甲状腺结节微波消融治疗后6个月消融区细胞活性的酶组织化学检测

目的 探讨甲状腺结节微波消融治疗术后6个月消融区组织内细胞活性情况。方法 选择2017年12月至2018年9月甲状腺结节微波消融治疗术后6个月进行消融区粗针穿刺活组织检查病理评估的患者20例24个消融区。使用切割式活检针分别对消融区中央域及边缘域进行粗针穿刺活组织检查,取得标本条置入液氮制成冰冻切片。采用酶组织化学染色法检测细胞内琥珀酸脱氢酶（SDH）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶（NADPH-d）的活性,并与常规病理切片H-E染色观察到的细胞形态及组织结构对比。结果 微波消融术后6个月24个消融区的中央域及边缘域均成功取材。消融区中央域SDH及NADPH-d酶组织化学染色情况一致性好,阴性率均为95.83%（23/24）。消融区边缘域SDH及NADPH-d酶组织化学染色情况一致性好,阴性率均为91.67%（22/24）。23个中央域及22个边缘域的H-E染色切片均显示为红染无结构的大片坏死组织;1个中央域、2个边缘域H-E染色切片显示部分为坏死结构、部分为纤维组织增生,纤维组织增生处与酶组织化学染色阳性区域位置一致。结论 微波消融术后6个月甲状腺结节消融区组织符合凝固性坏死改变,仍处于失活状态,酶组织化学染色结合H-E染色能够对陈旧消融区做出较为客观的评价。     

肥厚型心肌病和扩张型心肌病合并冠状动脉粥样硬化性心脏病心脏

目的基于心脏磁共振成像探讨原发性肥厚型心肌病（HCM）和扩张型心肌病（DCM）患者冠状动脉粥样硬化性心脏病（以下简称“冠心病”）的发生率及影像学特征。方法回顾性分析我院2015年9月至2018年9月经心脏磁共振检查确诊为HCM或DCM且同期完成冠状动脉检查（冠状动脉造影或冠状动脉计算机断层扫描）的患者的临床及影像学资料。两种类型心肌病患者均依据血管狭窄程度分为冠状动脉正常组、冠状动脉粥样硬化组（管腔狭窄≤50%）及冠心病组（管腔狭窄>50%）,比较两种类型心肌病患者冠状动脉疾病的发生情况,以及两种类型心肌病患者3组间临床及磁共振影像学特征的差异。结果心脏磁共振检查符合各类型原发性心肌病患者共681例,其中219例同时进行了冠状动脉相关检查,包括HCM 126例、DCM 78例、其他类型心肌病15例。HCM患者冠状动脉粥样硬化和冠心病的发生率分别为31.7%（40/126）、21.4%（27/126）,与DCM患者[分别为30.8%（24/78）、17.9%（14/78）]相比差异均无统计学意义（P均>0.05）。HCM与DCM冠心病组患者的平均年龄分别为（62.6±9.8）岁、（60.1±7.2）岁,冠状动脉粥样硬化组分别为（59.3±9.5）岁、（58.5±8.8）岁,均分别高于冠状动脉正常组的（49.5±11.0）岁、（49.3±12.9）岁,差异均有统计学意义（P均<0.05）。存在心血管危险因素（糖尿病、吸烟、高血压、高脂血症或肥胖）的HCM和DCM患者的冠心病发生率均较高,分别为70.4%（19/27）、71.4%（10/14）。心脏磁共振成像检查示,除HCM患者冠心病组左心室每搏输出量低于冠状动脉正常组及冠状动脉粥样硬化组[（50.4±21.1）mL vs（64.6±22.9）mL、（64.1±27.1）mL,P均<0.05]外,其他指标如左心室舒张末期内径、心肌内纤维化检出率及左心室功能参数在HCM和DCM患者3组之间差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 HCM和DCM患者均可合并冠状动脉疾病,心脏磁共振检查可以用于诊断心肌病,特别是对合并冠心病心肌梗死的鉴别诊断。     

