9 Survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞的抑制作用

目的:探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对人肝癌细胞HepG2的抑制作用。方法:采用免疫组织化学法检测肝细胞癌（HCC）组织中survivin的表达。采用脂质体介导survivin ASODN体外转染人肝癌细胞株HepG2，Western blot检测细胞survivin蛋白的表达，FCM检测细胞的凋亡率，观察细胞在软琼脂中的集落形成能力。建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察survivin ASODN的体内抑癌作用。 结果:（1）肝癌组织中survivin表达阳性率为75.8％(25/33)，明显高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.01);（2）survivin ASODN体外转染可明显下调HepG2细胞survivin蛋白表达，ASODN组HepG2细胞凋亡率明显高于空白对照组和SODN组(P<0.01)，ASODN组HepG2细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于空白对照组和SODN组(P<0.01);（3）ASODN组瘤体生长速度较空白对照组和SODN组明显减慢(P<0.01)，ASODN组瘤体重量较空白对照组和SODN组明显减轻(P<0.05)。结论:Survivin在HCC组织中高表达;survivin ASODN可以诱导HepG2细胞凋亡，在体外实验和动物实验中对HepG2细胞生长都有抑制作用。     

指背逆行筋膜岛状皮瓣的临床应用

目的探讨I期修复同指中、末节掌、背侧及指端缺损的方法。方法自1997年6月～2006年10月,对59例(63指)手指皮肤缺损的患者,采用指背逆行筋膜岛状皮瓣旋转30°～180°移转修复。结果除2例皮瓣远端部分坏死外,余均成活,经3～6个月随访,功能及外观良好。按TAM法评定,优41指,良18指,可4指,优良率达94%。结论该术式操作简单、疗程短、成功率高,皮瓣血运可靠,柔软耐磨。多指远端同时缺损的修复其优越性尤为明显。     

三氧化二砷纳米微粒对抑制兔血管平滑肌细胞增殖作用的实验研究

目的 了解纳米微粒与普通剂型的三氧化二砷（As2O3）对抑制体外培养的兔血管平滑肌细胞（VSMC）增殖作用的差别。方法 对照组为不加药物的细胞，实验组为3μmol／L纳米微粒和普通剂型的As2O3，干预体外培养的兔VSMC细胞72h，进行四唑氮盐（MTT）染色测定细胞吸光度（A）值。用流式细胞仪检测细胞凋亡情况，提取细胞DNA，进行凝胶电泳分析，将3组的结果进行比较。结果 3μmol／L纳米剂型的As2O3，干预细胞，细胞数量随作用时间的延长逐渐减少，细胞生长明显受抑制，而普通剂型干预细胞，生长受抑制程度较纳米剂型弱。24h时，对照组、3μmol／L普通剂型组与纳米组，A值分别为0．68±0．10、0．58±0．12、0．33±0．12，48h时分别为0．79±0．11、0．48±0．14、0．28±0．11，72h时分别为0．96±0．13、0．34±0．15、0．20士0．06，差异均有统计学意义（Ⅳ值分别为10．934、15．039、15．539，P值均〈0．01）。流式细胞仪检测，纳米剂型As2O3、普通剂型As2O3干预及对照组的细胞干预48h，细胞增殖率分别为44．97％、58．54％、74．02％，早期凋亡率分别为16．89％、11．27％、11．20％，晚期凋亡率分别为26．56％、23．60％、12．46％，坏死细胞分别为11．58％、6．59％、2．32％。DNA电泳，As2O3干预细胞，可见凋亡梯形条带，部分细胞坏死，呈模糊的无间隔片状条带。纳米剂型药物作用的细胞DNA条带，梯形条带更多、更模糊。结论 As2O3，可以抑制体外培养的VSMC增殖，且纳米剂型As2O3较普通剂型的As2O3，对细胞抑制作用更强。     

锁骨骨折三种内固定治疗方法的疗效比较

目的比较重建钢板，记忆合金、克氏针钢丝三种方法治疗锁骨骨折的效果。方法重建钢板组28例，记忆合金组16例，克氏针钢丝12例手术疗效比较。结果重建钢板组：优22例，良5例，差1例，优良率96．4％；记忆合金16例：优8例，良6例，差2例，优良率87．5％；克氏针钢丝组12例：优6例，良3例，差3例，优良率75％。结论重建钢板组是锁骨骨折需要手术治疗中最适宜方法。     

胶原蛋白海绵在皮肤扩张术中的应用

目的：观察胶原蛋白海绵在皮肤扩张术中的临床应用效果。方法：选择40例（个）皮肤扩张器埋置和50例（个）皮肤扩张器取出及15例自身对照的病例组,应用胶原蛋白海绵术中贴敷于渗血创面,术后观察其吸收、止血效果。结果：术中渗血于2～10min内停止,病例组中无血肿发生,术后引流量明显减少,伤口愈合时间缩短。结论：在皮肤扩张术中胶原蛋白海绵是一种良好的生物止血材料。     

