小鼠原位脂肪肝移植模型的建立

目的　建立了ob/ob小鼠脂肪肝移植模型 ,探讨保证建模成功的关键因素。方法　采用小鼠非动脉化肝移植技术 ,5～ 7周肥胖小鼠为供体 ,正常小鼠为受体 ,双袖套法行原位肝移植。受体肝组织行HE染色和油红O染色 ,血清ALT、AST水平检测采用常规生化分析法。结果非脂肪肝移植组 (lean to lean)受体长期存活率 (n =10 )为 70 % ,脂肪肝移植组 (ob/obtoagematchedlean)受体存活率为 0 (n =10 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。脂肪肝移植给体积相当的正常小鼠 ,其短期存活率为 3 0 % (n =10 ) ,所有小鼠术后存活并苏醒 ,但均未超过 2 4h。脂肪肝移植受体ALT水平为 (62 85± 2 93 7)U /L ,AST为 (5 812± 2 942 )U /L ;而正常小鼠移植组ALT与AST水平分别为 (5 96± 114 )U /L ,(1796± 870 )U/L ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,组织学检测显示大量胆管中央凝固性坏死伴出血。结论　该模型的成功建立为我们提供了一种新的肝原发性肝无功能移植模型 ,为脂肪肝移植后脂肪肝细胞受损的机制研究奠定了基础。     

老年2型糖尿病患者胰岛素抵抗相关指标的检测和意义

目的:探讨老年2型糖尿病胰岛素抵抗(IR)及其相关性,为老年2型糖尿病的合理防治提供临床依据。方法:选择120例老年2型糖尿病患者,按胰岛素敏感指数(HOMA)胰岛素抵抗(HOMA-IR)50百分位点将患者分为两组:胰岛素相对敏感组(HOMA-IR<3.56)和胰岛素相对抵抗组(HOMA-IR≥3.56),比较体重指数(BMI)、腰/臀比(WHR)、血压、血生化学检查等指标。用年龄>40岁,<60岁的2型糖尿病患者做对照组。结果:两组老年患者在年龄、性别、舒张压、空腹血糖、胆固醇、高密度脂蛋白、糖化血红蛋白、HOMA胰岛β细胞功能方面无差异;但BMI、WHR、收缩压、甘油三脂、空腹胰岛素、HOMA-IR差异具有显著性。多线性回归分析后,只有腰/臀比、收缩压、甘油三脂、HOMA-IR存在统计学差异。老年患者与对照组相比,IR发生率明显增加,且两者腰/臀比、收缩压、甘油三脂方面也差异显著。结论:IR与老年2型糖尿病密切相关,是临床防治糖尿病的重要靶点。     

日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定

目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白的T细胞表位。方法用SYFPEITHI软件预测日本血吸虫(中国大陆株)副肌球蛋白的T细胞表位，候选表位分别命名为P20、P21、P22、P23、P24。设计并合成候选表位的编码核苷酸，定向克隆入融合表达载体pET-32c( )，经酶切及测序鉴定出重组克隆。阳性克隆经IPTG诱导表达，表达产物以Ni^2 -NTA柱亲和层析及透析纯化。纯化后的硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白体外刺激C3H／HeJ及C57BL／6小鼠腹股沟淋巴结或脾脏单个核细胞，^3H-TdR掺入法检测其增殖。结果候选表位中P20、P21、P22、P23能有效刺激C3H鼠致敏淋巴细胞细胞增殖，P20、P22能刺激C57鼠致敏淋巴细胞增殖。结论P20和P22可能是日本血吸虫副肌球蛋白的通用性T细胞表位。     

