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51.
目的:从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度初步勾勒出CCKB型受体介导的胞内信号转导途径。方法:培养的小鼠大脑皮质神经元分为实验组、对照组和受体拮抗剂组,在无磷培养基加入 [32P]-NaH2PO4标记细胞中的磷蛋白后,刺激组给予CCK8(10-7 mol/L),对照组加入等量的无磷培养基,受体拮抗剂组在分别加入CCKA型、CCKB型受体拮抗剂L364 718、L365 260以及L364 718+L365 260,浓度均为10-8 mol/L,孵育10 min后,再加入10-7 mol/L CCK8,37 ℃作用60 min,液氮中终止磷酸化反应。裂解细胞提取蛋白质,双向电泳分离,放射自显影7d后,获得磷酸化蛋白的放射自显影双向电泳图谱。采用PDQuest 2D分析软件对图谱进行差异分析,并在Swiss-Prot蛋白质数据库和自建磷蛋白数据库中查询定性。结果:CCK8作用60 min后,小鼠神经元CCK8信号转导相关磷酸化蛋白有:多种蛋白激酶、细胞信号分子、生长因子受体、转录因子等。加入L364 718后,神经元中PKCδ、P55G等的磷酸化水平降低,加入L365 260后, PKCα、PKGβ、OGFR、EGFR等的磷酸化水平呈现不同程度的降低,表明皮质神经元中CCKB受体介导的信号转导更复杂。结论:CCKA型、GGKB型受体均可介导CCK8在神经元的信号转导,但CCKB型受体可能发挥了更重要的作用,其介导的信号途径可能包括:肌醇磷脂信使系统、cAMP-PKA途径、MAPK途径、JNK途径、PI3K-PKB途径和cGMP-PKG途径。 相似文献
52.
人骨髓MSC对PHA活化T细胞周期以及表型和细胞因子分泌的影响 总被引:3,自引:2,他引:3
目的研究人骨髓间充质干细胞(MSC)对T细胞周期和活化的影响,探讨MSC对T细胞增殖抑制的作用机制。方法Ficoll密度梯度离心法分离纯化人骨髓MSC,体外扩增培养3代后用于实验。应用流式细胞术分析MSC对PHA作用下T细胞周期和早期表型CD25、CD69表达的影响,ELISA法检测细胞因子水平。结果人骨髓MSC体外可使PHA刺激下的T细胞滞留于细胞周期的G0/G1期,下调活化T细胞早期表型CD25、CD69的表达,抑制IL-2、IFN-r的分泌。结论人骨髓MSC体外可通过对T细胞周期的影响抑制其活化和增殖。 相似文献
53.
目的:通过比较未经灌流处理的重肝血浆及处理过的重肝血浆对CYP3A的影响,阐明C3A细胞安定代谢变化的原因,为未来C3A细胞的改造与功能优化奠定基础。方法:制备血浆和培养C3A细胞;实验分为4组:正常胎牛血浆(NFBP)组,正常人血浆(NHP)组,体外灌流慢性重型肝炎患者血浆(HPP)组,体外未灌流慢性重型肝炎患者血浆(CSHP)组。用分光光度法测定红霉素N-脱甲基酶(ERD)活性即CYP4503A的活性,Western blot法测定CYP4503A4的表达。结果:CSHP组ERD活性低于NFBP组(P〈0.05)及NHP组(P〈0.05),HPP组ERD活性也低于NFBP组(P〈0.05)及NHP组(P〈0.05),HPP组ERD活性高于CSHP组(P〈0.05);CSHP组CYP4503A4的表达低于NFBP组(P〈0.05)及NHP组(P〈0.05),HPP组CYP4503A4的表达也低于NFBP组(P〈0.05)及NHP组(P〈0.05),HPP组CYP4503A4的表达高于CSHP组(P〈0.05)。结论:经慢性重型肝炎患者血浆培养的C3A细胞,CYP4503A活性及蛋白表达降低。与之相比,经过体外灌流的慢性重型肝炎患者血浆其C3A细胞CYP4503A活性及蛋白表达有所增加,CYP4503A活性增加可能是导致安定代谢变化的原因。 相似文献
54.
目的探讨醛固酮合成酶(CYB11B2)基因多态性与怀化侗族高血压高发人群原发性高血压(EH)及血脂水平的关系.方法采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态分析方法(PCR-RFLP)检测89例怀化侗族高血压病人和85例正常人的CYB11B2-344C/T等位基因频率和基因型频率.结果高血压组CYB11B2-344C/T基因型频率(CC 10.1%、CT41.6%、TT 48.3%)和等位基因频率(C 30.9%、T 69.1%)与正常对照组基因型频率(CC 10.3%、CT 27.6%、TT 62.1%)和等位基因频率(C 24.1%、T 75.9%)比较无显著性差异.CC基因型患者与CT TT基因型患者比较,收缩压和舒张压无显著性差异.结论怀化侗族人群EH可能与CYB11B2基因多态性无关. 相似文献
55.
目的:为踝、距下关节病变及损伤的诊断、修复和重建提供矢状断层解剖学基础。方法:用成年男尸右足标本5例,置冰柜冻硬后,每例切制4个踝及后足部矢状断层标本。结果:胫距关节矢状径最长为31.9mm,距骨滑车与胫骨关节软骨厚各为2.5mm与2.4mm,胫距关节间隙为2.6mm,内侧韧带厚为3.1mm;前、后距下关节软骨厚分别为1.5mm、1.2mm与1.7mm、1.4mm,关节间隙为0.8mm与1.4mm,后距下关节矢状径最长为18.9mm,距跟骨间韧带长8.6mm,矢状径为2.6mm。结论:本文结果为临床踝、距下关节疾患的诊治及关节镜技术提供了解剖学资料。 相似文献
56.
