改良EMSA法分析人α1(Ⅰ)胶原基因序列特异性DNA结合蛋白

目的：分析人α１（Ⅰ）胶原基因５‘侧翼区具有较高启动调控活性序列的ＤＮＡ结合蛋白。方法：以原代培养人瘢痕皮肤成纤维细胞为胶原产生细胞,采用限制性内切酶消化,ＤＮＡ混合片段末端标记和增强化学发光的改良电泳迁移率改变实验（ＥＭＳＡ）分析人α１（Ⅰ）胶原基因－２６８￣＋４２ｂｐ序列的ＤＮＡ结合蛋白,其结合活性具有特异性,并能被ｓｐ－１,ＮＦ－１,ＮＦ－ｋＢ识别序列中存在α１（Ⅰ）胶原基因－２６８￣＋４２     

人单核细胞趋化蛋白受体5的基因克隆及该基因超家族成员氨基酸结构

目的：获取有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白受体５（ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ５,ｈｕＣＣＲ５）。方法：从人ＰＢＭＣ中提取总ＲＮＡ和ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ,而后经反转录合成ｃＤＮＡ第一链,再以ＰＣＲ扩增出ｈｕＣＣＲ５ ｃＤＮＡ并插入融合表达载体ｐｃＤＮＡ３．０的ＢａｍＨⅠ和ＨｉｎｄⅢ位点,转化大肠杆菌ＴＧ－１,挑取克隆,酶切鉴定,序列分析。结果：克隆出长度为１０５６ｂｐ,编码３５２个氨基酸的ｈｕＣＣＲ５ ｃＤＮＡ。并分析证明与该基因超家族氨基酸有８０％同源性,与国外发表资料比较有３个碱基突变。结论：克隆出人单核细胞趋化蛋白５受体,为今后基础研究提供了较有用的材料。     

免疫磁珠法分选胚胎大鼠脑神经干细胞的初步研究

目的：探索应用免疫磁珠间接阳性法分选神经上皮干细胞蛋白（ｎｅｓｔｉｎ）阳性的神经干细胞群的实验条件,为研究神经干细胞的特性与神经干细胞的培养和移植研究创造有利条件。方法：制取胎鼠大脑组织细胞悬液,免疫磁珠法分选胎鼠脑神经干细胞,以流式细胞术检测阳性细胞纯度,以锥虫蓝染色法检测细胞活性。结果：该法分选的ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞纯度为９３．０％～９９．７％,其中活性细胞为９２％～９７％。结论：免疫磁珠法分离胎鼠脑神经干细胞群落简便、有效,可以为神经干细胞细胞培养和移植提供细胞来源,也为研究高纯度神经干细胞的特性提供了实验基础。     

间接免疫荧光法及蛋白质印迹法对肺癌患者体内自身抗体的分析

目的：了解肺癌患者血清自身抗体阳性率、细胞内定位及荧光图形特点,探索自身抗体作为肿瘤樗物的可能性。方法：应用间接免疫荧光法（ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｓｅｅｎｅｅ,ＩＩＦ）检测７７份肺癌以及１４０份不同年龄段正常人血清中自身抗体。提取人喉癌上皮细胞（Ｈｅｐ－２）蛋白抗原,采用蛋白质印迹法对８１份肺癌患者及５２份正常人血清进行分析。结果：肺癌组和对照组的自身抗体阳性率有显著差别,两     

神经营养因子与中枢神经系统疾病

神经营养因子是一类调节神经元存活和分化的蛋白质,它们对神经系统的特异性作用引起了人们对其治疗神经退行性疾病的极大兴趣。本综述主要介绍了目前神经营养因子的治疗神经退行性疾病体外和动物实验结果,以及作为临床药物的潜在的治疗价值。神经营养因子对神经元的特异性作用可替代传统药物治疗某些以神经元变性为主的慢性疾病,如Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病、帕金森病和周围神经病变。药物如何通过血脑屏障是当前在临的主要问题,新的     

太白檧木中齐墩果酸的含量测定

目的：研究太白Ｓｏｎｇ木根皮中齐墩果酸的含量测定方法。方法：采用紫外分光光度法、薄层扫描法及高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定,并就测定数据进行比较。结果：紫外分光光度法操作简便,稳定性好,但不精确;薄层扫描法影响因素多,数据稳定性差;ＨＰＬＣ法针对单一成分测定,数据稳定,可信度高。结论：不同方法所得结果差异很大,ＲＰ－ＨＰＬＣ法为太白Ｓｏｎｇ木中齐墩果酸含量测定的最佳方法。     

