基于转录组学研究岩藻黄素在扰动剪切应力对EPCs炎性及增殖影响

目的 在扰动剪切应力（Oscillatory shear stress, OSS, ±4 dynes/cm2, 1 Hz）作用下内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells, EPCs）转录组学数据生物信息学分析的基础上,探讨岩藻黄素（Fucoxanthin, FUCO）对OSS作用下的EPCs炎性、增殖以及细胞周期等生物活性改变的影响作用。方法 采用Flexcell flow STR-4000流体系统模拟体内扰动流剪切应力环境;利用Illumina高通量测序平台对相应处理的EPCs进行转录组测序分析,并对筛选到的差异蛋白编码基因进行功能以及通路分析;利用实时荧光定量PCR技术（RT-qPCR）验证相应生物信息学数据;Western blot（WB）检测筛选基因-前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）蛋白表达;采用EdU和PI染色分别进行EPCs增殖和周期检测。结果 与静止对照组相比,共计差异表达基因1066个,涉及细胞增殖和死亡、感染性疾病等信号转导通路;GO功能分析显示,该类基因功能主要影响的过程有细胞及细胞组分、细胞进程、细胞器及生物进程等生物活动;根据P值<0.05且Fold change（FC）>2的条件,筛选显著差异基因数17个,并经RT-qPCR以及WB验证,显示PTGS2 mRNA差异表达最为显著（P<0.001）,PTGS2蛋白表达差异明显（P<0.05）;进一步的结果显示,与OSS组EPCs相比,FUCO处理的OSS组EPCs中PTGS2 mRNA表达显著降低（P<0.001）,其蛋白表达被抑制（P<0.05）,并且FUCO处理过的OSS组EPCs增殖活性以及DNA合成能力增强。结论 结合转录组数据基础,提示FUCO能够显著降低OSS引发的EPCs炎症反应,尤其明显抑制炎性因子PTGS2表达;促进EPCs细胞增殖和 DNA合成,这为FUCO临床干预EPCs进而完善心血管疾病干细胞治疗提供理论依据。     

白藜芦醇诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的研究

目的：探讨白藜芦醇诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的作用。方法：以Res（10、20、40μg／mL）作用人胃癌SGC7901细胞,同时设DMSo和培养液作用为对照组。采用MTT法检测Res对人胃癌SGC7901细胞的生长抑制情况．荧光染色法观察细胞形态变化。琼脂糖凝胶电泳法分析SGC7901细胞的DNA片断化。结果：Res对SGC7901细胞生长有明显抑制作用,且随着剂量的增高（10～40μg／mL）而增高,最大抑制率达（53．39±5．32）％;荧光染色结果发现Res48h凋亡细胞增多,镜下可见较为典型的凋亡形态学变化：细胞变小,核皱缩,荧光强度增强．呈囊月或环状．核仁消失,新月体样改变,凋亡小体形成等;琼脂糖电泳出现明显的“梯状”条带,而对照组未出现梯状务带。结论;Res能押制人胃癌SGC7901细胞的生长并诱导其凋亡。     

高效液相梯度洗脱法测定灵杞黄斑颗粒中毛蕊花糖苷和丹酚酸B含量

目的建立同时测定灵杞黄斑颗粒中毛蕊花糖苷和丹酚酸B含量的反相高效液相梯度洗脱法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)进行梯度洗脱,梯度洗脱程序为进样0～8min,调节流动相A∶B(20∶80,V/V);8～20min,流动相A∶B(30∶70,V/V);20～23min,流动相A∶B(20∶80,V/V);流速:1.0mL·min-1,检测波长:334nm,柱温:30℃,进样量:10μL。结果毛蕊花糖苷和丹酚酸B分别在1.50～14.97mg·L-1和18.92～189.23mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9998和0.9999,平均加样回收率毛蕊花糖苷为(99.7±s1.1)%,RSD=1.12%,丹酚酸B为(99.5±1.0)%,RSD=1.02%,3批样品中毛蕊花糖苷平均含量均不低于36.9μg·g-1,RSD均不大于1.54%,丹酚酸B平均含量均不低于344μg·g-1,RSD均不大于1.94%。结论该方法简便、快速、准确、灵敏度高、专属性强,可用于灵杞黄斑颗粒剂的质量控制。     

