术室器械室教学中的应用

手术室是医院的重要部门，手术器械是手术过程中必不可少的工具,随着外科技术的发展，手术器械的种类和数量逐渐增多，手术器械的准备愈显重要。对于器械室的临床带教，传统教学以传授知识为主，而随着知识信息量的不断加大，这种教学方法已经不能完全满足教学的需求。PBL教学法（problem based learning）与传统的教学模式相比，它在传授知识的同时，更加重视学生能力的培养，在当代医学教育改革中产生了广泛的影响。为提高器械室临床教学的实际效果，我们尝试在器械室的实习教学中采用该方法与传统教学法相结合的教学方法，取得了一定的成效。     

LPS和雨蛙肽诱导大鼠离体胰腺组织损伤并抑制HSP60蛋白的变化

目的：观察脂多糖（LPS）、雨蛙肽（cerulein）刺激对大鼠离体胰腺组织热休克蛋白60（HSP60）表达的影响。方法: 分离培养大鼠离体胰腺组织,用低、高浓度cerulein (Cer;10-11mol/L,10-5mol/L)或LPS（10 mg/L,20 mg/L）刺激,以生理盐水（NS）作为对照,在刺激前和刺激后1、4h测定胰腺组织的活力（MTT法）、胰蛋白酶原活性肽（TAP）水平（ELISA测定）,培养上清液中白介素6（IL-6）水平（ELISA测定）;并用 real-time PCR和Western blotting分别测定胰腺组织HSP60 mRNA和蛋白的表达。结果: 低、高浓度的cerulein和LPS刺激胰腺组织后1 h,组织的活力与NS对照组比较稍有下降（P>0.05）,刺激4h后,组织活力明显降低（P<0.05）;组织中TAP水平在高浓度cerulein和低、高浓度的LPS刺激下明显升高;其培养上清液中IL-6水平在刺激后1 h变化不明显,4 h时升高,尤其以高浓度的cerulein或LPS作用显著（P<0.05）。胰腺组织HSP60 mRNA和蛋白的表达量随LPS刺激时间的延长和浓度的升高而降低;而低、高浓度的cerulein刺激HSP60 mRNA的表达增加,但蛋白的表达降低,以高浓度、长时间刺激的作用为明显(P<0.05)。结论: LPS及cerulein对离体胰腺组织具有损伤作用,并呈一定时间及浓度依赖性;同时,胰腺组织HSP60蛋白表达降低,提示HSP60细胞保护作用的减弱可能参与该损伤过程。     

外源精脒和精胺可诱导大鼠早期再生肝抗酶的表达

目的探讨精脒和精胺对大鼠早期再生肝抗酶(AZ)表达的影响,及在肝再生中的作用。方法外源多胺(溶于0.9%NaCl)皮下注射雄性SD大鼠(180～200g),进行部分肝切除(PH)诱导。采用RT-PCR和Western blotting方法进行PH后大鼠再生肝中AZ基因转录量和蛋白表达量的分析。结果对照组完整肝脏(PH后0h)中,AZ基因转录量、蛋白表达量较低,PH后均快速升高,3h达到峰值,5h出现明显下降,7h再次升高并达到峰值,之后缓慢下降。外源多胺处理后,两种剂量精脒(0.03mg/kg和0.15mg/kg)和精胺(0.06mg/kg和6mg/kg)处理组AZ mRNA及蛋白表达水平变化趋势与对照组相似,但低剂量处理组远远低于相应时间点高剂量处理组。精胺的作用效果更明显,作用时间更持久。结论外源多胺对大鼠早期再生肝AZ mRNA及蛋白表达具有剂量依赖性促进作用,而精胺的作用较强,精脒较弱。