运用siRNA建立稳定低表达IGF1R基因的肝癌细胞株的实验研究

目的运用siRNA技术在肝癌细胞株中建立稳定低表达人胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)基因的细胞株。方法构建包含封闭IGF1R基因的真核表达载体pSUPER-IGF1R-siRNA,转染SMMC7721和Hep3B细胞,G418筛选表达稳定的细胞株。通过RT-PCR、Western-blot分析与鉴定IGF1R mRNA和蛋白及cyclin D1、cyclinB1蛋白的表达,并绘制细胞生长曲线。结果在SMMC7721和Hep3B细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株,其生长明显减慢(P<0.05),且其cyclinD1表达亦明显下降(P<0.05)。结论pSUPER-IGF1R-siRNA能抑制SMMC7721和Hep3B细胞的生长。     

Delayed wound healing in Mac-1–deficient mice is associated with normal monocyte recruitment

The Mac-1 integrin is an important mediator of migration and inflammatory activation of neutrophils and monocytes. However, the role of Mac-1 in modulating macrophage emigration and activation and its subsequent impact on cutaneous wound healing have not been fully elucidated. To examine the significance of Mac-1 to murine wound healing, we measured epithelialization and granulation tissue formation in partial-thickness ear wounds and full-thickness head wounds, respectively, in Mac-1-deficient mice. Wounds were histologically analyzed at postwounding days 3, 5, and 7. The gap measured between the leading edges of inward-migrating granulation tissue was significantly increased in knockout mice compared with control animals at day 5 (3.8+/-0.3 vs. 2.6+/-0.5 mm; p<0.001) and day 7 (2.2+/-0.4 vs. 0.96+/-0.73 mm; p=0.005). Epithelial gap measurements were also increased in knockout mice vs. wild-type controls at days 3 (0.62+/-0.02 vs. 0.54+/-0.07 mm; p<0.05) and 5 (0.58+/-0.06 vs. 0.39+/-0.08 mm; p<0.001). Immunohistochemistry showed equal numbers of macrophages in knockout and control wounds. These findings show that Mac-1 is required for normal wound healing but that the attenuation in the deposition of granulation tissue and wound epithelialization in Mac-1 knockout mice is not associated with decreased monocyte migration into the wound.     

腹腔镜D3淋巴清扫联合保留盆腔自主神经直肠癌根治术对男性性功能的影响

目的 对比分析腹腔镜和开腹联合保留自主神经的D3直肠癌根治术对男性性功能的影响.方法 采用前瞻性研究的方法,将我院2006年6月至2007年10月入选的男性直肠癌患者119例随机分别进行开腹(OS组59例)和腹腔镜(LS组60例)手术,两组病例均采用联合保留自主神经的D3直肠癌根治术.在术前和术后3、6和12个月,分别采用IIEF问卷对男性性功能进行评价,对比两组病例术后性功能情况.结果 术后3次随访结果显示,LS组性功能障碍总发生率分别为23.3%、18.3%和11.6%,OS组分别为32.2%、27.1%和16.9%;两组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 腹腔镜D3淋巴清扫联合保留自主神经的直肠癌根治术能够达到与开腹手术相同的效果.     

联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞增殖和形态的影响

目的:观察体外联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞形态和增殖的影响,为研究成纤维细胞和平滑肌细胞生物学特性和相互关系以及体外构建含此两种细胞的组织工程皮肤提供理论和实践基础。方法:在体外分别分离培养成纤维细胞和平滑肌细胞并常规传代培养。模拟组织工程皮肤的结构及成纤维细胞和平滑肌细胞间的相互影响途径,按照不同比例(平滑肌细胞:成纤维细胞=1:1,1:2,1:3)建立以胶原凝胶为基质的成纤维细胞与平滑肌细胞联合培养模型。应用荧光标记、组织学观察和MTT法对平滑肌细胞的形态和代谢进行研究。结果:联合培养模型法可以有效地建立起成纤维细胞和平滑肌细胞的相互影响模式。1:1组的成纤维细胞对联合培养的平滑肌细胞增殖有促进作用,1:3组的促增殖作用则不明显。结论:1:1联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞增殖有促进作用,对它们体外培养和扩增以及相互关系的研究对阐明这两种细胞组合作为真皮替代物种子细胞具有重要的意义。     

Reconstruction of musculoskeletal defects about the knee for tumor

One of the most challenging problems of limb salvage is a large tumor involving the knee joint. Since 1970, 79 patients, ranging in age from 14 to 74 years (mean, 27 years), have had reconstruction of the knee after en bloc resection of a primary bone tumor. Sixty-one patients had lesions involving the distal femur, with a mean resection length of 13.5 cm, and 18 patients had lesions involving the proximal tibia, with a mean resection length of 10.5 cm. Thirty-nine patients had malignant lesions, of which osteosarcomas predominated, and 40 patients had benign tumors, of which giant cell tumors were the most prevalent. Reconstruction was done with a custom total knee arthroplasty in 41 patients, a resection arthrodesis in 27, and an allograft in 11. The functional results were graded according to the rating system devised by the Musculoskeletal Tumor Society. of the patients with resection arthroplasty, 70% had a good or excellent rating, although ten required revision. Of the patients with resection arthrodesis, 74% had a good or excellent rating, as did 55% of the patients with osteochondral allografts. When a limb salvage procedure is done, careful consideration must be given to the type of procedure chosen to reconstruct the knee. This decision is based on a number of factors related to the tumor and the patient. Although these various procedures promise functional restoration, the reconstructive procedure should be individualized and designed to meet the needs of the patient.