Influence of TAT-peptide polymerization on properties and transfection activity of TAT/DNA polyplexes.

Use of bioactive cationic peptides as gene carriers is limited by instability of their DNA complexes in vivo and by the loss of their biological activity due to undesired interactions of their bioactive parts with the DNA. To overcome the two major limitations, biodegradable high-molecular-weight form of TAT peptide (POLYTAT) sensitive to cellular redox-potential gradients was synthesized in this study by oxidative polycondensation. Physicochemical and transfection properties of DNA polyplexes based on POLYTAT were investigated and compared with polyplexes based on TAT polymer prepared by in situ template-assisted polymerization. Physicochemical properties of TAT-based polyplexes were affected by the molecular weight and method of polymerization of the TAT peptide. All TAT-based DNA polyplexes exhibited reduced cytotoxicity when compared with control polyethylenimine (PEI) polyplexes. Polyplexes based on both high-molecular-weight TAT polypeptides exhibited increased transfection efficiency compared to control TAT peptide but lower than that of PEI polyplexes. The evidence shows that transfection activity of TAT-based polyplexes is strongly dependent on the presence of chloroquine and therefore suggests that TAT polyplexes are internalized by an endocytosis. Overall, high-molecular-weight reducible polycations based on bioactive peptides has the potential as versatile carriers of nucleic acids that display low cytotoxicity and can prove to be especially beneficial in cases that require surface presentation of membrane-active or cell-specific targeting peptides.     

三种实验性IgA肾病模型的比较

目的探讨建立一种理想的IgA肾病（IgAN）动物模型方法。方法分别采用葡聚糖G200、大肠杆菌外膜蛋白和金葡菌的细胞膜20肽抗原决定簇诱导小鼠IgA肾病模型。用分子生物学和病理学方法对3组IgAN模型小鼠进行鉴定和比较。结果（1）葡聚糖组尿蛋白增高，伴有血尿；免疫荧光显示部分肾小球大量IgA沉积；光镜下肾小球系膜细胞增多，肝和脾可见弥漫性的粉染物质沉积；电镜下肾小球系膜区少量低电子密度的致密沉积物，肝和脾可见淀粉丝样物质沉积。（2）大肠杆菌外膜蛋白组尿蛋白增高，伴有血尿；免疫荧光显示肾小球有少量IgA沉积；光镜下肾小球系膜细胞轻度增多，间质炎细胞浸润明显；电镜下肾小球系膜区无电子致密沉积物。（3）金葡菌细胞膜20肽抗原决定簇组尿蛋白增高，伴有血尿；免疫荧光显示多数肾小球均可见大量IgA沉积；光镜下肾小球系膜细胞增多，伴系膜基质轻度增生；电镜下肾小球系膜区和基底膜的内皮细胞下可见高电子密度的致密沉积物。结论金葡菌细胞膜20肽抗原决定簇组诱导的IgAN模型从临床表现和病理学变化与人IgAN极其相似，是3种IgAN模型中最理想的IgAN模型。     

Fabrication of porous hollow silica nanoparticles and their applications in drug release control.

Preparation and characterization of porous hollow silica nanoparticles (PHSN) for controlled release applications were investigated. Through orthogonally designed experiments, the optimal synthesis conditions for the preparation of PHSN were obtained and the produced PHSN were characterized by BET, SEM, TEM and IR. Scanning and transmission electron microscopy images revealed their hollow shell-core structure and also demonstrated that the size and shape of PHSN are determined by the templating CaCO3 nanoparticles. The produced PHSN were applied as a carrier to study the controlled release behaviors of Brilliant Blue F (BB), which was used as a model drug. Being loaded into the inner core and on the surfaces of the nanoparticles, BB was released slowly into a bulk solution for about 1140 min as compared to only 10 min for the normal SiO2 nanoparticles, thus exhibited a typical sustained release pattern without any burst effect. In addition, higher BET of the carriers, lower pH value and lower temperature prolonged BB release from PHSN, while stirring speed showed little influence on the release behavior. It showed that PHSN have a promising future in controlled drug delivery applications.     

造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病相关的膜性肾病一例

目的 总结造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病（cGVHD）相关的膜性肾病的诊疗体会。方法 为1例急性淋巴细胞白血病患者施行HLA全相合的无关供者外周血造血干细胞移植，术后应用甲氨喋呤和他克莫司（FK506）预防GVHD。术后第19d发生急性GVHD，经甲泼尼龙治疗逆转。分别于术后182d、235d停用FK506和泼尼松，5d后患者出现cGVHD表现，肝功能异常，并伴肾病综合征的相关表现，病理诊断为膜性肾病Ⅱ期，遂给予FK506和泼尼松治疗，同时辅以利尿、降脂等措施。结果发生膜性肾病时，患者的尿蛋白＋＋＋＋，白细胞75个／μl，上皮细胞359．5个／pl，病理性管型＋，管型计数为167个／μl，24h尿蛋白定量为4．28g；肾组织活检，无肾小球硬化，肾小球体积稍大，部分血管袢受压，开放欠佳，肾小球基底膜轻微增厚，外观呈僵硬感，系膜基质轻、中度增殖；间质区部分肾小管扩张，肿胀、变性，未见明显间质纤维化和炎症细胞浸润；Masson染色可见基底膜上皮侧嗜复红物沉积；免疫荧光检查，IgG＋＋＋，C3＋＋＋，IgA＋＋，沿毛细血管袢呈颗粒状节段性分布，系膜区呈团块状分布；IgM、Clq、CA均阴性。电镜下可见肾小球基底膜上皮下沉积物，并有基膜增厚，毛细血管系膜基质轻度增生。经泼尼松和FK506治疗，2个月后尿蛋白转阴。结论 造血干细胞移植后出现肾病综合征或蛋白尿，应考虑GVHD相关膜性肾病的可能，肾穿刺活检有助于诊断，糖皮质激素和FK506治疗有效。     

