腺相关病毒-1介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠角膜基质细胞体内外转染的研究

目的:探讨血清1型腺相关病毒(rAAV1)介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因体内、外转染大鼠角膜基质细胞后绿色荧光蛋白(GFP)的表达及转染率。方法:采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清1型腺相关病毒(rAAV1-EGFP)感染原代培养的SD大鼠角膜基质细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察和检测EGFP的表达及阳性率。建立大鼠异体角膜移植模型,用含rAAV1-EGFP转染液的培养基在37℃孵育SD大鼠角膜植片同时浸泡缝线18h,再用此缝线间断缝合,将植片移植到大鼠角膜植床,术后通过荧光体视镜观察Wistar大鼠角膜出现EGFP荧光的起始时间及分布情况。结果:按rAAV1-EGFP不同转染倍数(MOI)转染角膜基质细胞。转染后3d,在倒置荧光显微镜下观察到角膜基质细胞的细胞质有GFP阳性表达。体视荧光显微镜观察到大鼠角膜中开始有GFP阳性表达;随MOI值的增高而增强,转染后7~9d达到高峰,此时检测rAAV1-EGFP对角膜基质细胞的转染效率,MOI=103时是16.3%,MOI=104时是30.3%,MOI=105时是43.6%,MOI=106时是47.5%。rAAV1-EGFP在大鼠角膜中的表达也明显增强。结论:rAAV1-EGFP可以在体内外稳定、有效转染大鼠角膜基质细胞,是角膜基质细胞理想的报告基因。     

Effect of diltiazem isomers and thiamine on piglet liver microsomal peroxidation using dichlorofluorescein.

PURPOSE: We investigated a potential hepatoprotective role of d-cis diltiazem, l-cis diltiazem, thiamine and the combination d-cis diltiazem and thiamine against lipid peroxidation in a piglet liver microsomal model. A modified in vitro dichlorofluorescein assay was developed to assess the extent of peroxidative damage induced by reactive oxygen species in the piglet liver microsomal fraction. METHODS: Microsomal membrane fraction, obtained from 3 week old female piglets, was treated with either the biologically vasoactive d-cis diltiazem or the non-vasoactive stereoisomer l-cis diltiazem (5-1000 microM) for 1 hour at 37 degrees C followed by one hour incubation with the free radical generator AAPH (2,2'-azobis-(2-amidinopropane) dihydrochloride; 1 mM) to initiate lipid peroxidation. In a separate study, piglet liver microsomes were pre-treated with d-cis diltiazem (50 or 500 microM) and thiamine (10-100 microM) to assess the antioxidant activity of the combination. RESULTS: A dose dependant inhibition of membrane lipid peroxidation was observed with d-cis diltiazem (p<0.05) but not with l-cis diltiazem, suggesting that diltiazem is stereospecific in protecting against microsomal lipid peroxidation. Combining diltiazem with thiamine further protected microsomes against lipid peroxidation compared to use of individual drugs. CONCLUSION: We conclude that diltiazem and the combination of diltiazem and thiamine offers a hepatoprotective effect against free radicals.     

Aqueous and hydroalcoholic extracts of Black Maca (Lepidium meyenii) improve scopolamine-induced memory impairment in mice.

Lepidium meyenii Walp. (Brassicaceae), known as Maca, is a Peruvian hypocotyl growing exclusively between 4,000 and 4,500 m altitude in the central Peruvian Andes, particularly in Junin plateau. Previously, Black variety of Maca showed to be more beneficial than other varieties of Maca on learning and memory in ovariectomized mice on the water finding test. The present study aimed to test two different doses of aqueous (0.50 and 2.00 g/kg) and hydroalcoholic (0.25 and 1.00 g/kg) extracts of Black Maca administered for 35 days on memory impairment induced by scopolamine (1mg/kg body weight i.p.) in male mice. Memory and learning were evaluated using the water Morris maze and the step-down avoidance test. Brain acetylcholinesterase (AChE) and monoamine oxidase (MAO) activities in brain were also determined. Both extracts of Black Maca significantly ameliorated the scopolamine-induced memory impairment as measured in both the water Morris maze and the step-down avoidance tests. Black Maca extracts inhibited AChE activity, whereas MAO activity was not affected. These results indicate that Black Maca improves scopolamine-induced memory deficits.     

