上调Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F（PPM1F）对鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移的影响,并阐明其作用机制。 方法 鼻咽癌HONE-1细胞分为pcDNA3.1组（转染pcDNA3.1质粒）和pcDNA3.1-Flag-PPM1F组（转染pcDNA3.1-Flag-PPM1F质粒）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中PPM1F和E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA及蛋白表达水平,CCK-8法和克隆形成实验检测2组细胞增殖活性和克隆形成率,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell实验检测2组细胞中迁移细胞数。 结果 与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-Flag-PPM1F 组细胞中PPM1F mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,且PPM1F蛋白表达量明显增加,细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,细胞增殖活性、克隆形成率和划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01）,迁移细胞数明显减少（P<0.05）。 结论 上调PPM1F表达能够抑制鼻咽癌HONE-1 细胞增殖和迁移,其机制可能与细胞间的黏附作用有关。     

ACE2基因通过调控Nrf2/HO-1通路改善肾缺血再灌注损伤

目的 探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞HK-2氧化应激、炎症、凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响。 方法 将ACE2慢病毒转染HK-2细胞,按照实验需要分为常氧组(Control组)、缺氧复氧模型组(H/R组)、缺氧复氧转染阴性对照慢病毒组(H/R-NC组)和缺氧复氧转染ACE2慢病毒组(H/R-ACE2组)。细胞经H/R处理后,通过CCK-8法检测细胞活力;RT-PCR及ELISA法检测炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平;比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)表达水平;Western blotting法检测胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、Nrf2、HO-1的蛋白水平。采用Nrf2抑制剂ML385以及HO-1抑制剂SnPPIX抑制Nrf2/HO-1通路,Western blotting法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、Nrf2、HO-1的蛋白表达水平变化,比色法检测SOD和MDA表达变化。 结果 与Control组相比,H/R组细胞活力降低(t=7.58,P<0.001),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均增加(t_MDA=11.08,P_MDA<0.001;t_PCR-IL-6=5.82,P_PCR-IL6<0.001;t_PCR-TNF-α=7.69,P_PCR-TNF-α<0.001;t_PCR-IL-1β=4.80,P_PCR-IL-1β=0.001;t_ELISA-IL-6=34.11,P_ELISA-IL-6<0.001;t_ELISA-TNF-α=14.12,P_ELISA-TNF-α<0.001;t_ELISA-IL-1β=9.63,P_ELISA-IL-1β<0.001;t_Caspase-3=2.73,P_Caspase-3=0.026;t_Bax=27.75,P_Bax<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平下降(t_SOD=7.74,P_SOD<0.001;t_Bcl-2=75.49,P_Bcl-2<0.001;t_ACE2=11.41,P_ACE2<0.001)。与H/R组相比,H/R-ACE2组细胞活力增加(t=3.61,P=0.002),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均下降(t_MDA=6.15,P_MDA<0.001;t_PCR-IL-6=3.34,P_PCR-IL-6=0.006;t_PCR-TNF-α=3.65,P_PCR-TNF-α=0.007;t_PCR-IL-1β=4.06,P_PCR-IL-1β=0.004;t_ELISA-IL-6=14.62,P_ELISA-IL-6<0.001;t_ELISA-TNF-α=10.42,P_ELISA-TNF-α<0.001;t_ELISA-IL-1β=8.65,P_ELISA-IL-1β<0.001;t_Caspase-3=3.74,P_Caspase-3=0.006;t_Bax=30.52,P_Bax<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平增加(t_SOD=3.58,P_SOD=0.007;t_Bcl-2=63.86,P_Bcl-2<0.001;t_ACE2=58.72,P_ACE2<0.001),Nrf2/HO-1信号通路被激活蛋白水平增加(t_Nrf2=44.55,P_Nrf2<0.001;t_HO-1=14.19,P_HO-1<0.001)。然而ML385和SnPPIX处理会抑制ACE2基因过表达在H/R中HK-2细胞的保护作用(F_Bax=11.02,P_Bax=0.003;F_Bcl-2=21.48,P_Bcl-2<0.001;F_Caspase-3=20.80,P_Caspase-3<0.001;F_SOD=133.49,P_SOD<0.001;F_MDA=14.06,P_MDA=0.001)。 结论 ACE2在HK-2细胞缺氧复氧损伤中具有抑制氧化应激、调节炎症、改善凋亡的作用,Nrf2/HO-1信号通路发挥重要作用。     

