强脉冲光治疗面部痤疮后红斑及炎性色素沉着236例疗效观察

目的:观察强脉冲光(I PL)治疗面部痤疮后红斑及炎性色素沉着的临床疗效。方法:采用皇后光子嫩肤仪对有面部痤疮红斑及炎性色素沉着的患者进行治疗,波长560～1200nm,能量密度16～28J/cm2,治疗3～5次为1个疗程,每次治疗间隔时间为4周,1个疗程后观察疗效。结果:236例患者中褐黑色炎性色素沉着51例,红斑137例,红斑加色素沉着48例,其中111例痊愈,显效101例,有效24例,总有效率达100%。结论:I PL治疗痤疮后红斑及炎性色素沉着无创、有效,可临床推广应用。     

累及后柱的胫骨平台骨折的手术治疗

目的 探讨累及后柱的胫骨平台骨折的手术方法及其近期疗效.方法 回顾性分析2009年3月至2012年1月手术治疗的累及后柱的胫骨平台骨折32例,男21例,女11例;年龄23～60岁,平均40.4岁.闭合性骨折30例,开放性骨折2例.合并前十字韧带止点撕脱骨折2例、后十字韧带止点撕脱骨折3例.后外侧柱伴内侧柱骨折6例,采用后外侧+前内侧入路;后内侧柱伴内侧柱、外侧柱骨折7例,采用后内侧+前外侧入路(其中2例辅以前内侧小切口);后内侧柱伴外侧柱骨折11例,采有后内侧+前外侧入路;后内侧柱伴后外侧柱骨折3例,采用后内侧+后外侧入路2例、单纯后内侧入路1例;后内侧柱、后外侧柱伴外侧柱骨折5例,采用后内侧+前外侧入路3例及后内侧、后外侧+前外侧入路2例.行骨折复位钢板固定.结果 32例获得随访,随访时间5～24个月,平均10.7个月.骨折临床愈合时间平均为15.9周,完全负重时间平均为18.1周.术后3个月膝关节活动度平均为113.3°;美国特种外科医院(the Hospital for Special Surgery,HSS)膝关节评分优22例、良6例、可3例、差1例,优良率87.5％(28/32).结论 对累及后柱的胫骨平台骨折,经膝关节后内侧、后外侧入路可获得满意的复位效果,钢板固定可有效重建胫骨平台后柱的稳定性,允许早期功能锻炼,并发症少,近期疗效满意.     

雌激素受体α对膀胱癌细胞增殖和转移影响的实验研究

目的 探讨雌激素受体α(ERα)对膀胱癌细胞增殖和侵袭力的影响机制. 方法 建立ERα过表达的膀胱癌细胞T24ERα模型,对照组为膀胱癌细胞株T24V空质粒组.应用四甲基偶氮唑比色法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,Transwell和细胞划痕实验检测膀胱癌细胞的侵袭能力,蛋白质印迹法检测ERα调节膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的信号通路. 结果 与空质粒对照组相比,实验组在96 h和144 h细胞抑制率分别为18.85％、37.21％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组细胞凋亡率为(18.93±1.41)％,对照组为(9.91±1.08)％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组穿越基质胶的细胞比例为(10.00±2.00)％,显著低于对照组(26.00±3.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫印迹显示与对照组相比,T24ERα细胞内整合素β1、磷酸化FAK、磷酸化Src和Src蛋白表达明显减低. 结论 ERα通过下调整合素β1-FAK/Src信号通路抑制膀胱癌细胞的生长和转移,同时促进膀胱癌细胞的凋亡.     

Smad锚着蛋白在糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化中的作用及机制研究

目的 研究Smad锚着蛋白(SARA)在高葡萄糖诱导的HK-2细胞转分化中的作用及相关机制.方法 用高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,分别采用细胞免疫荧光、Western印迹及实时定量PCR等方法检测HK-2细胞波形蛋白(vimentin)、紧密连接蛋白(ZO-1)、SARA、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2及Smad3的表达.分别转染全长SARA质粒[SARA (WT)]及敲除SBD结构域的SARA质粒[SARA(dSBD)],检测转染后高糖诱导的HK-2细胞Vimentin、ZO-1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3表达的变化.结果 高糖刺激时,HK-2细胞出现转分化 ;ZO-1蛋白和mRNA表达呈时间依赖性下调 ;vimentin蛋白和mRNA表达呈时间依赖性上调,而SARA蛋白和mRNA表达呈时间依赖性下调 ;TGF-β1、Smad3蛋白和mRNA表达呈时间依赖性上调 ;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调 ;Smad2和Smad3磷酸化,Smad3活化时间更长.与高糖刺激组相比,转染全长SARA质粒[SARA (WT)]过表达SARA使HK-2细胞ZO-1表达上调(P＜0.05) ;vimentin表达下调(P＜0.05) ;Smad2蛋白表达上调,但mRNA表达无明显变化 ;Smad2活化时间延长.转染SARA(dSBD)质粒对高糖诱导的HK-2细胞ZO-1、vimentin、Smad2的表达无影响,对Smad2和Smad3的磷酸化亦无明显影响.结论 高糖诱导的HK-2细胞转分化过程中,TGF-β1信号通路活化,SARA的表达下调.过表达SARA可能通过上调Smad2的蛋白表达,延长Smad2活化时间,从而抑制TGF-β1信号传导,进而抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化进程.     

