HPLC法同时测定补骨脂药材中6种成分的含量

目的:建立同时测定补骨脂药材中6种成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法同时分析补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂异黄酮、补骨脂定和补骨脂查耳酮6种成分。用AlltechC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,1%冰醋酸溶液和乙腈为流动相,采用梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长245nm。结果:6种成分线性关系良好,r>0.9991,平均加样回收率均大于95.0%,RSD均小于3.0%。结论:该方法适用于补骨脂药材中6种成分的同时测定,可作为药材质量的综合评价方法。     

金疮小草中新的neo-克罗烷的分离

目的：进一步研究金疮小草（又称白毛夏枯草）中的neo-克罗烷二萜.方法：采用硅胶柱层析对二萜化合物进行分离,利用NMR对结构进行鉴定.结果：从氯仿提取部位分离已知化合物金疮小草素A,C,D（Ajugacumbins A,C,D,1,2,3）,ajugamarin A1（4）和新的neo-克罗烷二萜：金疮小草素H（ajugacumbin H,5）.     

海尔福口服液驱铅效果的实验研究

目的观察中药海尔福口服液降低铅染毒小鼠血铅含量的效果。方法将80只雄性35 d昆明种小鼠分成4组:海尔福口服液组,大蒜提取物组,中毒不治疗组,正常对照组。以醋酸铅水溶液腹腔注射造模,2周后用中药海尔福口服液和大蒜提取液进行驱铅治疗,测定实验前、后小鼠体质量和血红蛋白(Hb)含量,检测实验后小鼠血铅含量。结果海尔福口服液组和大蒜提取物组小鼠的体质量和Hb含量比中毒不治疗组升高,血铅含量比中毒不治疗组明显降低。结论中药海尔福口服液具有驱铅功效。     

葛根总黄酮对去卵巢大鼠骨密度及骨钙影响的实验研究

目的:观察葛根总黄酮防治骨质疏松的作用及机理。方法:选取雌性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只。除假手术组外其他5组建立去卵巢大鼠的骨质疏松模型,低剂量组予葛根总黄酮水溶液,50mg·kg-1;中剂量组予葛根总黄酮水溶液,100mg·kg-1;高剂量组予葛根总黄酮水溶液,200mg·kg-1;雌激素组予力维爱1.25mg·kg-1;假手术组及模型对照组予蒸馏水灌胃。3月后测定各组大鼠骨重量、骨密度及骨钙含量。结果:葛根总黄酮低、中、高剂量组及假手术组、雌激素组大鼠的右股骨重、左股骨骨密度及右股骨骨钙含量与模型对照组比较,差异均有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01)。结论:葛根总黄酮可有效地防治雌性大鼠的骨质疏松,其机理可能与其具有雌激素效应有关。     

卵巢恶性生殖细胞肿瘤手术方式的探讨

目的　本文分析164例卵巢恶性生殖细胞肿瘤的手术疗效,探讨治疗该瘤更合理的手术方式。方法　回顾性分析164例卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者的临床资料,其中5 7例采用保留生育功能的术式;10 7例采用不保留生育功能的传统术式。2组均根据个体状况辅以适当的化疗(和/或放疗)。结果　保留生育功能组和不保留生育功能组的5年生存率分别为69.0 1% (3 9/5 7)、5 4.94% (5 9/10 7) (P >0 .0 5 )。2组术后并发症发生率分别为3 .5 1% (2 /5 7)、3 .74% (4 /10 7) (P >0 .0 5 )。多因素分析显示临床分期、病理类型、残留肿瘤体积是影响预后的主要因素(P均<0 .0 5 )。结论　卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者可根据需要采用保留生育功能的术式,并辅以适当的化疗和(或)放疗。     

博莱霉素与IL-2治疗癌性胸水的临床研究

目的观察既能控制胸水而又可以减少治疗次数的药物的疗效.方法常用胸穿套管针建立闭式引流,在胸水基本流净、肺复张基础上予以博莱霉素(BLM)30～50 mg;IL-2 40万U做胸腔内一次性灌注.结果总有效率86.7%.毒副作用:发热、寒战者占28.3%(38℃以下者),轻度胸痛占33.3%,皮肤色素沉着者占40.0%,脱发占30.0%,食欲不振占28.9%.结论 BLM治疗癌性胸水疗效好,毒副作用轻,易为患者接受.     