306名大学生错失恐惧与社交媒体倦怠的关系:睡眠质量和负性情绪的链式中介作用

目的 探讨大学生睡眠质量、负性情绪在错失恐惧与社交媒体倦怠间的中介作用。 方法 采用错失恐惧量表、社交媒体倦怠量表、匹兹堡睡眠质量指数量表、抑郁-焦虑-压力量表简体中文版对306名大学生进行调查。 结果 错失恐惧、社交媒体倦怠、睡眠质量和负性情绪之间呈两两正相关;错失恐惧能正向预测社交媒体倦怠;睡眠质量和负性情绪在错失恐惧和社交媒体倦怠之间起单独中介作用,且睡眠质量和负性情绪在错失恐惧与社交媒体倦怠之间起链式中介作用,负性情绪各维度效应皆成立。 结论 睡眠质量和负性情绪能够为错失恐惧对社交媒体倦怠的影响提供一个解释机制,大学生的错失恐惧既可以直接影响其社交媒体倦怠水平,也可以通过睡眠质量、负性情绪的独立中介效应以及睡眠质量-负性情绪的链式中介效应间接影响。     

中性粒细胞/淋巴细胞比值对冠状动脉旁路移植术后心肌损伤的影响

探讨患者术前中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）对非体外循环下冠状动脉旁路移植术（OPCABG）后心肌损伤以及临床预后的影响。方法 选取2014年1月—2019年12月我院收治的314名行OPCABG的患者,依据患者术前NLR的三分位数分为高比值组（NLR＞2.8,n=102）、中比值组（2.8≥NLR≥1.6,n=106）以及低比值组（NLR＜1.6,n=106）。分别检测患者术前基线、术后8 h及术后24 h肌酸激酶同工酶（CKMB）及肌钙蛋白（CTnI）水平。结果 高比值组患者术后心肌损伤发生率显著高于中比值组及低比值组（P＜0.05）。高比值组术后CKMB峰值显著高于中比值组［2.1(1.2～13.0) ng/mL vs2.0(1.0～7.3) ng/mL, P=0.047］及低比值组［2.1(1.2～13.0) ng/mL vs1.1(0.9～1.6) ng/mL, P＜0.001］。且高比值组患者术后CTnI峰值同样显著高于中比值组［0.075(0.010～0.185) ng/mL vs 0.020(0.000～0.103) ng/mL, P=0.011］,以及低比值组［0.075(0.010～0.185) ng/mL vs0.010(0.000～0.030) ng/mL, P＜0.001］。术前NLR较高是术后患者CTnI升高的独立危险因素（OR：2.809; 95%CI:1.326～5.954; P=0.007）。高比值组患者1年不良心血管事件发生率显著高于中比值组及低比值组（HR：1.80; 95%CI:1.16～2.79; Log Rank P=0.021）。结论 患者术前中性粒细胞/淋巴细胞比值升高是非体外循环冠状动脉旁路移植术后心肌损伤的独立危险因素,而且会增加患者不良心血管事件     

TRPV4抑制剂HC067047对小鼠膝骨关节炎软骨组织的影响

目的探讨瞬时受体电位香草素受体4型通道蛋白(TRPV4)抑制剂HC067047对小鼠膝骨关节炎软骨组织的影响。 方法将30只小鼠均分为假手术组、模型组、HC067047组。假手术组仅切开右侧膝关节髌韧带内侧皮肤,不予处理膝关节囊内结构;模型组、HC067047组手术切除小鼠板股韧带及内侧半月板前角以构建膝骨关节炎,分别用生理盐水、HC067047每天10 mg/kg灌胃。qRT-PCR检测各组小鼠软骨组织中TRPV4 mRNA表达水平。番红固绿染色评估关节软骨受损程度,HE染色分析膝关节软骨下骨的骨量变化。Western blotting检测各组软骨组织中细胞焦亡标志蛋白TRPV4、Caspase-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、GSDMD-N蛋白水平;ELISA、Western blotting分别检测血清、软骨组织中炎症因子水平。 结果与假手术组比较,模型组TRPV4、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18水平显著升高(P＜0.05)。与模型组比较,HC067047组NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18水平显著降低(P＜0.05)。HC067047能明显改善关节软骨形态及降低骨关节炎受损程度,并能维持软骨下骨的骨量。 结论TRPV4抑制剂HC067047能抑制软骨组织细胞焦亡,改善膝骨关节炎小鼠关节软骨的退变。     

