江西省一起腺病毒感染的出血性结膜炎疫情的分子流行病学溯源

目的 对江西省某地一起暴发出血性结膜炎人腺病毒进行Hexon基因特征分析,在基因层面对该疫情进行病原溯源,为防控策略提供技术支撑。方法 采集出血性结膜炎患者结膜拭子和咽拭子标本,采集排水口和浮板涂抹拭子标本。采用Real - time RT - PCR方法对所有标本进行人腺病毒（HAdV）和人肠道病毒（HEV）核酸检测,对核酸阳性的标本进行Hexon基因部分片段序列测定,运用Bioedit 7.0和MAGE 6.0等生物学软件对测定序列进行处理分析。结果 共采集出血性结膜炎5名患者结膜拭子标本4份,咽拭子标本1份,共检出人腺病毒核酸阳性标本4份,阳性率为80%,标本采集时间最长为发病后10 d。采集排水口和浮板涂抹拭子各1份,均为HAdV的核酸阳性。所有标本HEV核酸检测阴性。共获得4条病例标本Hexon基因部分片段序列,经Hexon基因测序鉴定均为HAdV - E4基因亚型。结论 该起出血性结膜炎疫情可能由HAdV - E4基因亚型污染游泳池水引起。     

氟化钠对L02人正常肝细胞衰老及相关蛋白表达影响的实验研究

目的 研究氟化钠（NaF）是否会诱导人肝细胞 L02衰老及衰老相关标志蛋白水平的改变。方法 不同浓度 (0、1、2、3、4、5、6、7和8mmol/L) NaF 处理 L02人正常肝细胞,CCK-8 法检测细胞存活率的变化以筛选 NaF 的作用浓度;衰老标志物 β-半乳糖苷酶 (β-galactosidase, β-Gal) 染色检测衰老阳性细胞;实时荧光定量 PCR (Real-time PCR) 和蛋白免疫印迹 (Western Blot) 测定细胞衰老标志蛋白 p16,p21 mRNA 和蛋白的表达水平;流式细胞术分析细胞周期的变化情况。结果 CCK-8 结果显示,NaF 浓度为 1、4、7mmol/L时 L02细胞的存活率（87.38±0.93、66.72±2.81、52.17±2.04）均低于对照组［(100.00±0.00),均 P<0.01］,且每组之间的细胞存活率差异存在统计学意义（均 P<0.01）,因此 NaF 选用1、4、7 mmol/L 处理L02细胞作为低氟组、中氟组、高氟组开展研究;β-半乳糖苷酶染色结果显示,低、中、高氟组中细胞衰老率 (23.15±0.23、36.06±0.40、65.36±0.82)均高于正常组［(3.27±0. 27),P<0.01］;Real-time PCR 结果显示,p16、p21 mRNA在低、中、高氟组中表达(2.29±0.19、3.44±0.30、5.25±0.32;1.88±0.22、3.22±0.24、7.33±0.30)表达均高于正常对照组［(1.00±0.00;1.00±0.00),均P<0.01］。低、中、高氟组中p16蛋白水平(93.68±3.40、116.25±7.30、122.31±3.00)均高于对照组［(78.07±4.17),P<0.05,P<0.01,P<0.01),低、中、高氟组中p21蛋白水平(87.61±5.22、121.62±4.27、147.95±7.81)均高于对照组［(61.32±4.56),均P<0.01)］;流式结果显示,低、中、高氟组 L02 细胞周期均停滞在 G2 期,与对照组相比,差异具有统计学意义 (P<0.01)。结论 NaF 处理的人肝细胞 L02 中细胞衰老率及衰老标志蛋白 p16、p21 的 mRNA 和蛋白表达升高,这可能提示了 NaF 可导致 L02 细胞衰老,进一步说明细胞衰老在氟化物诱导的肝损伤中可能具有重要作用。     