日光对皮肤弹性的影响

目的观察日光和年龄对皮肤弹性的影响。方法问卷调查受试者（郊县组94例，市区组105例）的日光曝晒情况，并应用皮肤弹性测量仪测量外眦部、鼻唇沟及眶下皮肤弹性参数，包括：弹性，黏弹性，可扩展性和张力参数。比较不同年龄组间、市区与郊县组间各弹性参数间的差异。结果市区和郊县各弹性参数均与年龄有较好的相关性，随年龄增长，皮肤各弹性参数均下降。郊县组与市区组比较，弹性和黏弹性参数差异较小，而可扩展性和张力参数差异较大。结论弹性和黏弹性参数可能与内在老化有关，而可扩展性和张力参数可能与光老化有关。     

红细胞对创伤性脑内出血大鼠脑含水量及HO-1表达的影响

目的研究大鼠创伤性脑内出血(TICH)中红细胞对脑含水量和血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响,并分析二者的关系,以探讨红细胞在TICH后脑水肿形成中的作用机制。方法120只大鼠随机分为创伤性脑损伤组(TBI组),TBI加注全血组(WB组),TBI加注溶解红细胞组(LRBC组)和TBI加注压积红细胞组(PRBC组),每组30只。4组均采用自由落体打击法造成大鼠脑外伤。后3组借助立体定向仪分别向伤区脑皮质内注射全血、溶解红细胞或压积红细胞,造成TICH模型。每组于伤后1、3、5d分别处死10只大鼠,5只测伤区脑组织含水量,5只用免疫组化法检测HO-1的表达。结果4组组内比较:TBI、WB和PRBC3组第3d的脑含水量最高(分别为82.85%±0.60%,85.00%±1.12%,84.93%±1.21%),LRBC组第1d的含水量最高(84.44%±0.85%;4组间比较,1d时LRBC组含水量最高,3d时WB和PRBC组含水量最高。在WB、PRBC和LRBC组,HO-1阳性表达的强弱与脑含水量的高低变化相一致。结论红细胞在TICH后迟发性脑水肿的形成中有重要作用,其机制涉及红细胞的降解产物。     

己酮可可碱对大鼠睾丸扭转复位后生精功能的保护

目的:探讨己酮可可碱(PTX)对大鼠睾丸扭转复位后生精功能的保护作用。方法:雄性SD大鼠24只,随机分成3组,每组8只,建立睾丸扭转动物模型。第Ⅰ组为假手术组(扭转720°后立即复位),第Ⅱ、Ⅲ组扭转720°2 h,于复位前15 m in分别静脉注射生理盐水和PTX,术后24 h留取手术侧睾丸。应用流式细胞术(FCM)检测各组生精细胞凋亡和各级生精细胞计数,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,化学比色法测定组织内总抗氧化能力(T-AOC)。结果:第Ⅲ组应用PTX后与第Ⅱ组相比,生精细胞凋亡明显减少(399.50±33.31vs1221.75±132.48,P<0.01),单倍体和四倍体细胞群计数显著增多(5554.13±441.28vs4102.35±206.98;1906.00±200.72vs1711.63±144.55,P均<0.01;),T-AOC明显回升(32.52±2.86vs22.76±3.73,P<0.01),MDA含量下降(1.78±0.20vs3.98±0.36,P<0.01),其差异均有显著性(P<0.01)。结论:己酮可可碱对睾丸扭转复位后的生精功能具有明显的保护作用。     

VEGF基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

目的:探讨脂质体介导血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCS)应用于基因治疗的可行性、安全性。方法:体外分离、培养、鉴定MSCs,PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染MSCs,转染后用免疫荧光和ELISA检测MSCs表达VEGF蛋白的情况,MTT检测MSCs对VEGF质粒转染的敏感性。结果:骨髓中分离得到MSCs,流式细胞检测显示MSCs不表达CD34和CD45,但表达CD90。透射电镜观察可见细胞浆中含大量粗面内质网和分泌颗粒。VEGF基因转染MSCs后第5天抗VEGF免疫荧光染色约90%的MSCs呈阳性,ELISA检测结果显示PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染组细胞培养上清液中VEGF含量明显高于对照组,并于转染后第5天达到峰值。MTT检测结果显示VEGF质粒转染对MSCs增殖无影响。结论:MSC可作为VEGF基因转染的靶细胞用于基因治疗。     

