新等位基因人类白细胞抗原B*4609的发现和确认

目的 鉴定一个人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)新等位基因HLA-B*4609.方法 使用序列特异性寡核苷酸PCR技术进行HLA基因分型,发现反应格局异常的可疑新等位基因,应用分子克隆和DNA双向测序技术测定新等位基因的核苷酸序列,并与已知等位基因进行序列比对分析.结果 检出1个样本HLA-B位点反应格局异常,DNA测序分型结果一个为B*151101,另一个的核苷酸序列与已知的HLA等位基因均不同,该基因序列与同源性最高的HLA-B*460101基因序列相比,在第3外显子区域中527位碱基发生A→T突变,导致176位编码氨基酸由谷氨酸(GAG)变成缬氨酸(GTG).结论 样本中含有HLA-B新等位基因序列.该序列申报后,被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B*4609.     

中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞与CD4~+CD25~+调节性T细胞相关性研究

目的：对中国HIV感染者NK细胞、CD8^＋T细胞及胞内穿孔素、颗粒酶-B表达与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞水平的相关性进行研究,探讨调节性T细胞在HIV感染中的作用机制。方法：选取73名HIV/AIDS患者（长期不进展组、无症状HIV组、AIDS组）,应用流式细胞仪胞内染色技术检测NK细胞、CD8^＋T细胞数量及胞内穿孔素、颗粒酶-B表达水平,分析其与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞水平的相关性。结果：CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞百分率与NK细胞、CD8^＋T淋巴细胞数量呈明显负相关（P〈0.01）,与CD8^＋T细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达百分率呈明显正相关（P〈0.05）,与NK细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达水平绝对值负相关（P〈0.01）,与CD8＋T细胞内颗粒酶-B表达绝对值呈明显负相关（P〈0.01）,与CD8^＋T细胞内穿孔素表达绝对值无明显相关性（P〉0.05）。CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞绝对值与CD8^＋T细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达百分率呈明显负相关（P〈0.05）。结论：中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞数量功能的变化与调节性T细胞显著相关,提示高水平的调节性T细胞可能与细胞毒性淋巴细胞耗竭相关,可能为导致疾病进展的原因之一。     

人绒毛膜滋养层细胞的分离纯化及鉴定

目的建立一种简便易行、经济有效的纯化培养滋养层细胞的方法.方法:取孕6-8w的正常绒毛组织10例,采用胰蛋白酶消化法分离细胞,将细胞随机分为两组(各5例),一组用淋巴细胞分层液进行纯化,另一组未纯化,最后用含15%胎牛血清的培养基培养细胞.用免疫细胞化学法进行细胞纯度鉴定.结果本纯化的细胞阳性率为(68.6 2±2.69)%,纯化后的细胞阳性率为(91.60±1.55)%,两者之间的差异具极显著性意度( P<0.001).结论该法简便易行,经济有效,可获得纯度较高、合乎试验要求的细胞滋养层细胞.     

义齿钛合金成分的d-电子合金理论法设计

针对目前义齿用钛合金不足 ,采用d -电子合金设计理论设计了新型Ti-Fe -Mo -Mn -Nb -Zr系列义齿钛合金。研究了Fe、Mo、Mn、Nb和Zr对钛合金β相稳定性的规律。结果表明Fe、Mn、Mo和Nb有利于提高合金β相的稳定性 ,而Zr降低 β相的稳定性。d -电子合金设计理论结合成本核算 ,优化得到了比Ti2 9Nb13Ta4 .6Zr合金具有更优良的力学性能、成本更低 ,硬度更接近牙本质的钛合金Ti1Fe13Mo12Mn17Nb6Zr和Ti2Fe15Mo12Mn11Nb9Zr,这两种合金自腐蚀电位高 ,耐腐蚀性能良好。     