2015年江苏省子宫颈癌流行现状及趋势分析

目的 分析江苏省2015年子宫颈癌发病和死亡情况及2006-2015年子宫颈癌流行趋势,为开展子宫颈癌防治工作提供科学依据。方法 利用2018年江苏省疾控中心收集并质控后的35个肿瘤登记处的2015年子宫颈癌登记资料,按城市和农村地区分层,分别计算粗发病率、年龄别发病率、累计发病率（0～74岁）、粗死亡率、年龄别死亡率、累计死亡率（0～74岁）、中国人口标化率（中标率）、世界人口标化率（世标率）等指标;采用Joinpoint软件分析江苏省2006-2015年子宫颈癌发病（死亡）中标率的平均年度变化百分比（AAPC）及其95%可信区间（95%CI）。结果 江苏省2015年子宫颈癌估算新发病例数为6610例,粗发病率为17.53/10万,中标率为12.13/10万,世标率为11.22/10万,累积发病率（0~74岁）为1.19%,在女性恶性肿瘤发病顺位中居第6位。估计子宫颈癌死亡1905例,粗死亡率为5.05/10万,中标率为3.01/10万,世标率为2.87/10万,累积死亡率（0~74岁）为0.31%,在女性恶性肿瘤死亡顺位中居第8位。2006至2015年间江苏省子宫颈癌发病和死亡水平均呈明显上升趋势,发病和死亡中标率的AAPC分别为6.6%（95%CI:4.7～8.4）和5.5%（95%CI:2.9～8.2）。结论 子宫颈癌是江苏省女性的常见恶性肿瘤,其发病与死亡率逐年明显上升,且农村地区发病和死亡水平高于城市地区,应有针对性加强子宫颈癌综合防制工作。     

高效液相色谱法快速检测商陆中毒样品中的两种商陆皂苷

目的建立高效液相色谱法快速检测商陆中毒样品中商陆皂苷的方法。方法采用微波辅助萃取法,提取商陆中的商陆皂苷甲和商陆皂苷乙,C18色谱柱分离后,采用紫外检测器进行测定,检测波长203nm,流动相为乙腈-0.01%磷酸溶液,流速为1.0mL/min。结果商陆皂苷甲和商陆皂苷乙在质量浓度0~500μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数均>0.999,检出限分别为36.5、96.5mg/kg。加标回收率为96.3%~98.6%,相对标准偏差(RSD)为0.13%~0.54%。结论建立的方法简单、快速、准确,适用于商陆中毒样品中两种商陆皂苷的应急检测需要。     

大鼠远端肺动脉平滑肌细胞分离与原代培养

目的探索简便、高效原代培养大鼠远端肺动脉平滑肌细胞的方法,为研究肺动脉高压发病机制提供实验材料。方法采用显微操作和分次酶消化法进行原代培养并与传统酶消化法比较。对培养的细胞进行形态学观察、平滑肌α-actin免疫荧光细胞化学法鉴定、激光扫描共聚焦显微镜计算纯度。结果两种酶消化法均可获得高纯度的远端肺动脉平滑肌细胞。镜下细胞呈典型的"峰-谷"状生长,胞质特异的α-actin阳性表达,细胞纯度达98%。分次酶消化法获得的细胞数及细胞存活率均大于传统酶消化法,并且提前了3d得到足够进行实验的细胞数量。结论本法简便、可靠、低成本,短期内可获得大量高纯度、功能良好的远端肺动脉平滑肌细胞。     

蒙特卡罗技术在辐射剂量学中的应用

由于蒙特卡罗模拟能够细致地描述粒子在物质中的输运过程，辐射剂量学中的许多问题都可以利用蒙特卡罗技术来解决。本文讨论了蒙特卡罗技术在辐射剂量学中的主要应用方面以及近年来的发展方向，并通过实际的计算结果说明应用该技术能够对辐射剂量学的研究起到非常重要的推动作用。     