IL-18在体外培养系统中诱导肿瘤快速杀伤效应及肿瘤特异性CTL 总被引:3,自引:0,他引:3
目的应用rhlL-18在体外培养系统(Coculture system in vitro,CCs)中诱导快速肿瘤杀伤效应及诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)。方法 采用StemSep^TM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突细胞(DCs),流式细胞仪分析细胞表型,125I-UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性,ELISA方法检测IFN-7的产生量。结果 在CCs中,rhIL-18诱导出快速肿瘤杀伤效应,这种杀伤效应无抗原特异性、不受MHC限制,DCs和T细胞的存在与否对其无明显影响。在同一培养系统中,肿瘤抗原存在的条件下,96h后,rhIL-18能够诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应。结论 rhIL-18能够在体外培养系统中相继诱导肿瘤快速杀伤效应及肿瘤特异性CTL。 相似文献
57.
李万鹏 ' target='_blank'> 尹文强 ' target='_blank'> 翟亚 ' target='_blank'> 亓霏 ' target='_blank'> 杨春晓 ' target='_blank'> 李秋莎 ' target='_blank'> 黄冬梅 ' target='_blank'> 《现代预防医学》2022,(17):3222-3227
目的 识别影响疫情防控的关键要素和路径组合,探求影响各国防控差异的机制,为疫情常态化防控提供理论指导。方法 运用清晰集定性比较分析(csQCA)方法,以世界22个典型国家为案例对象,主要从Our World in Data网站获取新冠疫情相关数据,对案例各条件变量及其非集进行必要性分析,对条件组态进行充分性分析。结果 必要性检验一致性水平均低于0.9; 输出5种组态,且单个解(组态)和总体解的一致性均为1,实现了完全一致性。结论 单个要素影响力较弱; 国家低确诊人数存在5条驱动路径,可归纳为资源丰富-弱疫苗型、信任驱动-强疫苗型、经济发达-地理优势型3种模式; 较高的人均GDP、人均床位数和信任度是影响新冠确诊人数的核心要素。 相似文献
58.
目的 基于NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)细胞焦亡通路,探讨益气养阴活血方防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法 随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只、造模组42只。造模组高糖高脂饮食6周后予一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、缬沙坦组(8.33 mg·kg-1)、益气养阴活血方低、高剂量组(11、22 g·kg-1)。连续灌胃6周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)及24 h尿蛋白定量(24 h-UTP);苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理形态学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠FBG、CHO、TG、BUN、SCr、24 h-UTP及血清IL-1β、IL-18水平均显著升高(P<0.01),肾组织病变程度严重,且肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物组FBG、CHO、TG、BUN、SCr、24 h-UTP及血清IL-1β、IL-18水平均明显下降(P<0.05,P<0.01),肾组织病变程度得到改善,且肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),以益气养阴活血方高剂量组效果最佳。结论 益气养阴活血方可通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制细胞焦亡,缓解DKD大鼠炎症反应,减轻肾脏病理损伤。 相似文献
59.
目的:评价祛瘀解毒利水法(血必净和加味苓桂术甘汤)辅助治疗对脓毒症心肌病(SICM)患者预后的影响。方法:将96例患者随机分为观察组和对照组,每组各48例。对照患者给予脓毒症集束化治疗;观察组在对照组的基础上给予祛瘀解毒利水法治疗(血必净注射液静脉滴注和加味苓桂术甘汤内服),两组疗程均为7 d。评估两组患者病情和预后评估指标[28 d死亡率,重症监护室(ICU)住院时间,主要不良心血管事件(MACE)、急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)、脓毒症相关序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、急诊脓毒症死亡风险评分(MEDS)]、心功能指标[左室射血分数(LVEF)、舒张早期二尖瓣血流速度/舒张晚期二尖瓣血流速度(E/A)、舒张早期二尖瓣血流速度/二尖瓣环舒张早期运动速度(E/e′)、后负荷校正心功能参数(ACP)]、心肌损伤标志[高敏心肌肌钙蛋白T(hs-cTnT)、N-末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌型-脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)]、血流动力学指标[血管外肺水指数(EVLWI)、全心舒张末期容积指数(GEDVI)、心脏指数(CI)和... 相似文献
60.
目的:鉴定并研究半夏AP2/ERF转录因子的功能,为推进半夏品种的遗传改良提供理论依据。方法:该文基于半夏三代转录组数据鉴定了半夏中AP2/ERF家族成员,并对其进行系统的生物信息学分析,同时利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测半夏AP2/ERF在不同组织及不同胁迫条件下的表达情况。结果:通过转录组数据共筛选出8个全长AP2/ERF转录因子家族成员,归为AP2、ERF和DREB 3个亚家族;半夏AP2/ERF的氨基酸数目为251~512个,等电点为5.29~11.72,不稳定指数为45.90~82.41,且主要定位于细胞核中;半夏AP2/ERF基因的结构域和Motifs相对保守。组织特异性表达模式分析显示,半夏AP2/ERF基因在不同组织部位中具有不同的表达模式,且主要在叶中表达。逆境胁迫应答分析表明,PtERF1主要响应NaCl的胁迫诱导;PtERF2和PtERF4在低温和聚乙二醇(PEG)胁迫下表达量均有较大幅度的上调;PtERF3同时响应低温和NaCl两种逆境的诱导;PtERF5同时响应高温、低温、NaCl、PEG胁迫诱导;PtERF7在高温胁迫下表达... 相似文献