内异方改善子宫内膜异位症小鼠生殖能力及作用机制

目的 探讨内异方对子宫内膜异位症（EM）模型小鼠生殖能力的影响及作用机制。方法 建立EM小鼠模型,分为内异方组（n=26）、孕三烯酮组（n=25）、EM模型组（n=26）、假手术组（n=24）。连续药物干预15 d后,每组随机选择6只动情前期小鼠行卵巢组织形态学观察;剩余小鼠按雌雄比4︰1行交配实验,连续合笼15 d。观察并统计4组小鼠妊娠、内异灶、盆腔粘连、卵泡发育情况。取4组小鼠肝、肾、脾脏进行组织形态学观察。采用酶联免疫吸附试验检测小鼠腹腔液中炎性因子IL-2、IL-6和IL-10的浓度。结果 内异方组小鼠的妊娠率、内异灶体积、盆腔粘连情况较孕三烯酮组、EM模型组改善（P<0.05,P<0.01）。卵巢组织形态学观察显示内异方组卵泡发育优于孕三烯酮组、EM模型组,在改善卵泡发育方面内异方组优于孕三烯酮组（P<0.05）。与假手术组相比,EM模型组小鼠腹腔液中IL-2、IL-6水平均升高（P均<0.01）,IL-10水平降低（P<0.05）。与EM模型组相比,内异方组、孕三烯酮组小鼠腹腔液中IL-2水平均下降（P<0.01）,孕三烯酮组小鼠的腹腔液中IL-6水平下降（P<0.05）、IL-10水平升高（P<0.01）。孕三烯酮组小鼠妊娠率未见改善,且药物处理后体质量、肝脏和肾脏湿质量均减轻（P均<0.05）,而内异方组小鼠未见明显肝、肾、脾损害。结论 内异方通过抑制内异灶的生长和减少盆腔粘连改善盆腔微环境、促进各级卵泡发育,提高了EM小鼠的生殖能力,且无不良反应,安全性好。     

术前天冬氨酸转氨酶与血小板比值指数预测原发性肝癌肝切除术后肝衰竭的价值

目的 探讨术前天冬氨酸转氨酶与血小板比值指数（APRI）预测原发性肝癌患者发生肝切除术后肝衰竭（PHLF）的价值。方法 回顾性分析2013年9月至2016年12月在广西医科大学附属肿瘤医院接受首次肝切除术治疗的原发性肝癌患者资料,采用logistic回归分析和受试者工作特征（ROC）曲线评估Child-Pugh评分、终末期肝病预后模型（MELD）评分、白蛋白-胆红素（ALBI）评分及APRI预测PHLF的能力。结果 纳入本研究的1 108例原发性肝癌肝切除术患者中,共有217例（19.58%）发生PHLF。Logistc回归分析显示,Child-Pugh评分、MELD评分、ALBI评分及APRI是PHLF的预测因素（P均<0.05）;ROC曲线分析显示,术前APRI[曲线下面积（AUC）为0.745,95%置信区间（CI）：0.709~0.781,P<0.001]预测PHLF发生的能力明显优于Child-Pugh评分（AUC为0.561,95%CI：0.516~0.605,P=0.005）、MELD评分（AUC为0.650,95%CI：0.610~0.691,P<0.001）和ALBI评分（AUC为0.662,95%CI：0.621~0.703,P<0.001）。根据约登指数得到术前APRI的最佳截断值为0.55,此时APRI预测PHLF的灵敏度和特异度分别为71.9%和68.5%,APRI>0.55的患者PHLF的总体发病率及PHLF A、B、C各等级的发病率均高于APRI ≤ 0.55的患者（P均<0.05）。结论 术前APRI预测原发性肝癌患者发生PHLF的能力优于Child-Pugh评分、MELD评分及ALBI评分,对于原发性肝癌的临床治疗决策具有一定的指导意义。     

男性不育症明清时期临床医集相关文献整理研究

[目的]全面了解明清时期中医文献对男性不育症医案、医论、治则、方药的记载。[方法] 经过文献调研,界定查阅中医文献范围为明清临床医集,确定 “无子”“无嗣”等文献检索     

