睾酮对人血管内皮细胞tPA、PAI-1基因表达的影响

目的:观察睾酮对人血管内皮细胞(HUVEC)纤溶酶原激活物(tPA)及其抑制物1(PAI-1)表达的影响。方法:将体外培养的HUVEC分别与4个浓度睾酮组(3、30、3×103、3×104nmol/L)及单纯培养液对照组作用48h,RT-PCR法观察各组tPA、PAI-1 mRNA表达水平。结果:生理浓度睾酮组(3和30 nmol/L)tPA mRNA水平明显高于对照组,PAI-1 mRNA水平均明显低于对照组(P均<0.05)。3×104nmol/L睾酮组tPA、PAI-1 mRNA水平均明显降低(P<0.05)。结论:生理浓度睾酮通过促进tPA表达,抑制PAI-1合成,增强纤溶系统活性,有利于防止男性冠心病等血栓性疾病。     

腹腔镜肝癌切除术15例报告

目的探讨腹腔镜肝癌切除的可行性与适应证. 方法 1998年8月～2004年9月采用多功能手术解剖器(Peng's multifunctional operative dissector,PMOD)刮吸法断肝技术对15例肝癌行腹腔镜肝癌切除术. 结果 14例腹腔镜肝癌切除术成功,1例因术中出血中转开腹肝癌切除术.腹腔镜肝癌切除术手术时间60～240 min,平均125 min.术中出血量50～2 000 ml,平均501 ml.切除肝脏最大体积10 cm×9 cm×7 cm.术后无并发症发生.术后24 h均能下床活动,术后1～3 d即能进食.术后住院5～10 d,平均6.5 d. 结论对位于肝脏边缘、右肝表面或左半肝的恶性肿瘤,采用PMOD行腹腔镜肝癌切除是可行和安全的.     

地西泮对放射性脑损伤大鼠血脑屏障的影响

目的研究照射前给予地西泮对放射性脑损伤大鼠血脑屏障的影响,探讨其对放射性脑损伤的防护作用机理。方法 240只SD大鼠随机分为4组,每组60只,D-R组:照射前30 min腹腔注射地西泮5 mg／kg;N-R组:照射前未用药;D-SR组:假照射(放置于照射野之外)前30 min腹腔注射地西泮5 mg／kg;N-SR组:假照射前未用药。D-R、N-R组建立清醒状态下大鼠放射性脑损伤模型。分别于照射前即刻、照射后6 h、1 d、1周和1月时记录磁共振成像(MRI)T1加权、T2加权的信号强度及其增强率,测定脑组织中伊文思蓝(EB)含量,免疫组化法分析海马神经元血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并观察病理形态学的改变。结果 N-R组照射后T1加权的信号强度降低,T2加权的信号强度和信号强度的增强率升高,D-R组上述MRI的改变均比N-R组降低,D-R组脑组织EB含量在照射后6 h、1周和1月时及照射后6 h VEGF表达较N-R组降低(P<0．05或0．01)。结论在照射前使用地西泮通过降低脑组织VEGF表达,降低了放射性脑损伤大鼠血脑屏障的通透性,对放射性脑损伤有一定的防护作用。     

载脂蛋白H在肾病综合征患儿肾组织表达的研究

目的研究载脂蛋白H(ApoH)在原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织中的分布及表达变化,探讨其在PNS进展过程中的作用。方法利用荧光定量RT-PCR和免疫组化检测78例不同病理类型的PNS患儿肾组织ApoH的mRNA及蛋白表达,并对肾组织中的肾小管损伤、间质炎症细胞浸润进行评分。肾活检前检测血白蛋白(Alb)、血脂、Scr、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿蛋白定量。14例正常肾组织为对照。结果(1)正常和PNS患儿肾组织中均有ApoH蛋白表达,主要分布于皮质近肾小球的近端肾小管上皮细胞;正常及PNS患儿肾组织均有ApoHmRNA表达,且肾组织ApoH蛋白与mRNA表达呈显著正相关,r=0.264,P<0.05,提示肾脏本身能够合成ApoH.(2)不同病理类型PNS患儿肾组织ApoHmRNA及蛋白表达存在差异,微小病变NS(MCNS)、膜性肾病(MN)组ApoHmRNA及蛋白表达水平分别为4.95±0.40、4.73±0.60和12.06±2.04、12.35±0.61,与对照组(5.44±1.56和12.69±1.89)相比虽有减少,但差异无统计学意义,P>0.05;系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)、局灶性节段性肾小球坏死(FSGS)组ApoHmRNA及蛋白表达水平分别为3.30±0.28、2.82±0.36和10.13±3.09、10.12±1.02,明显低于MCNS、MN及对照组,差异均有统计学意义,P<0.05;(3)激素耐药组ApoHmRNA表达低于激素敏感组,分别为4.27±0.30、     

Fabry病家系的α-半乳糖苷酶A基因突变研究

目的 通过检测3个Fabry病家系基因突变类型明确基因诊断,并进行家系成员的基因型检测.方法 通过PCR和直接测序的方法,对3个Fabry家系的先证者及部分家系成员外周血DNA进行α-半乳糖苷酶A编码GLA基因7个外显子及其相邻内含子的DNA序列检测.结果 （1）先证者1的GLA基因7号外显子内1142位点发生碱基缺失（1142delG）,1142位碱基G的缺失导致蛋白质翻译在390位氨基酸提前终止,该突变国内外均未见报道;（2）先证者2的GLA基因6号外显子内902位点存在1个错义突变,碱基G被A取代,导致其编码的第301位氨基酸由精氨酸变为谷氨酰胺（902G＞A,R301Q）;（3）先证者3的GLA基因3号外显子内484位点存在1个错义突变,碱基T被C取代,导致其编码的第142位氨基酸由半胱氨酸变为精氨酸（484T＞C,C142R）.在3个家系的部分成员中进行基因检测,检出GLA突变基因携带者共6例,其中男性半合子1例,女性杂合子5例,突变类型均与相应先证者符合.100条正常X染色体对照中均未发现上述位点异常.结论 本研究在3个Fabry病家系中检出3种GLA基因突变,其中1142delG为新发现的突变,并在3个家系的部分家系成员中检出男性半合子1例,女性杂合子5例.     