急性缺血缺氧诱导肝癌细胞自噬及其相关机制

目的:研究急性缺血/缺氧时肝癌细胞HepG2增殖率及自噬的变化,探讨自噬的作用及机制。方法 :以Western印迹法检测缺氧诱导因子-1(hypoxia induced factor-1,HIF-1)表达并确定体外模拟模型的可靠性;吖啶橙染色后采用荧光显微镜定性观察自噬;以自噬特异性蛋白LC3及P62(P62/SQSTM1)信号蛋白的变化表明自噬的诱导和可能的调控机制;以CCK8检测3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬前后急性缺血/缺氧下HepG2细胞的增殖率变化。结果:急性缺血/缺氧2 h后,HepG2细胞显著表达HIF-1α蛋白,表明体外急性缺血/缺氧模型的可靠性。急性缺血/缺氧可快速诱导肝癌细胞HepG2产生自噬,继而出现HepG2细胞显著增殖活跃;3-MA抑制自噬后,可特异性抑制急性缺血/缺氧所诱导的HepG2细胞增殖;急性缺血/缺氧条件下HepG2细胞P62信号蛋白表达显著下调,自噬抑制后逐渐恢复正常表达水平。结论:自噬在肝癌体外急性缺血/缺氧过程中对肿瘤起到保护作用,其机制可能与P62蛋白的清除有关;抑制自噬可显著降低肝癌细胞增殖率。自噬可能成为肝癌治疗的新靶点。     

腹腔镜胃旁路术治疗单纯性肥胖症疗效及影响因素分析

目的探讨腹腔镜胃旁路术（LGBP）治疗单纯性肥胖症患者的效果及其影响因素。方法回顾性分析2010年5月至2011年12月间南京医科大学第一附属医院普通外科实施LGBP的41例单纯性肥胖症患者的临床资料,观察手术时间、术中及术后并发症,以及术前、术后的体质量指数（BMI）有多余体质量减少率（EWL）的改善情况,分析与手术疗效相关的因素。结果41例患者全部成功接受腹腔镜下手术。无中转开腹和围手术期死亡病例。手术时间（229±96）min,术中出血（15±3）ml,术后住院时间（5．7±1．7）d。术后1、3、6、9及12个月,患者EWL分别为24．2％、45．6％、60．1％、66．5％和69．0％。术后近期疗效（EWL）与术前BMI呈负相关（P〈0．01）,而与患者年龄、性别及腰臀比无相关性（Ｐ〉0．05）。中心型肥胖（腰臀比大于或等于I）与外周型肥胖（腰臀比小于1）以及有无接受规范化手术治疗的患者,术后近期疗效的差异均无统计学意义（均P〉0．05）;但行规范化治疗者手术时间及术后住院时间均明显缩短（均P〈0．01）。结论LGBP治疗单纯性肥胖症的近期效果显著,其疗效与患者术前BMI呈负相关。规范化治疗尽管未能提高近期治疗效果,但可明显缩短手术时间及术后住院时间。     

经阴道NOTES辅助腹腔镜肾切除术猪动物模型的构建

目的:介绍构建经阴道NOTES辅助腹腔镜肾切除术猪动物模型的经验和体会,并评价其应用价值。方法:本组选择6头健康雌性小型猪,中位重量46(42～48)kg。全麻,取70°侧卧位,双后肢外展。于脐两侧缘分别置入一5mm和10mm trocar。自阴道后穹窿置入一5mm trocar。自阴道trocar置入腹腔镜,脐缘两tro-car置入操作器械。用电凝钩和吸引器锐性和钝性相结合游离肾脏,逐步显露肾蒂,用Hem-o-lock和钛夹阻断肾动静脉及输尿管,完整切除肾脏,装入自制标本袋,扩大阴道后穹窿切口取出。结果:6例经阴道NOTES辅助腹腔镜猪肾切除术均成功完成,未中转标准腹腔镜或开放手术,亦未另增操作通道。其中左侧3例,右侧3例。中位手术时间100(70～150)min。其中建立通道中位时间10(9～22)min,肾脏切除中位时间15(7～30)min,标本取出中位时间65(40～80)min;术中中位失血量30(20～40)ml。术中无大血管及腹腔脏器损伤等严重并发症发生。结论:建立经阴道NOTES辅助腹腔镜肾切除术的动物模型可行。该模型较真实地模仿人体NOTES的操作过程,是现阶段进行学员培训和特殊器械研发较适宜的方式。     