血清炎性因子在骨折延迟愈合患者富血小板血浆治疗中的变化

探讨血清炎性因子在骨折延迟愈合患者富血小板血浆治疗中的变化。方法 选取2020年4月—2021年4月我院收治的98例骨折患者,均予以富血小板血浆联合钢板内固定手术治疗,根据术后6个月内是否发生骨折延迟愈合分为延迟愈合组（37例）和正常愈合组（61例）。分别于骨折后1、4、8、12周采集患者血清样本,采用酶联免疫吸附法检测血清人可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）、人可溶性血管细胞粘附分子-1（sVCAM-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症因子水平,并绘制ROC曲线,评估其对骨折延迟愈合的预测价值。采用酶联免疫双抗体夹心法检测血清骨钙素（BGP）、Ⅰ型胶原氨基端肽原（PINP）、碱性磷酸酶（ALP）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）等骨生化代谢指标水平,并采用Pearson分析骨生化代谢指标与炎症因子的关系。结果 骨折1周时,两组患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）;骨折4、8、12周时,延迟愈合组患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子水平均高于正常愈合组（P＜0.05）,且随着时间推移,两组患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α水平先升高后降低,但延迟愈合组炎症因子水平波动较正常愈合组更明显（P＜0.05）。骨折1周时,两组患者血清BGP、PINP、ALP、IGF-1等骨生化代谢指标水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）,且两组各时间点血清ALP水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）; 骨折4、8、12周时延迟愈合组患者血清BGP水平逐渐升高并高于正常愈合组,血清IGF-1水平逐渐升高但低于正常愈合组,骨折8、12周时延迟愈合组患者血清PINP水平低于正常愈合组（P＜0.05）。Pearson相关性分析结果显示,血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子水平与血清BGP呈正相关（r=0.523,P＜0.001）,与血清IGF-1呈负相关（r=-0.467,P＜0.001）。ROC曲线分析结果显示,骨折8周时,血清炎症因子水平诊断骨折延迟愈合的曲线下面积高于0.7,提示其具有较好诊断价值,且联合检测对骨折延迟愈合诊断的灵敏度更高（P＜0.05）。结论 延迟愈合骨折患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子指标水平随骨折时间增加呈现先升高后降低变化,炎症因子指标水平波动明显,且术后8周时血清炎症因子对预测骨折延迟愈合具有一定参考意义     

经皮脊柱内镜下可视化置钉在Endo-LIF椎弓根螺钉置钉中的应用价值

研究经皮内镜下可视化置钉在经皮内镜下后路腰椎融合术（End-PLIF）椎弓根螺钉置钉中的应用价值。方法 纳入2020年10月—2021年4月我院有腰椎融合手术指征的腰椎间盘源性腰痛、腰椎管狭窄症伴腰椎不稳、腰椎间盘突出症伴腰椎不稳、腰椎滑脱症（Meyerding分级I、II）患者共50例。50例患者随机分为甲、乙两组,每组25例。甲组的手术方式为经皮内镜下后路腰椎融合术+经皮脊柱内镜下可视化椎弓根螺钉置钉,乙组的手术方式为经皮内镜下后路腰椎融合术+传统X线透视下经皮椎弓根螺钉置钉。比较两组X线透视总次数、导丝置入时间、手术时间、术后住院时间;采用Gertzbein-Robbins标准评价置钉优良率;术前及术后24 h VAS评分和ODI指数、改良Macnab标准及术后并发症的发生率评价疗效。同时对经皮内镜下改进的置钉器械进行3D打印制造并验证其可行性、实用性。通过上述指标观察其医患X线辐射情况、微创性、置钉的优良率及手术效果。结果 全部患者均完成了手术和随访。甲组患者X线透视总次数、手术时间、导丝置入时间,均少于乙组（P＜0.05）,两组术后住院时间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。两组术前、术后24 h VAS、ODI比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但两组术后24 hVAS、ODI均较术前改善（P＜0.05）。末次随访时,两组患者改良Macnab标准的优良率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。甲组经皮内镜置钉优良率优于乙组（P＜0.05）。两组患者术后并发症发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 经皮内镜下置钉能减少医患X线辐射次数,降低医患辐射暴露风险,且置钉的优良率较高;同时,3D打印的经皮内镜下置钉器械具有可行性和实用性     

