Parental origin and mechanism of formation of X chromosome structural abnormalities: Four cases determined with RFLPs

Parental origin and mechanism of formation of X chromosome structural anbormalities were studied in one each case of dup(X)(pter p11.4::p22.1qter), del(X)(qterp11:), i(X)(qtercenqter), and inv dup(X) (pterq22::q22pter) using various X-linked RFLPs as genetic markers. Segregation and densitometric analyses on polymorphic DNAs revealed that the dup(Xp) and the del(Xp) are both of paternal origin and the i(Xq) and i dic(X) are of maternal origin. The dup(Xp) had arisen by an unequal sister chromatid exchange and the del(Xp) had occurred through an intrachromosomal breakage-reunion mechanism, both in the paternal X chromosome. The i(Xq) had arisen either through centromere fission of a maternal X chromosome, followed by duplication, of its long-arm, or through a translocation between two maternal X chromosomes after meiotic crossing-over. The inv dup(X) arose through sister chromatid breakage and reunion in a maternal X chromosome. These results, together with those of previous studies, suggest that thede novo abnormalities due to events involving centromere disruption arise predominantly during oogenesis, while those due to simple breakage-reunion events occur preferentially during spermatogenesis.     

脑卒中老人主要照顾者照顾负担现状及相关因素研究

目的了解住院老年脑卒中患者主要照顾者的照顾负担并分析其影响因素。方法应用照顾者负担量表(caregiver burden inventory,CBI)、社会支持评定量表(social support rating scale,SSRS)、照顾者积极感受量表(positive aspects of caregiver,PAC),对211例住院老年脑卒中患者及其主要照顾者进行问卷调查。结果住院脑卒中患者子女照顾者的照顾负担得分总分(57.37±10.15)分,对应条目均分为(2.39±0.42)分。逐步多元回归分析显示,住院老年脑卒中患者BI指数、有无抑郁,照顾者年龄、照顾年限、社会支持水平、照顾者积极感受为照顾负担的影响因素。结论脑卒中照顾者的照顾负担亟待重视,其影响因素涉及多个方面。医护人员应针对相关因素,帮助减轻照顾者和老年脑卒中患者双方负担。     

胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植对宿主肝功能的影响及安全性评估**☆

背景：体外诱导胚胎干细胞分化为肝细胞已有不少成功的报道，但其体内移植后能否有效整合入宿主肝板、在肝内能否进一步生长分化并表达肝细胞功能以及成瘤的风险等情况目前还不清楚。 目的：应用治疗性肝再生模型进行胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植, 观察其在肝组织替代、体内的生长分化及成瘤性情况。 设计：随机对照动物实验。 单位：中山大学附属第二医院小儿外科。 材料：选用BALB/c小鼠24只为受体，鼠龄6~8周，体质量20~ 35 g，雌雄不拘购自广州市实验动物中心。实验所用胚胎干细胞源性肝干细胞由作者所在课题组诱导胚胎干细胞分化而成。小鼠胚胎干细胞株E14由本院干细胞中心提供。 方法：实验于2006-07/2007-06在中山大学附属第二医院干细胞研究中心完成。将24只小鼠随机分为2组：肝再生模型+干细胞移植组和肝切除+干细胞移植组，每组12只。前组分两次按50 mg/kg剂量腹腔内注射倒千里光碱(retrorsine) ，间隔2周，第2次注射4周后行70%肝部分切除制造肝损伤；然后经门静脉分别移植1×105羟基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）荧光标记的细胞入小鼠肝内进行胚胎干细胞源性肝干细胞移植。后组在行70%肝部分切除制造肝损伤模型后进行胚胎干细胞源性肝干细胞移植。 主要观察指标：荧光显微镜下观察移植细胞组受体鼠肝脏内分布、整合与体内生长分化情况。2周后行白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)、血清白蛋白水平检测其功能状况。将胚胎干细胞源性肝干细胞注入治疗性肝再生小鼠肝内，将未分化的胚胎干细胞移植入小鼠腋区皮下作为对照，观察胚胎干细胞源性肝干细胞体内成瘤情况。 结果：①肝干细胞在受体鼠肝内生长情况：CFDA SE标记的胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植1周，受体小鼠肝实质内可见散在绿色荧光分布。2周后，肝实质内绿色荧光分布区域明显扩大，且可见类似肝索样结构排列。②肝功能：共焦白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)结果表明，受体小鼠肝组织内可见标记细胞表达白蛋白阳性信号（呈黄色荧光），肝再生模型+干细胞移植组和肝切除+干细胞移植组血清白蛋白水平则无明显差异（P > 0.05）。③肝干细胞移植安全性：6周内未见畸胎瘤形成，而将未分化的胚胎干细胞移植入小鼠腋区皮下6周后则可见畸胎瘤形成。 结论：胚胎干细胞源性肝干细胞移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内后可有效在肝内能进一步生长分化并部分表达肝细胞功能；且此移植安全性较好。     