89例下肢瘢痕癌的诊治体会

目的：总结下肢瘢痕癌的临床特点及其诊治方法。方法：回顾性分析中南大学湘雅医院烧伤重建外科 1998年1月至2017年12月收治的89例下肢瘢痕癌患者的临床资料,包括人口统计学、致伤因素、癌变潜伏期、病变部 位、溃疡面积、病理类型、骨质侵犯、淋巴结转移情况、手术方式、修复方法与预后等。结果：89例下肢瘢痕癌患 者中,男70例,女19例;最常见致伤因素依次为火焰烧伤(42例)、创伤(19例)、烫伤(12例)。病变最常见于小腿(31 例),其次为大腿(11例)、足跟(11例);溃疡面积为1.5~600.0 cm2 。其中鳞状细胞癌80例、疣状癌8例、肉瘤1例。术前 发现腹股沟淋巴结肿大78例,行腹股沟淋巴结清扫49例,单纯淋巴结活检、切除29例;9例发现淋巴结转移,8例有 骨质侵犯;24例行截肢术,53例行病灶扩大切除皮片移植术,12例行病灶扩大切除皮瓣修复术。65例得到随访,8例 出现复发,其中截肢者2例,扩大切除者6例,且肿瘤复发与手术方式无关(P>0.05)。结论：下肢瘢痕癌复发转移率较 高,需早期发现、早期诊断,应尽早手术治疗并定期随访;腹股沟淋巴结肿大较常见,需行淋巴结活检、切除或清 扫;局部扩大切除、植皮或皮瓣修复是其主要治疗方法,但癌肿较大、侵犯较深且下肢瘢痕广泛、畸形严重者可考 虑截肢。     

案例教学在病理学实验教学中的应用

病理学是一门理论与形态相结合的学科,实验课教学知识点多,难以理解。本教研室在实验课中将案例教学(case-based learning,CBL)与标本教学相结合,从案例的选择、案例的准备、案例教学的实施方法及注意事项等方面对病理学实验教学进行探讨;通过60名学生的实验课成绩、理论课成绩对比分析发现,案例教学的引入能有效提高学生对病理学学习的积极性,扩展了学生的知识面,增强了学生自学能力、团队协作能力、语言表达能力,巩固了学生对理论知识的掌握,提高了学习成绩,更好地提升了教学质量。     

基于雨课堂的混合式教学在生理学教学中的应用

为在课前高效督促学生预习,课中实施互动教学,课后精确分析教学效果,在生理学教学中,运用雨课堂构建了“课前-课堂-课后”高效、精准、互动、混合式教学和智慧课堂。问卷调查结果表明大部分学生喜欢或非常喜欢雨课堂支持的教学形式;有效促进了学生的平时学习,师生互动,精准掌握了学情,科学精准教学,提高了教学效率,改善了教学效果。     

人NGAL克隆表达及抗体的制备与鉴定

目的：高效表达人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL）重组蛋白并制备其多克隆及单克隆抗体。方法：人工合成经密码子优化的NGAL基因,构建原核表达重组质粒pW28-NGAL,IPTG诱导表达后分离纯化并分析在溶液中的聚集状态;获得的rhNGAL抗原免疫兔子制备多克隆抗体,免疫小鼠筛选高效价的特异性单克隆抗体并鉴定抗体亚型;Protein G亲合柱纯化,等温滴定量热法及非竞争ELISA法检测抗体的亲和力,SDS-PAGE分析纯度;最后运用Western blot、免疫荧光和免疫组化对抗体进行鉴定。结果：高效获得高纯度NGAL重组蛋白,主要以单体形式存在;成功制备兔多抗,同时筛选获得6株高效价单克隆抗体;其中,25号单抗为IgG1亚型,余者均属IgG2a亚型,且19、35号单抗的亲和常数分别为3.06×109、2.14×109。SDS-PAGE分析表明纯度均大于90%。进一步的鉴定结果表明制备的抗体皆具有良好免疫反应性及特异性,且单抗的特异性明显高于多抗。结论：本研究利用密码子优化技术高效表达制备了NGAL重组蛋白,获得了其高效价多克隆抗体和高特异性单克隆抗体,为NGAL的病理生理作用等功能研究提供了良好的实验材料,为NGAL临床免疫检测诊断试剂的国产化奠定了有力的基础。     

药用辅料红糖的全波长融合指纹图谱研究

目的 研究并建立药用辅料红糖的紫外全波长融合指纹图谱。方法 采用Durashell C₁₈-AM色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm,100 A）,乙腈-0.1%三氟乙酸水作流动相,流速1.0 mL/min,梯度洗脱,柱温25 ℃,采用PDA检测器进行210~400 nm全波长检测,使用Waters Empower 3色谱数据软件对210~400 nm紫外全波长数据进行融合,使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件进行相似度分析。结果 35批药用辅料红糖的紫外全波长融合指纹图谱经相似度分析后共标出10个共有色谱峰,各批次的指纹图谱相似度均大于0.9,相似度良好。结论 该方法稳定准确,重复性好,可以为制定药用辅料红糖指纹图谱的质量标准提供依据。