SIX2在骨肉瘤组织中表达及其对细胞血管生成与阿霉素耐药逆转的影响

探究SIX2在骨肉瘤组织中表达及其对细胞血管生成与阿霉素耐药逆转的影响。方法 收集2019年3月—2021年12月我院行骨肉瘤手术切除的105例患者的组织标本,免疫组化检测骨肉瘤组织中SIX2表达和微血管密度（MVD）计数;检测骨肉瘤组织中SIX2 mRNA表达水平。将人骨肉瘤细胞系MG-63分为MG-63组、si-NC A组、si-SIX2 A组,将通过阿霉素耐药得到的骨肉瘤阿霉素耐药细胞株MG-63/R分为MG-63/R组、si-NC B组和si-SIX2 B组。分别用MTT法、克隆实验、流式细胞术及Transwell法检测细胞耐药性、细胞增殖、细胞凋亡和细胞侵袭。结果 在骨肉瘤组织中,SIX2阳性表达会随着MVD值升高而增加（P＜0.05）。骨肉瘤组织中SIX2阳性表达与TNM分期、软组织浸润和淋巴结远处转移相关（P＞0.05）。与MG-63组相比,si-SIX A组细胞的血管形成能力明显降低（P＜0.05）;与MG-63/R组相比,si-SIX2 B组细胞IC50、细胞克隆数和细胞侵袭能力均显著降低,细胞凋亡能力明显增加,细胞耐药指数逆转倍数为2.51倍（P＜0.05）。结论 SIX2在骨肉瘤组织中呈高表达,且随着SIX2表达的升高肿瘤血管生成能力也增加;抑制SIX2表达可有效抑制骨肉瘤组织的生成,逆转骨肉瘤细胞阿霉素耐药     

Smo、Gli2及FoxM1对神经胶质瘤诊断和预后的评估价值

目的探讨Smo、胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(Gli2)及叉头框转录因子M1(FoxM1)对神经胶质瘤诊断和预后的评估价值。 方法取80例神经胶质瘤标本为神经胶质瘤组,60例正常脑组织标本为正常组。免疫组化法检测两组Smo、Gli2、FoxM1表达水平,分析其与神经胶质瘤患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析不同Smo、Gli2、FoxM1表达水平神经胶质瘤患者预后的差异,分析影响神经胶质瘤预后的相关因素。 结果神经胶质瘤组织Smo、Gli2、FoxM1高表达率均高于正常脑组织,且随神经胶质瘤患者组织学分级升高而表达率增高(P＜0.05)。不同组织学分级、不同Smo、Gli2、FoxM1表达水平的神经胶质瘤患者5年生存率存在显著差异(P＜0.05)。组织学Ⅲ~Ⅳ级、Smo高表达、Gli2高表达、FoxM1高表达是神经胶质瘤预后的危险因素(P＜0.05)。 结论Smo、Gli2、FoxM1高表达是神经胶质瘤预后的危险因素,三者有望作为神经胶质瘤诊断和预后的判断指标。     

白内障伴青光眼患者术后胰岛素抵抗及炎症因子水平与视觉质量的关系

目的分析白内障伴青光眼患者术后胰岛素抵抗及炎症因子水平变化与视觉质量的关系。 方法选取47例(47眼)白内障伴青光眼患者为研究对象,均接受超声乳化+小梁切除术治疗。术前、术后7天、术后3个月检测患者客观散射指数(OSI)、点扩散函数(PSF)、调制传递函数截止频率(MTF cutoff)、胰岛素敏感指数及白细胞介素(IL)-1β、IL-10、IL-2水平。采用Pearson法分析视觉质量参数与胰岛素抵抗情况及炎症因子的相关性。 结果与术前比较,术后7天和术后3个月最佳校正视力、MTF cutoff及胰岛素敏感指数升高,且术后3个月更高(P＜0.05);与术前比较,术后7天和术后3个月眼压、角膜内皮细胞计数、PSF、OSI及血清IL-1β、IL-2、IL-10水平降低,且术后3个月更低(P＜0.05)。Pearson分析显示,术前、术后7天和术后3个月,白内障伴青光眼患者OSI与胰岛素敏感指数呈负相关(P＜0.05),与血清IL-1β、IL-2、IL-10水平呈正相关(P＜0.05);MTF cutoff与胰岛素敏感指数呈正相关(P＜0.05),与血清IL-1β、IL-2、IL-10水平呈负相关(P＜0.05);PSF与血清IL-1β水平呈负相关(P＜0.05)。术后7天和3个月,PSF与胰岛素敏感指数呈正相关(P＜0.05),与血清IL-2、IL-10水平呈负相关(P＜0.05)。 结论超声乳化联合小梁切除术对视觉质量的改善可能与胰岛素抵抗及炎症因子变化密切相关。