益心康泰胶囊对老年SD大鼠生精功能及血清超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的:观察益心康泰对老龄SD大鼠精子密度和活率,以及血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将老年(24月龄)SD雄性大鼠随机分为空白组、十一酸睾酮组、益心康泰高、中、低剂量组共5组,根据体重,分别给予10 ml/kg生理盐水、4 mg/kg十一酸睾酮悬浊液、0.6 g/kg、0.3 g/kg、0.15 g/kg益心康泰悬浊液灌胃,1次/d,30 d后,取附睾,剥离脂肪、包膜,剪碎放入37℃恒温水浴锅中预热的生理盐水试管内,利用CASA精子自动分析系统(伟力)检测精子各项常规参数。取血查血清SOD和MDA含量。并行睾丸组织HE染色,在光镜下观察睾丸组织形态学变化。结果:与空白对照组相比,高、中、低剂量益心康泰均能显著提高老年大鼠的精子密度[分别为(152.3±24.0)×106/ml、(334.5±97.7)×106/ml、(302.7±158.9)×106/ml、(221.4±75.6)×106/ml,P<0.05]和活率[分别为(26.5±2.0)%、(35.5±5.9)%、(33.1±5.4)%、(28.4±2.1)%,高、中剂量与空白组相比P<0.01],同时,高剂量组可以显著提高血清SOD含量[(22.0±5.3)U/ml,P<0.01],降低MDA含量[(13.6±4.6)nmol/ml,P<0.01];睾丸组织学检测显示,给药组相对于空白组细胞增殖更为活跃,可见较多分裂期细胞,管腔内成熟精子数目较多,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好。结论:益心康泰可以通过影响SOD和MDA的含量而改善老年SD大鼠的生精功能。     

改良型TAT-VP3融合蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备

目的 表达、纯化改良型TAT-VP3融合蛋白,并制备其多克隆抗体.方法 利用原核表达载体PGEX-6P-1/改良型TAT-VP3在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,经GST标签纯化树脂纯化蛋白,并用PreScission Protease酶切除标签,以纯化的蛋白免疫新西兰大白兔,获得改良型TAT-VP3融合蛋白的多克隆抗体.用ELISA进行效价检测,Western blotting鉴定其特异性.结果 诱导表达并纯化了改良型TAT-VP3融合蛋白,纯度大于90%,蛋白浓度为1.2 mg/ml.制备了该蛋白的多克隆抗体,ELISA表明多克隆抗体效价为1∶32 000,Western blotting证明多克隆抗体的特异性良好.结论 成功纯化出改良型TAT-VP3融合蛋白,并制备出高效价、高特异性的多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的体内外抗肿瘤活性及作用机制奠定了基础.     

胸腹腔镜联合与常规三切口食管次全切除术治疗食管癌的比较研究

目的探讨胸腹腔镜联合食管次全切除术治疗食管癌的安全性和有效性。方法回顾性分析2009年3月至2011年10月问在郑州大学附属肿瘤医院接受胸腹腔镜联合食管次全切除术的98例食管癌患者的临床资料。选择同期105例行常规三切口食管次全切除术的食管癌患者作为对照。结果与常规三切口组相比,胸腹腔镜联合组患者术中出血量减少[（85．1±32．8）ml比（215．5±60．6）ml],术后住院时间缩短[（12．7±3．5）d比（16．9±4．5）d],术后肺炎[4．1％（4／98）比12．4％（13／105）]、肺不张[3．1％（3／98）比10．5％（11／105）]、需要处理的胸腔积液[3．1％（3／98）比10．5％（11／105）]、急性呼吸窘迫[1．0％（1／98）比7．6％（8／105）]及心律失常[4．1％（4／98）比12.4％（13／105）]等心肺系统并发症发生率下降,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。两组手术时间和淋巴结清扫数目的差异无统计学意义,术后吻合口瘘、脓胸、乳糜胸、二次开腹、二次开胸、声带麻痹、肾功能衰竭、胃排空障碍发生率及病死率的差异亦无统计学意义（均P〉0．05）。结论胸腹腔镜食管次全切除术治疗食管癌在技术上是安全可行的．在减少术中出血量、降低术后心肺系统并发症和缩短术后住院时间上具有优势。