深低温冷冻肌腱细胞活性的研究

目的研究深低温冷冻方法对肌腱细胞活性的影响,比较程序性降温和普通深低温冷冻法对腱细胞活性的影响.方法纯种SD大鼠24只（出生21 d）,随机分为3组,取双侧跟腱.新鲜肌腱对照组（A）,常规深低温冷冻组（B）,程序性降温深低温冷冻组（C）.采用相同的方法对3组肌腱细胞进行细胞培养.相差显微镜观察原代和传代后细胞的生长,绘制细胞的生长曲线,考察细胞的活性;对细胞进行成纤维细胞染色、胶原染色和对细胞进行形态观察（扫描电镜）;水解法定量分析细胞培养基中羟脯氨酸浓度的变化,检测细胞合成胶原的能力.结果原代细胞培养时A组细胞的生长速度快于B组和C组（P＜0.01）,C组细胞的生长速度快于B组（P＜0.01）,这种生长速度的差异在细胞传代后消失.细胞的形态学和组织学符合成纤维细胞形态.3组细胞培养基中羟脯氨酸浓度变化的差异无统计意义（P＞0.05）.结论经深低温冷冻处理的肌腱中仍存在具有活性的腱细胞,但数量显著少于新鲜肌腱中活细胞的数量.应用计算机控制程序性慢速降温方法处理的肌腱其活细胞的数量有所提高,但仍低于新鲜肌腱中活细胞的数量.     

人工肱骨头置换术治疗高龄患者肱骨近端复杂骨折

目的 探讨伴有全身性疾病的高龄肱骨近端复杂骨折患者人工肱骨头置换术围手术期处理、术中操作与术后康复的特殊性及手术的可能性。方法 2002年10月～2005年2月对8例68岁以上肱骨近端四部分复杂骨折患者行人工肱骨头置换术。患者均伴有内科疾病，合并两种以上疾病者3例，对所有伴发疾病进行手术前、后内科系统处理，并有针对性地注意术中操作与术后康复指导。结果术后原有合并症均得到控制。所有患者获3～30个月随访。参照美国加州洛杉矶关节成形改良评分系统（SSMH）综合评分：优1例，良5例，中1例，差1例。8例患者疼痛方面得分平均为9．5分，功能方面得分为8．0分，肌力和运动方面得分为7．5分。结论 对有伴发疾病的高龄肱骨近端复杂四部分骨折患者行人工肱骨头置换术虽存在较大风险，但只要认真处理伴发疾病，有针对性地注意术中操作与术后康复指导，可以平稳渡过手术期，并可提高此类患者的生活质量。     

狂犬疫苗免疫后早期血清学抗体结果分析

目的观察接种狂犬病疫苗人群不同时期抗体产生情况，探讨最佳检测时间。方法用ELISA法检测人用狂犬病纯化疫苗接种者血清狂犬病毒抗体。结果对完成全程免疫后第7d、第14d和第30d的血清进行检测，第7d和第14d检出的抗体阳性率无显著性差异。结论现行国产狂犬疫苗的保护性不断提高，早期检测抗体对及时发现免疫失败者、降低发病率有着重要的意义。     

定向皮肤扩张器在面颈部瘢痕治疗中的应用

目的:探讨定向扩张器在治疗面颈部瘢痕中的临床应用。方法:回顾性分析我科2000年至2004年用定向扩张器治疗48例面颈部瘢痕患者。手术分两期:先于瘢痕附近正常皮下置入定向扩张器,皮肤充分扩张后行扩张器取出、瘢痕切除、局部皮瓣转移。结果:48例患者共治疗56处瘢痕,置入扩张器60个,一次修复最大面积为12cm×16cm,除5例遗留部分瘢痕经第二次皮肤扩张修复外,所有患者均得到有效治疗;扩张期并发症18处(30%),以扩张器外露最多见。结论:定向皮肤扩张器在面颈部瘢痕治疗中有很大的应用价值。但应重视预防并发症。     

股静脉置管在小儿重症烧伤救治中的应用

目的:为保障MEBT／MEBO的疗效,探讨股静脉置管在小儿重症烧伤中的应用价值。方法:回顾接受MEBT／MEBO治疗的36例小儿重症烧伤患者,总结分析采用股静脉置管进行输液治疗的操作特点、穿刺结果、并发症及护理经验。结果:36例小儿重症烧伤均一次穿刺成功,迅速建立了静脉输液通道,满足了液体量补充。结论:股静脉置管能够有效维持小儿重症烧伤体液循环及静脉药物的供给,有助于MEBT／MEBO的顺利实施。     

改进微波幅射器探头治疗宫颈糜烂疗效观察

目的：探讨改进的微波辐射器探头治疗宫颈糜烂的疗效。方法：将微波辐射器探头由双直线形、双针形、单针形等点线状改进成为“单舌形”和“双舌形”两种弧形平面探头，用于治疗宫颈糜烂。分析1999-2002年450例宫颈糜烂治疗资料，其中300例经微波治疗(A组)，150例经C02—激光治疗(B组)，随访1—3个月。结果：两组治疗后3个月内A组治愈率明显高于B组(P＜0．005)，总有效率A组明显高于B组(P＜0．025)。两组术中、术后不良反应比较：术中宫颈创面出血A组明显低于B组(P＜0．005)，术中腹痛、脱痂期出血量、术后局部感染率方面两组相似。结论：所改进的微波辐射器探头治疗宫颈糜烂治愈率高，操作安全，术后并发症少，医患乐于接受。