三种组织工程鼓膜支架材料的生物相容性

背景：自体组织修复鼓膜穿孔存在增加手术创伤、取材有限等缺点，构建组织工程鼓膜是鼓膜穿孔治疗的发展方向。 目的：构建3种不同材料的组织工程鼓膜支架材料，并评价其生物相容性。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，细胞学体内观察，于2004-08/2005-02在解放军第四军医大学组织工程中心完成。 材料：将健康小猪的硬脑膜、真皮及人羊膜进行脱细胞处理。 方法：将预先培养的豚鼠鼓膜成纤维细胞种植于3种材料表面，观察成纤维细胞的生长状态；18只豚鼠随机分为3组，于右侧背皮下分别埋植制备的脱细胞硬脑膜、真皮及人羊膜。 主要观察指标：3种脱细胞生物支架材料的显微结构及组织相容性。 结果：3种脱细胞材料均为网状结构，无任何细胞及细胞残核存在；豚鼠鼓膜成纤维细胞能够很好地贴附于3种脱细胞材料生长，无细胞毒性；将3种组织材料分别埋植于豚鼠皮下后，无埋植材料排出现象，1周时植入材料周围有较明显炎症反应，其中以脱细胞真皮周围组织反应较轻，4周时炎症反应消失。 结论：通过脱细胞方法可以成功建立具有良好生物相容性的组织工程鼓膜支架材料；3种材料中以脱细胞猪真皮的生物相容性最佳。     

深圳汉族人群HLA-Cw，-DQB1基因座等位基因的多态性

背景：HLA复合体是极其复杂的遗传系统，对其多态性的研究在法医学个体识别和亲权鉴定、群体遗传学、移植免疫、疾病相关等医学领域有重要的应用价值。 目的：了解HLA-Cw，-DQB1基因座的等位基因在深圳汉族人群中的分布规律。 设计、时间及地点：样本基因型的统计学分析，于2007-01/2008-06深圳市血液中心免疫遗传研究室完成。 材料：样本来自中国造血干细胞捐献者资料库深圳地区志愿捐献者，使用EDTA-K2抗凝管采集外周血。 方法：采用聚合酶链式反应-序列测定方法对深圳地区226名无关供者HLA-Cw，-DQB1基因座的2，3外显子进行序列测定与分析。等位基因频率采用直接计数法计算，Hardy-Weinberg平衡检验采用x2检验。 主要观察指标：样本HLA-Cw，-DQB1基因座的基因型。 结果：226个样本中共检测到25个Cw等位基因。其中Cw*0102，Cw*0702的频率最高（0.1881），其他频率较高的等位基因依次为Cw*0304，Cw*0302，Cw*0401及Cw*0801，Cw*0303，Cw*0602。该位点基因型观察值与期望值经χ2检验符合Hardy-Weinberg平衡定律（x2=116.00，u=1.78, ν=91，P > 0.05）。226个样本中共检测到17个DQB1等位基因。其中DQB1*0301占绝对优势，其基因频率为0.2124。其他频率较高的等位基因依次为DQB1*0303，DQB1*0601，DQB1*0502，DQB1*0602，DQB1*0302，DQB1*0401。该位点基因型观察值与期望值经χ2检验符合Hardy-Weinberg平衡定律（x2=101.34，u=0.78,ν=91，P > 0.05）。经计算HLA-Cw位点的杂合度为0.887 8，个体识别力为0.976 9，非父排除率为0.773 1，多态性信息含量为0.875 7；HLA-DQB1位点的杂合度为0.889 4，个体识别力为0.976 2，非父排除率为0.753 3，多态性信息含量为0.965 9。 结论：深圳汉族人群HLA-Cw及DQB1基因座是高度杂合、具有较高鉴别力和丰富信息含量的遗传标记，能较好地反映群体遗传特征。     

