低剂量佐匹克隆延迟控释片治疗早醒性失眠的疗效研究

背景　失眠可分为入睡困难、睡眠维持障碍和早醒等,目前药物治疗失眠存在局限性,尚缺乏对不同类型失眠的针对性治疗,对失眠分型治疗的研究鲜见报道。目的　探讨低剂量佐匹克隆延迟控释片治疗早醒性失眠的疗效。方法　本研究时间为2016年10月—2018年1月。将40只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照1组、低剂量（2.5 mg/kg佐匹克隆）组、高剂量（5.0 mg/kg佐匹克隆）30 min组、高剂量60 min组,每组10只大鼠。采用戊巴比妥钠延长实验,观察并记录各组大鼠的睡眠潜伏期及睡眠时间,为佐匹克隆延迟控释片的制备奠定基础。将佐匹克隆与羧甲基淀粉钠、乳糖、5%聚维酮K30（PVPK30）、硬脂酸镁混匀后压片;将山嵛酸甘油酯、乳糖、5%PVPK30、硬脂酸镁混匀后得到包衣颗粒,将片芯置于包衣颗粒中央,压片制得佐匹克隆延迟控释片。将60只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照2组、佐匹克隆延迟控释片组（2.5 mg/kg佐匹克隆）、佐匹克隆溶液组（5.0 mg/kg佐匹克隆）,每组20只大鼠,观察并记录各组大鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间。结果　对照1组〔（126.3±18.6）min〕、低剂量组〔（175.3±18.1） min〕、 高剂量30 min组〔（151.8±19.2）min〕和高剂量60 min组〔（181.5±15.6） min〕睡眠时间比较,差异有统计学意义（F=19.651,P<0.01）;其中,低剂量组与高剂量30 min组、60 min组大鼠睡眠时间长于对照1组,高剂量30 min组大鼠睡眠时间短于低剂量组,高剂量60 min组大鼠睡眠时间长于高剂量30 min组（P<0.05）。佐匹克隆延迟控释片组〔（188.3±25.0） min〕、佐匹克隆溶液组〔（194.0±28.1） min〕与对照2组〔（130.2±25.6） min〕睡眠时间比较,差异有统计学意义（F=30.400,P<0.05）,佐匹克隆延迟控释片组、佐匹克隆溶液组睡眠时间长于对照2组（P<0.05）。结论　通过制备低剂量（2.5 mg/kg）佐匹克隆延迟控释片喂食实验大鼠,使之在大鼠入睡后释药,能达到高剂量（5.0 mg/kg）佐匹克隆睡前60 min灌胃延长大鼠睡眠时间的效果,显现了以低剂量佐匹克隆延迟控释片针对性治疗成人早醒性失眠的前景。     

基于Keap1/Nfr2/ARE信号通路研究机械相关性肺损伤分子机制

  目的  探索基于Keap1/Nfr2/ARE信号通路探索呼吸机相关肺损伤（ventilation induced lung injury,VILI）形成的分子机制。  方法  给予SD大鼠过度机械通气建造VILI模型;HE染色检测对照组、正常潮气量（VT）组（VT为8 mL/kg）、大VT组（VT为40 mL/kg）肺组织病理变化;检测各组肺组织湿重/干重（W/D）比值变化;BCA法检测各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白的变化;ELISA法检测各组BALF和血清中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素-8（IL-18）以及肺组织中8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的水平变化;TBA法检测肺组织中丙二醛（MDA）水平变化;Western bloting实验检测巨噬细胞中Nod样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1蛋白以及肺组织中Keap1、Nrf2蛋白的变化;逆转录PCR检测各组肺组织中SOD mRNA、HO-1 mRNA表达变化。  结果  过度机械通气可损伤肺组织,导致肺泡破裂、炎症细胞浸润和红细胞增多;与对照组和正常VT组相比,大VT组肺组织W/D值、8-OHdG和MDA水平、BALF中总蛋白、IL-1β、IL-18以及血清中IL-1β、IL-18水平均显著上升（P均<0.05）,肺泡巨噬细胞中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白以及肺组织中Keap1蛋白表达上升（P均<0.05）,肺组织中Nrf2蛋白、SOD mRNA、HO-1 mRNA表达下降。  结论  大VT通气可以使肺组织发生急性炎症性损伤并导致VILI的发生,其机制为过度通气引起Keap1/Nrf2-ARE通路抑制和活性氧（ROS）清除能力的下降,进而引起肺巨噬细胞产生NLRP3炎症小体,参与VILI的形成。     

单孔腹腔镜在盆底功能障碍中的应用

盆底功能障碍是中老年女性的常见病,严重影响其生活质量。中重度盆底功能障碍的治疗以手术为主,本文对单孔腹腔镜技术在盆底功能障碍中的应用现状进行了综述和总结,并对其应用前景进行了展望。     