降低ePTFE隆鼻术后感染发生率的临床研究

目的:寻找一种降低膨体聚四氟乙烯(ePTFE)隆鼻术后感染发生率的方法。方法:尝试将雕刻成形的ePTFE假体放入含有庆大霉素溶液的注射器内,负压抽吸使庆大霉素溶液进入材料的孔隙,然后将假体置入。结果:比较处理组与未处理组感染发生的情况,庆大霉素处理组的感染率明显低于未处理组,有显著性差异。结论:该方法是一种减少ePTFE隆鼻术后感染发生率的简便易行方法。     

利多卡因混合不同剂量肾上腺素局部浸润麻醉对全麻下鼻内窥镜手术患者血液动力学的影响

目的 观察利多卡因混合不同剂量肾上腺素局部浸润麻醉对全麻下鼻内窥镜手术患者血液动力学的影响。方法 69例拟在全身麻醉下行鼻内窥镜手术的患者随机分为3组（n=23），采用含不同剂量肾上腺素的1％利多卡因进行鼻粘膜下多点浸润注射。Ⅰ组：含1：20万肾上腺素的1％利多卡因4ml（20μg）；11组：含1：10万肾上腺素的1％利多卡因4ml（40μg）；Ⅲ组：1％利多卡因4ml（不含肾上腺素）。采用阻抗心动图（ICG）测量并记录浸润麻醉开始前（基础值）、浸润麻醉开始后0．75、1．5、2．25、3、3．75、4．5、5．25、6min平均动脉压（MAP）、心率（HR）、心脏排血指数（CI）、外周血管阻力指数（SVRI）和加速度指数（ACI），同时评价术中出血状况。结果与基础值比较，Ⅰ组和Ⅱ组在浸润麻醉开始后1．5min时MAP下降，HR增快（P〈0．01）；从浸润麻醉开始后1．5minSVRI下降，CI、ACI上升，到浸润麻醉开始后6min时仍未恢复（P〈0．05或0．01）。与Ⅱ组比较，Ⅰ组在浸润麻醉开始后2．25、3、3．75minMAP下降，从2．25min起CI下降（P〈0．01或〈0．05）。与Ⅲ组比较，Ⅰ组、Ⅱ组出血较少（P〈0．01）；Ⅰ组和Ⅱ组之间差异无统计学意义。结论 全身麻醉下鼻内窥镜手术中局部浸润麻醉时，局麻药中肾上腺素的吸收会引起明显的血液动力学变化，推荐在鼻内窥镜手术中使用含有5μg/ml肾上腺素的利多卡因。     

糖尿病雄性大鼠性腺5α-还原酶Ⅱ型活性变化

目的 :探讨大鼠青春期和成年期糖尿病时性腺 5α 还原酶Ⅱ型的活性变化。　方法 :取 4 0d和 90d龄雄性Wistar大鼠各 30只 ,分别分为对照组 (C)、糖尿病组 (D)和胰岛素治疗糖尿病组 (ID)。采用薄层层析法测定各组附睾头、附睾尾、前列腺和睾丸组织内 5α 还原酶 Ⅱ型的活性。　结果 :①青春期大鼠性腺的各部位内 ,5α 还原酶 Ⅱ 型的活性D组均明显低于C组 (P <0 .0 1) ,而ID组明显高于D组 (P <0 .0 1) ;②成年期大鼠性腺的各部位内 ,5α 还原酶 Ⅱ型的活性在C、D和ID组各组间差异无显著性 (P均 >0 .0 5 )。　结论 :青春期大鼠性腺内 5α 还原酶 Ⅱ型的活性更易受代谢环境、激素水平及局部特异性因素的影响 ,而成年期大鼠性腺内 5α 还原酶Ⅱ 型的活性相对稳定