Antinuclear matrix antibody. Hidden antinuclear antibody in patients with connective tissue diseases

A total of 435 serum samples from patients with different rheumatic diseases were screened for the presence of autoantibody to nuclear matrix components by indirect immunofluorescence on 0.1 mol/L HCl extracted HEp-2 cell and WiL2 cell substrates. A total of 28 specimens were positive in this assay. Eighteen of them were from patients with systemic lupus erythematosus (18 of 250), 2 from patients with rheumatoid arthritis (2 of 115), and 8 from patients with mixed connective tissue disease (8 of 10). Antigenic material for this antibody is resistant to DNase, partially sensitive to RNase, and sensitive to trypsin. This indicates that the antigen is composed of protein and possibly RNA. In immunoblot analysis, sera positive for this antibody in indirect immunofluorescence assay recognized different peptides. This suggests that protein peptides are the major antigenic material.     

应用双向内置式牵引器矫正下颌骨短小畸形

目的:观察应用双向内置式下颌骨牵引器矫正下颌骨短小畸形结果.方法:下颌骨短小畸形2 例.在下颌角部位截骨,以下颌角为中心将双向内置式下颌骨牵引器上、下活动翼分别固定于升支和体部骨表面.术后第7 天开始牵引,各牵引螺杆的牵引速度为0.5~1.0 mm/d.待下颌骨升支高度和体部长度恢复较为理想后停止牵引,固定牵引装置3 个月. 结果:2 例患者均按计划完成牵引,无并发症.牵引升支和体部长度均为15 mm,下颌骨形态恢复理想.结论:双向内置式下颌骨牵引器可以在二维方向对下颌骨短小畸形的患者进行下颌骨形态重建,可以作为治疗不同类型下颌骨短小畸形的优选牵引装置之一.     

颅骨锁骨发育不良患者牙齿矿化不全超微结构的研究

目的:研究成骨细胞特异性转录因子(runt-related gene 2,runx 2)基因突变导致的颅骨锁骨发育不良(cleidocranial dysplasia,CCD)患牙超微结构以及Ca、P元素含量的改变.方法:收集临床CCD患者的滞留乳牙以及萌出下恒切牙,制备牙齿磨片,通过扫描电镜研究CCD患牙超微结构的改变,通过色散能分光计对牙釉质和牙本质中Ca、P元素含量进行能谱分析.结果:与正常牙齿相比,CCD患牙发育不良:釉丛和釉板结构增多,釉牙本质界平直,牙本质小管分布不均,牙骨质薄;牙釉质和牙本质中Ca、P含量降低.结论:runx 2基因突变对CCD患者牙齿构成及其组成元素均有很大的影响,表明runx 2基因对于牙齿正常发育有重要作用.     

周期型马来丝虫染色体的研究

采用空气干燥法对周期型马来丝虫染色体进行了研究,结果显示卵原细胞分裂中期相有4对小型的常染色体和1对大型的性染色体,精原细胞分裂中期相有4对小型的常染色体和1个大型的与1个中型的性染色体,终变期的卵母细胞有5个二价的染色体,次级精母细胞有5个单价染色体.以及受精卵分裂中期相有10个染色体。表明该虫染色体数为2n=10,性别决定机制为XY-XX型。     

阿苯达唑对华支睾吸虫体壁和肠管超微结构的影响

阿苯达唑对实验大鼠体内华支睾吸虫体壁和肠管影响的超微结构观察结果表明,该药对虫体皮层和肠绒毛,在给药1h即出现皮层突起肿胀、粘连和肠绒毛肿胀,其内的点线模糊不清。给药24h损害已相当严重,皮层突起出现坏死、崩溃,部分肠绒毛溶解、坏死。而且皮层和肠管损害的发生发展过程是同步的。可以认为阿苯达唑是通过对皮层和肠管的双重损害,进而影响其生理机能,使虫体死亡的。