抗前列腺癌细胞特异抗体库的构建及特异结合抗体的筛选

目的: 获得前列腺癌的噬菌体呈现型单链抗体库,筛选与前列腺癌特异结合的抗体,为前列腺癌的诊断和治疗奠定基础. 方法: 用两种恶性程度较高的前列腺癌细胞PC3,DU145膜蛋白混合物免疫Balb/c小鼠.取脾脏提取总RNA,用RT-PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因(VH和VL), 经Linker连接形成ScFv基因片段,将ScFv基因片段与噬菌粒载体pCANTAB 5E的连接产物转化大肠杆菌TG1.用辅助噬菌体M13KO7进行超感染,获得重组噬菌体抗体.以恶性程度低的前列腺癌细胞LNCap为对照,用PC3细胞对重组噬菌体抗体库进行五轮筛选后,随机挑取克隆,经phage-ELISA筛选特异性结合PC3细胞的ScFv.结果: 用所构建的库容量为3.5×106的单链抗体库筛选特异结合抗体,得到一个与PC3细胞特异结合的噬菌体-单链抗体.结论: 本研究所构建的抗体库中可筛选到与前列腺癌细胞结合特异性较好的抗体,可用于前列腺癌的诊断和治疗中.     

银杏叶提取物EGb761通过caspase-3抑制TNF-α诱导HeLa细胞凋亡

目的探讨caspase-3的活化在银杏叶提取物EGb761对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导HeLa细胞凋亡中的影响.方法采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测caspase-3 p20活性片段,Caspase-3 Colorimetric Assay试剂盒测定caspase-3活性.结果流式细胞术分析结果显示,EGb761在10～40 mg/L终浓度范围内对重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)诱导的HeLa细胞凋亡均有显著的抑制作用(P＜0.01),呈剂量依赖关系;Western blot检测显示,rhTNF-α诱导的HeLa细胞caspase-3 p20活性片段水平增高,能被不同剂量EGb761(10～40 mg/L)明显抑制,且随EGb761浓度增加抑制效果增强;caspase-3活性测定结果显示,EGb761对rhTNF-α诱导的caspase-3活化有显著的抑制作用,且随剂量增加抑制作用增强.结论结果提示,EGb761抑制TNF-α诱导的HeLa细胞凋亡可能与其抑制caspase-3活化有关.     

奥沙利铂为主联合化疗治疗预后不良的晚期非小细胞肺癌临床研究

41例经病理或细胞学确诊的晚期非小细胞肺癌,接受奥沙利铂(L-OHP)为主的联合化疗。L-OHP分别联合吉西他滨(GEM)、去甲长春碱(NVB)、紫杉醇各15、21、5例。三组均予L-OHP100~130mg/m2,静脉滴入,d1;GEM组予GEM1000~1250mg/m2,静脉滴入,d1,d8;NVB组予NVB25mg/m2,静脉滴入,d1,d8;紫杉醇组予紫杉醇150~175mg/m2,静脉滴入,d1。21d为1个周期,每例患者至少治疗2个周期。共132个周期,平均3·2个周期。结果显示,总有效率14·6%(6/41),肿瘤控制率31·7%(13/41)。1年生存率26·8%(11/41),中位生存期7·2个月。主要的血液学不良反应为血小板减少,但Ⅲ~Ⅳ度减少仅占17·1%(7/41);4例(9·8%)患者发生Ⅲ~Ⅳ度白细胞减少;5例(12·2%)患者输注了红细胞。非血液学不良反应大部分局限于Ⅰ~Ⅱ度,10例(24·4%)患者出现Ⅰ~Ⅱ度神经毒性,均可逆。初步研究结果提示,L-OHP为主的联合化疗方案治疗预后不良的晚期NSCLC有一定疗效;但其疗效能否与顺铂相比,仍有待临床的进一步研究。其不良反应较轻,耐受性较好。     

canstatin基因转染对肺癌A549细胞和血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

背景与目的　肿瘤的生长和转移需要大量新血管的生成,人血管能抑素(canstatin)是新近发现的高效内源性血管生成抑制剂,其抑制血管内皮细胞的作用已引起人们广泛关注。本研究的目的是探讨can statin基因在人肺癌A549细胞和人脐静脉内皮细胞HUV ECC中的表达及意义。方法　将canstatin基因通过电穿孔的方法转染人肺癌细胞A549和人脐静脉内皮细胞HUV ECC,行G418筛选获得转基因细胞克隆。用SDS PAGE电泳检测canstatin蛋白在转基因细胞培养上清液中的表达,以流式细胞仪分析细胞周期,并比较转基因和未转基因细胞的生长特性。结果　canstatin在转染组A549 细胞和ECC细胞表达并分泌至上清液中。canstatin基因转染组ECC的凋亡率(16.04%)显著高于空载体组(0.43%)和亲代细胞组(2.92%)(P<0.01),转染细胞生长明显受抑(P<0.01)。而转染组A549细胞的凋亡率(0.19%)与空载体组(0.13%)及亲代细胞组(0.07%)比较无显著性差异(P>0.05),细胞生长也未受明显影响。结论　canstatin能特异地抑制内皮细胞增殖,并诱导内皮细胞凋亡。