第一趾蹼区游离皮瓣修复虎口及指腹缺损的疗效

目的介绍用第一趾蹼区游离皮瓣修复虎口及指腹软组织缺损的疗效。方法对2例虎口瘢痕挛缩以及5例外伤后手指指腹软组织缺损者,采用第一趾蹼区游离皮瓣修复瘢痕切除后的创面和软组织缺损创面。供区用全厚皮片植皮。结果7例皮瓣全部存活。术后平均随访8个月,虎口开大为健侧的70%,手指指腹外形良好,屈伸自如,两点分辨觉为10~12mm。7例术后3个月足部行走正常,无疼痛;其中2例趾蹼处有瘢痕。结论应用第一趾蹼区游离皮瓣修复虎口及手指指腹皮肤缺损,手术虽然复杂,但术后感觉恢复满意。     

应用微型骨锚重建指伸肌腱终腱止点--附6例报告

目的 探讨微型骨锚在指伸肌腱终腱止点撕脱伤修复中的临床疗效。方法 对6例指伸肌腱终腱止点撕脱患指，先用克氏针将远侧指间关节固定于过伸位，然后将Mitek mcro微型骨锚植人远节指骨基底背侧指伸肌腱附着处，再用锚尾部的4-0 Ethibond缝合线与撕脱的指伸肌腱缝合，重建止点。结果 6例全部获得随访，术后随访3～6个月，平均4．1个月。按Dargan功能评定方法评定：优4例，良2例。术后X线片未见骨锚松动、脱落。结论 微型骨锚用于修复与重建指伸肌腱终腱，操作简便，易掌握，疗效可靠。     

β-1,4半乳糖基转移酶Ⅴ在脊髓损伤过程中的表达

目的 探讨β-1，4半乳糖基转移酶-Ⅴ(β-1，4-galactosyltransferases Ⅴ，β-1，4-GAIT-Ⅴ)在正常和损伤脊髓组织中的定位及表达变化。方法 将56只SD大鼠随机分为7个实验组和1个对照组，实验组按Allen法制作急性脊髓损伤模型，并分别按伤后6、12、24、48、72h、7和14d取材。将用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)扩增的β-1，4-GalT-Ⅴ片段克隆到pGEM-T载体中。体外转录合成地高辛标记的正、反义β-1，4-GalT-Ⅴ RNA探针。原位杂交分析β-1，4-GalT-Ⅴ mRNA在正常和损伤大鼠脊髓组织中的定位及表达变化。结果 β-1，4-GalT-Ⅴ在大鼠正常脊髓灰质中表达。脊髓损伤后12h表达明显增高，持续到72h表达下降，但仍明显高于对照组。结论 β-1，4-GalT-Ⅴ在脊髓灰质中表达，并在脊髓损伤后表达发生变化，提示β-1，4-GalT-Ⅴ在脊髓损伤中过程中起到一定作用。     

树突状细胞与尤文肉瘤细胞融合诱导肿瘤免疫应答的体外研究

目的检测尤文肉瘤细胞A673和树突细胞(DC)融合构建的肿瘤疫苗对尤文肉瘤细胞株A673 的杀伤作用.方法应用促融合剂PEG对尤文肉瘤A673细胞和从外周血单个核细胞(PBMC)诱生的树突细胞进行融合.利用细胞因子hGM-CSF和hIL-4从 PBMC诱生DC,并对其表型进行流式细胞仪(FCM) 分析,红色荧光染料PKH-26标记A673细胞,绿色荧光染料PKH-67标记DC,应用促融合剂PEG融合后光镜及电镜观察DC细胞和融合细胞形态,FCM检测融合效率,通过同种混合淋巴细胞反应检测其免疫刺激活性.通过IFN-γ ELISA法产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的量,通过51Cr细胞杀伤试验检测融合细胞对A673 细胞的杀伤作用.结果 FCM检测出从PBMC 成功诱生出CD83、CD80、CD86 及HLA-DR 高表达的成熟DC.DCs/A673融合细胞的融合效率达到23%,同种混合淋巴细胞反应显示DCs/A673融合细胞有很强的免疫刺激活性.IFN-γ分泌检测显示DCs/A673融合细胞组较对照组产生CTL水平显著增高.51Cr释放法检测融合细胞体外诱导抗原特异的CTL, 融合细胞激活的CTL对肿瘤细胞系A673细胞的杀伤作用强于DC-A673混合组、DC组、A673组的CTL(P<0.05),作用较对照各组显著增强.结论 DC与A673细胞融合体外致敏自体T 淋巴细胞能生成抗原特异CTL 对尤文肉瘤细胞A673 有一定的杀伤作用.