TNF-α拮抗胰岛素样生长因子-1对人α1(Ⅰ)胶原启动子的激活

目的:探讨TNF-α对胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)激活人α1(Ⅰ)胶原启动子的作用.方法:构建含不同长短α1(Ⅰ)胶原启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH1 0.27,pCOLH1 2.5;用脂质体法瞬时转染至NIH3T3细胞和人皮肤成纤维细胞中,加入IGF-1或(和)TNF-α,测定CAT活性.结果:100 ng/ml IGF-1可使转染至NIH3T3细胞的pCOLH1 0.27和pCOLH1 2.5表达的CAT活性分别增高至对照的(5.4±0.25)倍与(5.8±0.3)倍, 使转染至人皮肤成纤维细胞的这两个重组体表达的活性分别增高至对照的(4.5±0.22)倍与(4.9±0.2)倍.而TNF-α能抑制IGF-1诱导的pCOLH1 2.5活性.结论:TNF-α在转录启动水平抑制IGF-1对人α1(Ⅰ)胶原基因表达的促进作用.     

柱切换HPLC法测定腹水中左旋氧氟沙星的含量

目的：应用柱切换ＨＰＬＣ技术直接测定腹水中左旋氧氟沙得含量。方法：采用磷酸二氢钾缓冲溶液（ＰＨ２．２）－０．０５ｍｏｌ／Ｌ四丁溴化化铵（１００：４）为预处理流动相,经μＢｏｎｄａｐａｋ Ｃ１８柱预处理后,切换到Ｉｒｒｅｇｕｌａｒ＿ＨＣ１８分析柱,以甲醇－磷权二氢钾缓冲溶液（ＰＨ２．２）－０．０５ｍｏｌ／Ｌ四丁基溴化铵（３０：７０：４）为分析流动相进行分离测定,紫外线皮长为２９４ｎｍ。结果：左旋氧氟     

Changes in serum ammonia concentration in cirrhotic patients with Helicobacter pylori infection

Objective To study whether liver cirrhosis associated with Helicobacter pylori (H. pylori) infection will induce increased serum ammonia and whether the peripher al serum ammonia reflects the level of portal vein serum ammonia. Methods Blood was taken from the portal vein and the cubital vein in cirrhotic patients with and without H. pylori infection and non-cirrhotic patients (splenic rupture) with and without H. pylori infection, and the serum ammonia was measured.Results The mean levels of serum ammonia in the group of cirrhotic patients with H. pylori infection were 167.82±8.97 μmol/L (portal vein) and 142.2±13.35 μmol/L (cubital vein). They were increased significantly as compared with cirrhotic patients without H. pylori infection (47.68±12.03 μmol/L portal vein and 37.23±7.04 μmol/L cubital vein), and also compared with the groups of splenic rupture patients with and without H. pylori infection ( P <0.01). There was no significant difference between the serum ammonia level of the cubital vein and portal vein (P>0.05).Conclusions H. pylori infection can induce an increase in serum ammonia in patients with liver dysfunction, and the peripheral serum ammonia measurement may replace the portal vein serum ammonia as a monitoring method. Eradication of H. pylori in cirrhotic patients may prevent hepatic encephalopathy (HE).     

结肠癌和癌前病变演化过程中细胞凋亡与增殖的关系

[目的 ]阐明结肠癌和癌前病变中细胞凋亡与增殖的关系 .[方法 ]应用免疫组织化学亲和素 过氧化物酶法检测 148例结肠病变标本中增殖细胞核抗原蛋白的表达 ;并用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记技术检测 75例标本中的凋亡细胞 .[结果 ]增殖细胞核抗原蛋白在结肠癌和结肠腺瘤中的表达率较正常组织高 ,以结肠腺瘤为分界点 ,前半阶段凋亡指数逐渐上升 ,后半阶段则下降 ,而细胞增殖指数在整个演进过程中呈上升趋势 .[结论 ]增殖细胞核抗原在结肠癌和癌前病变中的表达率增高 ,与分化、浸润深度和有无淋巴结转移无关 ,但增殖细胞核抗原过表达与结肠癌分化有关 ,伴有丝分裂指数的升高 .