抗角蛋白抗体进入活细胞的共聚焦显微镜观察

目的：观察抗角蛋白抗体能否进入活细胞。方法：以鼠单克隆抗体（mAb)IgG作用于培养中的人Tca8113细胞，以黑素瘤细胞和抗HBsAg抗体作用的Tca细胞作为阴性对照。细胞固定后与FITC标记的羊抗鼠IgG结合，用荧光显微镜及共聚焦显微镜，观察细胞的荧光着色。结果：抗角蛋白mAb作用的Tca8133细胞胞浆呈亮绿色，着色较均匀，细胞核未见着色。两种对照均未见着色。结论：抗角蛋白mAb可进入活细胞，并结合于胞浆成分。     

THP-1单核细胞氧化低密度脂蛋白过程中基因表达谱的改变

目的检测与巨噬细胞氧化低密度脂蛋白可能相关的信号传导相关蛋白基因。方法利用低密度脂蛋白作用人单核细胞系THP-1,通过基因芯片分析人信号相关蛋白的表达谱,期望获得阐明氧化机制的有价值的线索。结果在被检测的1 651个基因中,13个基因的表达变化超过了2倍以上,其中9个基因表达增加,4个基因表达减少。在表达增加的基因中,有2个基因已在新近的报道中被认为可能与动脉粥样硬化相关。结论我们的发现可能为揭示巨噬细胞氧化低密度脂蛋白的机制提供全新的思路。     

CCK-8上调小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2表达并增强其协同刺激活性

目的： 探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对静息巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激功能的影响。方法：用CCK-8（10-12-10-6 mol/L）孵育小鼠腹腔巨噬细胞一定时间，采用流式细胞术分析细胞表面B7.1和B7.2含量的变化。用免疫磁珠从小鼠脾细胞分离CD4+T细胞，按4∶〖KG-*2〗1数量比与腹腔巨噬细胞（预先用CCK-8和/或抗B7.1抗体、抗B7.2抗体、CCK1R拮抗剂CR1409、CCK2R拮抗剂CR2945孵育24 h）共同体外培养，同时加入ConA 5 mg/L，采用［3H］掺入法测定CD4+T细胞增殖反映巨噬细胞的协同刺激活性。结果：CCK-8可上调静息巨噬细胞B7.1及B7.2的表达，并增强巨噬细胞的协同刺激活性。CCK-8的作用呈剂量依赖性，最大效应剂量是在10-9-10-7 mol/L之间。抗B7.2抗体可减轻CCK-8增强巨噬细胞协同刺激活性的作用，CR1409及CR2945均能逆转CCK-8的上述作用，且CR1409的作用较CR2945更明显。结论：CCK-8通过上调巨噬细胞B7.2表达而增强其协同刺激活性，该作用由CCK1R及CCK2R介导，其中CCK1R起主要介导作用。     

水通道蛋白3在人胎盘和胎膜中的表达及分布

目的 研究正常妊娠晚期人胎盘和胎膜水通道蛋白3(AQP3)的表达及分布.方法 收集5例正常足月妊娠剖宫分娩的胎盘和胎膜样本,用RT-PCR测定AQP3 mRNA在胎盘和胎膜组织中的表达;用Western印迹和免疫组织化学方法检测AQP3蛋白质水平在胎盘和胎膜的表达.结果 RT-PCR显示AQP3 mRNA在胎盘和胎膜组织均有表达.Western印迹结果显示胎盘组织在29 000左右有一特异性条带.免疫组织化学结果显示AQP3表达于合体滋养细胞,而在羊膜上皮细胞未见表达.结论 AQP3在胎盘母儿液体平衡中可能发挥重要作用.     

单肺移植手术前后的供体肺保护

目的 探讨肺移植手术前后供体肺保护的处理经验.方法 回顾性分析了2003年1月至2006年8月本院施行的同种异体单肺移植手术9例,其中左侧3例,右侧6例.冷低钾肺保护液灌注移植肺,术后三联免疫抑制剂抗排斥,并分析术后的胸片评分、氧合指数及肺动脉压变化情况.结果 供体肺缺血时间平均为(308.6±50.8)min.8例患者均成功脱离呼吸机并存活过围手术期(＞30 d),术后拔除气管插管时间平均(4.8±3.4)d,1例未能脱机并在术后22 d死亡.结论 肺保护需要在多个环节中加以控制,不同时期的保护侧重点不同.