辣椒碱通过上调NLRP3炎性小体诱导胃癌MGC-803细胞转移

[目的]探讨辣椒碱对胃癌MGC-803细胞转移的诱导作用及其对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体活化的影响。[方法]采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测MGC-803细胞培养液中炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,蛋白免疫印迹（Western Blot）方法分析细胞中NLRP3炎性小体、细胞钙依粘连蛋白（E-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）表达水平,采用Transwell法检测MGC-803细胞的迁移能力,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）含量。[结果]辣椒碱处理MGC-803后,培养液中炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α释放量明显升高、NLRP3表达量增加,同时间质样标志物Vimentin的表达升高、上皮样标志物E-cadherin表达降低,但用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞之后,炎性因子表达量下调、NLRP3及Vimentin蛋白表达减低、E-cadherin表达升高,并且MCC950处理后能抑制辣椒碱增加的细胞迁移数量;ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）能逆转辣椒碱诱导结肠癌细胞NLRP3的蛋白水平及炎性因子释放。[结论]辣椒碱通过促进MGC-803细胞内ROS的表达水平来激活NLRP3炎性小体,进而促进胃癌细胞的迁移。     

携带荧光素酶登革亚病毒颗粒的构建和鉴定

目的 拟将荧光素酶基因整合入登革病毒（DENV）亚病毒颗粒（RSPs）中,构建能用于抗体介导的感染增强（ADE）高通量筛选的研究工具。方法 将荧光素酶基因luciferase插入DENV包膜蛋白基因prME的3'端,取代prME第二个跨膜区,构建prME-luc融合基因。用prME-luc融合基因转染293T细胞,在上清中检测携带荧光素酶的登革亚病毒颗粒（RSP-luc）。结果 转染prME-luc的293T细胞可以将RSP-luc释放至培养上清中,共转染野生型prME能够提高RSP-luc的产量。Western-blot技术确认了RSP-luc中含有DENV包膜蛋白和荧光素酶形成的融合蛋白。RSP-luc易于制备并可通过超速离心分离纯化,且可通过测定荧光素酶活性快速定量。体外实验显示RSP-luc能够与Vero细胞、U937细胞以及小鼠腹腔巨噬细胞等DENV靶细胞结合,结合过程可被受体类似物硫酸肝素竞争性抑制,也可被DENV特异性抗体4E11增强。结论 RSP-luc 能够模拟DENV 感染过程,有望成为深入研究DENV 与宿主相互作用及ADE 发生机制的有效工具。     

重型颅脑损伤早期行气管切开术的临床研究

目的 探讨重型颅脑损伤早期气管切开的作用。方法 对我科自1993年1月～2004年1月收治的93例重型颅脑损伤,早期气管切开进行回顾性分析。结果 93例病人基本生活自理36例,占38．71％。生活需人照顾者15例,占16．13％。植物生存12例占12．90％。死亡30例占32．26％。结论 呼吸道不通畅、肺部感染是加重病情导致重度颅脑损伤病人死亡的重要原因之一。对估计近期不能清醒、有原发性肺部疾患、合并胸部外伤者．应早期行气管切开术。保持呼吸道通畅可明显降低重型颅脑损伤患者的死亡率,提高治愈和生存率。     

前臂肌腱部分移位修复桡尺远侧关节脱位的应用解剖

目的为前臂肌腱部分移位修复桡尺远侧关节脱位提供解剖学依据。方法30侧成人上肢标本,将尺侧腕屈肌腱、尺侧腕伸肌腱、桡侧腕长伸肌腱、肱桡肌腱作形态学测量,将尺侧腕屈肌腱、尺侧腕伸肌腱进行力学测试。结果尺侧腕屈肌腱长(16.7±2.7)cm;尺侧腕伸肌腱长(14.9±2.5)mm;桡侧腕长伸肌腱长(19.0±2.0)cm;肱桡肌腱长(11.7±2.4)cm。力学测试:尺侧腕屈、伸肌腱其全肌腱破坏载荷分别为(2.4±0.9)Mpa、(3.1±0.9)Mpa,半肌腱破坏载荷分别为(2.2±0.9)Mpa、(2.5±0.8)Mpa,t检验无显著性差异。结论前臂肌腱部分转位有足够的长度和强度修复桡尺远侧关节脱位。     

伸直位石膏外固定治疗儿童伸直型肱骨髁上骨折

我院自1998年以来，应用伸直位石膏外固定治疗伸直型肱骨髁上骨折45例，疗效满意。     

青少年Pilon骨折的治疗

目的探讨青少年Pilon骨折的特点、治疗方法及其并发症。方法对1990年4月～2003年12月期间治疗的13例青少年胫骨Pilon骨折病例进行随访分析。按Merv—Letts分型：Ⅰ型5例，Ⅱ型6例，Ⅲ型2例。骨牵引治疗2例，有限内同定8例，有限内固定结合外固定支架3例。结果所有患者平均随访24个月，按Helfet踝关节功能评价：优8例，良4例，差1例，优良率92．3％。并发症：皮肤坏死2例，创伤性关节炎4例，骨骺早闭3例，畸形愈合1例，骨延迟愈合1例，外固定支架钉道感染1例，总体并发症38．5％。结论青少年Pilon骨折应根据其分型采用不同的治疗方案：疗效与创伤程度有关：Ⅲ犁骨折有较高的并发痹。