眶经颅手术入路显微解剖学研究

目的研究经颅至眶部手术入路的显微解剖学及解剖参数,为临床手术入路提供形态学依据。方法应用10例成人头颅湿标本,在放大5-20倍显微镜下,对眶内手术入路进行显微解剖分析及测量。结果内侧入路是经上斜肌与提上睑肌之间的间隙,经此入路可切除眶尖区内侧病变。中央入路是经提上睑肌与上直肌之间的间隙,根据额神经牵向内侧还是牵向外侧分为两种术式;经此入路可行眶内段视神经中段病变的切除。外侧入路是经上直肌与外直肌之间的间隙,根据眼上静脉牵向内侧还是外侧也分为两种术式,经此入路可切除眶尖区上、下、外侧部及眶上裂区病变。结论3种手术入路为经颅至眶部手术避免损伤神经血管提供了显微解剖依据。     

重组幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的高效表达及其初步纯化

目的 在大肠杆菌中高效表达幽门螺直菌的热休克蛋白A基因（hspA)，并对其初步纯化。方法 用巢式PCR扩增hspA基因。经测序证实后，克隆于表达载体pIM-1中，转化大肠杆菌。以SDS－PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达，并测定N－端氨基酸的序列。采用固相镍离子亲和层析，对重组hspA进行初步纯化。结果 扩增的hspA基因为357bp，并在大肠杆菌中得到高效可溶性表达。重组蛋白的表达量最高可达细菌总蛋白的60．5％。免疫印迹及氨基酸测序结果证实，表达产物为幽门螺杆菌hspA亚单位。固相镍离子亲和层析初步纯化的重组HspA的纯度为87．8％，结论 hspA亚单位的高效表达与初步纯化，为批量获得Hp亚单位抗原打下了基础。     

吸烟对大鼠肺内谷胱甘肽与γ-GCS的影响及乙酰半胱氨酸的干预作用

 探讨被动吸烟对SD大鼠BALF中谷胱甘肽浓度（GSH）和肺组织中γ-GCS表达的影响以及乙酰半胱氨酸NAC的干预作用。 方法：SD大鼠被分成吸烟、吸烟同时加用NAC和单纯吸烟3组，分别采用GSH 特异性的 DTNB-GSH还原酶循环法及免疫组化的方法检测GSH浓度及γ-GCS的表达水平。 结果：单纯被动吸烟大鼠肺BLAF中GSH水平较对照和加用NAC组明显升高（P＜0.05）。肺组织内γ-GCS阳性染色明显增强；吸烟与吸烟同时服用NAC组比较没有显著区别（P＞0.05）。 结论：被动吸烟促进SD大鼠肺内GSH和γ-GCS表达，这可能是机体的一种自我代偿反应；NAC对吸烟导致的气道炎症具有一定的保护作用。     

血糖控制对2型糖尿病患者载脂蛋白A水平的影响

目的 观察分析2型糖尿病患者载脂蛋白A（apoA）水平变化与血糖控制状态关系及其可能的影响机制。方法 采用自动生化仪检测213名2型糖尿病患者血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）、载脂蛋白A（apoA）、载脂蛋白B（apoB），用离子交换高效液相色谱分析法测定糖化血红蛋白（HbAlc），比较其与血脂指标的相关性。结果 两组HDL-C水平差异无统计学意义[（1．26±0．45）mmol／L vs （1．13±0．35）mmol／L，P〉0．05]；控制满意组apoA水平显著高于非满意组[（1．16±0．31）g／L vs （0．98±0．32）g／L，P〈0．01]，apoB／apoA显著低于非满意组（P〈0．05）。TC、TG、LDL、VLDL水平两组差异无统计学意义（P〉0．05）。直线相关分析显示apoA与HbAlc、FBG呈显著负相关（r=-0．30，P〈0．01；r=-0．24，P〈0．01）：apoA与HDL、TC呈显著正相关（r=0．74，P〈0．01；r=0．39，P〈0．01）。结论 2型糖尿病患者血糖控制状态显著影响apoA水平，这可能是HDL功能紊乱的重要原因。