两株乳酸菌的分离及发酵性能研究

目的从酸奶中分离乳酸菌并对其发酵性能进行研究。方法选用较为简单的培养基,通过调节pH值进行乳酸菌的分离,以液体发酵研究其发酵性能。结果分离出2株乳酸菌,经鉴定为嗜热链球菌（St）与保加利亚乳杆菌（Lb）,其活性均较高。结论通过调节pH值从酸奶中可分离出2株乳酸菌;St与Lb按1∶1混合发酵时pH值下降较快（pH值最终达3.5左右）,可得到感官指标较好的酸奶。     

翻白草中儿茶素的提取工艺研究

目的 研究翻白草中儿茶素的最佳提取工艺.方法 以儿茶素的提取含量为评价指标,采用超声波提取法,通过正交试验研究不同浓度乙醇、提取次数、提取时间、料液比4个因素对儿茶素提取的影响,并筛选出最佳提取条件;用高效液相色谱法测定含量,以甲醇-水-乙酸（25∶74.5∶0.5）作为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm.结果 最佳提取条件为浓度30%的乙醇,料液比1∶15,提取3次,每次提取20 min;儿茶素的含量茎叶中为0.216 6 mg/g,根中为0.156 0 mg/g,平均回收率为98.52%,RSD为2.98%.结论 该方法简便、迅速,测定结果可为翻白草在临床用药中的安全性和有效性提供科学依据.     

反相高效液相色谱法测定交沙霉素片的含量

目的：建立反相高效液相色谱（RP—HPLC）法测定交沙霉素片含量的方法。方法：色谱柱为汉邦C18柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-0.1mol／L醋酸铵溶液（60：40），检测波长为232nm。结果：交沙霉素浓度线性范围为0．1～1．0mg／mL（r=0．9998），平均回收率为96．3％（n=6），RSD=1.69％。结论：RP—HPLC法测定交沙霉素片含量准确、灵敏、简便。     

保健品对胃黏膜损伤的辅助保护作用方法学研究

目的：通过与新药研究的比较，确定并完善评价供试保健品对胃黏膜损伤的辅助保护功能的试验方法。方法：以活谓素胶囊为例，通过乙醇诱发大鼠急性胃黏膜损伤；乙酸诱发大鼠慢性胃黏膜损伤；消炎痛诱发大鼠胃黏膜损伤3种试验模型，进行试验方法学研究。结果：采用改进的模型和评价方法进行研究，活谓素胶囊连续给药对胃黏膜损伤有明确的保护作用。结论：经改进后的动物模型和评价方法，可以更客观准确地评价保健品对胃黏膜损伤的辅助保护作用。     

医疗数据集成平台总体架构设计

随着现代医院数字化建设的进一步发展，各种信息系统将越来越多的被投入使用。不同信息系统的构架设计、实现手段和开发环境都有差异，一般而言这些系统之间无法直接进行数据交互。医院需要建立一个提供各个子系统之间高效数据交互的集成平台，结合业务流程实现业务的跨系统整合。文章从医院数据集成平台的设想和构建实际出发，提出了数据集成平台设计理念、构架模块方面的理论设想，并将在实际建设中加以进一步验证和落实。     

普通蜂胶及纳米蜂胶对临床常见细菌的体外抑制效应研究

目的：了解普通蜂胶及纳米蜂胶对临床常见细菌的体外抑制效应。方法：K-B法测定不同浓度的普通蜂胶或纳米蜂胶对肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、肠球菌的抑菌作用。琼脂二倍稀释法测定普通蜂胶和纳米蜂胶对苯唑西林敏感金葡菌（MSSA）和耐药金葡菌（MRSA）的MIC。结果：普通蜂胶及纳米蜂胶对上述细菌的生长有一定的抑制作用，以对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强，且随着浓度的升高抑制作用增加。除肠球菌和铜绿假单胞菌外，纳米蜂胶体外对上述细菌的抑制作用强于普通蜂胶。普通蜂胶对MSSA和MRSA的MIC50和MIC90均为128μg&#183;ml^-1和256μg&#183;ml^-1；纳米蜂胶对MSSA和MRSA的MIC50和MIC90均为32μg&#183;ml^-1和64μg&#183;ml^-1。结论：蜂胶对多种细菌的生长有抑制作用，纳米蜂胶的抑菌作用强于普通蜂胶。但二者对金葡菌的抑菌作用均明显低于苯唑西林和万古霉素。     

TM208在大鼠肝微粒体中代谢产物与细胞色素P450亚型代谢酶鉴别研究

在大鼠肝微粒体的体外代谢中研究作用于TM208的细胞色素P450亚型代谢酶。以不含细胞色素P450化学抑制剂的样品为对照，研究不同细胞色素P450亚型选择性化学抑制剂对TM208代谢转化率的影响。CYP2D和CYP2B的选择性抑制剂对TM208的代谢表现出浓度依赖性较强抑制作用，CYP1A的选择性抑制剂对TM208的代谢表现出一定抑制作用。CYP3A的选择性抑制剂对TM208的代谢没有表现出明显的抑制作用。TM208在人鼠肝微粒体体外代谢中主要通过CYP2D和CYP2B两种细胞色素P450亚型代谢酶参与代谢。