吡格列酮对2型糖尿病肾病患者血清AGE-肽和MCP-1的影响

目的 探讨吡格列酮对2型糖尿病肾病患者血清糖基化终产物-肽（AGE-肽）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平的影响。方法 2型糖尿病伴微量白蛋白尿患者60例,分别接受格列吡嗪控释片（瑞易宁）和吡格列酮治疗6个月。流动注射分析法检测血清AGE-肽,EUSA法检测血清MCP-1。结果 两组患者治疗后血清AGE-肽均较治疗前下降,吡格列酮组明显低于瑞易宁组;吡格列酮组治疗后血清MCP-1较治疗前明显下降,且明显低于瑞易宁组;吡格列酮组治疗后尿白蛋白／肌酐下降值与血清AGE-肽和MCP-1下降值呈明显正相关。结论 吡格列酮降低糖尿病。肾病患者血清AGE-肽和MCP-1水平,可能通过抗炎抗糖基化机制发挥肾保护效应。     

RP-HPLC法测定生津益气口服液中黄芪甲苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定生津益气口服液中黄芪甲苷的含量。方法采用高效液相色谱法,蒸发光散射检测器,色谱柱为Agilent C18柱,流动相为乙腈-水(32∶68),流速为1.0 mL.min-1,进样量为10μL,柱温为35℃,ELSD检测器漂移管温度为100℃,载气流量为2.7 L.min-1。结果黄芪甲苷在0.11～0.90 mg.mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.999 3。平均加样回收率为97.3%,RSD为1.13%(n=6)。结论该法简便,准确,专属性强,可用于生津益气口服液的质量控制。     

HPLC测定感康片中对乙酰氨基酚、咖啡因和扑尔敏的含量

目的 建立同时测定感康片中对乙酰氨基酚、咖啡因和扑尔敏含量的方法.方法 采用HPLC法.Kromasil-C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-三乙胺(10:90:0.2)为流动相,流速1.0 ml·min-1,检测波长222 nm.结果 对乙酰氨基酚的线性范围为120.0～320.0 μg·ml-1(r=0.9998),咖啡因的线性范围为7.2～19.2 μg·ml-1(r=0.9999),扑尔敏的线性范围为0.96～2.56 μg·ml-1(r=0.9999).平均回收率分别为99.4%、100%、99.1%(n=6).结论 所建方法可同时分离3种成分,分离效果好,灵敏度高,重复性好,准确可靠.     

丹红注射液治疗缺血性脑卒中的疗效观察

目的观察丹红注射液治疗缺血性脑卒中的临床疗效。方法缺血性脑卒中患者198例,随机分为治疗组和对照组,各99例。治疗组用丹红注射液30ml,静脉滴注,1次/d;对照组用香丹注射液20ml,静脉滴注,1次/d。观察并比较两组血液流变学参数、临床疗效和神经功能缺损改善情况。结果治疗组治疗前后血液流变学参数和神经功能缺损均有非常明显改善,（P〈0.01）;治疗组总有效率及治疗后血液流变学变化与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论丹红注射液可明显改善缺血性脑卒中患者的血液流变学参数和神经功能缺损,丹红注射液治疗缺血性脑卒中有效,且疗效优于香丹注射液。     

-10℃低温对雄性大鼠抗生育作用的探讨

目的：探讨低温对睾丸结构和功能的影响。为低温应用于男性抗生育提供科学依据。方法：将大鼠睾丸温度降至-10℃,在降温后不同时段采用光镜、组织化学方法观察睾丸生精细胞、间质细胞、支持细胞的形态学变化,并测定血清性激素水平。结果：-10℃低温作用于大鼠睾丸后,对精子发生和成熟有迅速干扰作用,能快速降低精子活力,35d后有部分恢复。对支持细胞和睾丸间质细胞无明显损伤,性激素水平正常。结论：提示低温作为一种男性抗生育方法是可行的,-10℃低温适合于欲绝育人群．     

甘草酸二铵防治心脏手术患者肾损伤72例

目的：观察甘草酸二铵对心脏手术患者肾缺血 再灌注损伤的防治作用。方法：心脏手术患者140例，分为治疗组72例，对照组68例，两组术前准备和术前用药相同，但治疗组术前1 d加用甘草酸二铵150 mg加入5%葡萄糖注射液250 mL，静脉滴注，术后当天、术后48，72 h再各用药1次。观察两组手术前后尿量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、血乳酸脱氢酶(LDH)等的变化。结果：手术后，治疗组尿量较对照组明显增加，以第1天较为明显，但第4天后两组差异无显著性(P＞0.05)；治疗组BUN、Cr、LDH均较对照组显著下降(P＜0.01)。结论：甘草酸二铵对心脏手术患者的急性肾衰有预防作用。