Toll样受体2胞外域及其氨基端和羧基端片段的克隆与序列分析

目的：为研究TLR2胞外域在肽聚糖诱导的信号转导中的功能，构建TLR2胞外域及其氨基端和羧基端片段真核表达载体。方法：提取HL－60细胞总RNA，以RT－PCR方法获取了TLR2胞外域cDNA片段，将其与pGEM-T Easy载体连接，转化E.coli JM109,建立了TLR2胞外域的cDNA克隆；籍此，又相继克隆了胞外域的氨基端和羧基端片段，然后将这三个片段克隆到真核表达载体pcDNA3中。结果：序列分析表明，与GenBank中的人TLR2全长cDNA序列比较，仅4个碱基不同，同源性为0．998。结论：成功获得了HL－60细胞TLR2胞外域及其氨基端和羧基端片段的克隆。     

用固定化啤酒酵母细胞合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱

κ－卡拉胶－魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞，经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱（CDP－胆碱）。结果表明：250mL摇瓶中加入50mL反应液（葡萄糖400mol/L，CMP10mmol/L，磷酸碍碱50mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液100mmol/L，MgSO410mmol/L,pH=8.0），固定化细胞1200g/L,34℃、150r/min下，反应4h后补加400mmol/L葡萄糖，反应8h可使60％以上的CMP转化为CDP－胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶I（NAD^ ）后，固定化细胞可连续使用4次，CDP－胆碱转化率维持在40％以上。     

Ⅱ型糖尿病血浆PAI-1、t-PA检测的意义和结果评价

目的:通过对Ⅱ型糖尿病患者分组(伴血管病变组、胰岛素抵抗组、胰岛素抵抗伴血管病变组、Ⅱ型糖尿病组)检测PAI-1、t-PA抗原及活性,并计算抗原比和活性比,以评价各检测指标的临床价值。方法:采用ELISA法检测PAI-1及t-PA抗原,采用发色底物法检测PAl-1、t-PA活性。结果:189例标本总体患病组及分组后各组的PAI-1活性、t-PA活性及t-PA活性/PAI-1活性比值与正常对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。患病组间除t-PA抗原,其余检测显示胰岛素抵抗组、胰岛素抵抗组伴血管病变组与Ⅱ型糖尿病组存在显著性差异(P<0.05)。结论:在上述检测指标中t-PA活性、PAI-1活性反映血管病变的发生较敏感,t PA/PAI-1的活性比值更具临床应用价值。     

带蒂皮瓣移植修复颌面外缺损的观察与护理

颌面部的严重外伤及皮肤恶性肿瘤切除术后往往遗留相应部位的组织缺损,给患者带来功能的丧失和面容的破坏,皮瓣移植不仅恢复和改善了患者的外形和功能,同时也大大提高了患者的生存率和生存质量.实践证明,术前周密的计划、充分的准备,术中细致准确的操作,术后严密的观察与护理,是防止术后并发症,保证移植皮瓣成活的重要保障.     

低剂量阿司匹林在辅助生育技术中的应用

目的　探讨在进行体外受精 -胚胎移植 ( IVF-ET)或卵母细胞浆内单精子注射 ( ICSI)患者口服低剂量阿司匹林对治疗结果的影响。　方法　 IVF或 ICSI治疗的 3 2 4个 ET周期 ,分为是否服用阿司匹林两组 ,分别统计患者注射人绒毛膜促性腺激素 ( h CG)时子宫内膜厚度及 ET胚胎数 ,比较两组的胚胎种植率、临床妊娠率及流产率 ,并进行统计学处理。　结果　两组在注射 h CG日内膜平均厚度、ET中优质胚胎的比率及流产率均无显著性差异 ;未服用阿司匹林组的 ET胚胎数明显多于服用组 ( P<0 .0 1 ) ,而前者的种植率、临床妊娠率却明显低于后者 ( P<0 .0 1 )。　结论　低剂量阿司匹林在 IVF-ET或ICSI的辅助生殖治疗中能有效地提高胚胎种植率 ,增加患者的临床妊娠率     

公安县1991～2005年性传播疾病流行病学分析

公安县自1991年规范性病疫情报告后,性病病例报告的种类、数量逐年增加,疫情呈快速增长趋势。为了解全县性病流行情况,探讨流行规律,为制定相应的防制对策提供依据,对全县1991～2005年各医疗单位报告的性病病例进行流行病学分析。1流行趋势1991～2005年共报告性病1119例,1992年报告发病率为3·87/10万,1993年最低,为0.60/10万,2004年最高,为24.26/10万。15年发病率总体呈上升趋势,2002～2005年平均发病率为18.28/10万。2性病的种类及构成1991～2005年全县性传播疾病有淋病、尖锐湿疣、梅毒、非淋菌性尿道炎、生殖器疱疹、软下疳及性病性淋巴…     

应用荧光探针H2DCF-DA检测光照致细胞内活性氧产生的初步研究

目的应用荧光显微镜及新型荧光探针H2DCF-DA检测在光源照射过程中人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)内活性氧的产生情况。方法将ECV304细胞接种于35mm培养皿中,24h后加入H2DCF-DA,使其终浓度为10μmol/L,孵育30min。利用荧光显微镜的激发光源作为照射光源,在采集荧光图像的同时完成光源照射,光源输出波长范围为460～490nm,功率密度约为100mW/cm2。连续采集DCF的荧光图,观察细胞内DCF荧光的变化情况,采用计算机图像处理和分析技术,求得细胞内不同照射时间点DCF平均荧光强度,进而得到平均荧光强度-时间曲线。另外,使用线粒体特异标记探针MitoFluorRed589与H2DCF-DA共同孵育细胞,分别采集同一细胞的DCF的荧光图和MitoFluorRed589的荧光图,并利用像素-荧光强度分析方法来确定DCF荧光在细胞内的分布位置。结果在光源照射的开始阶段,ECV304细胞内的DCF荧光强度迅速增加,在第10s时便上升至第2s时的2.2倍,但是随着照射时间逐渐延长,荧光强度增幅逐渐变小,到第60s时上升至第2s时的4.7倍。观察时间进一步延长,DCF的荧光强度的变化似乎进入平台期,继而开始出现下降。考察DCF荧光在ECV304细胞内的分布位置主要通过比较细胞内不同区域的I1/I2值,通过图像分析与计算得到线粒体区、细胞核区以及细胞质非线粒体区内I1/I2值分     

中医骨伤科理论体系的探讨

从中医药学的发生和发展中，可以看到中医药学理论体系形成的过程。从历史文献中能查到的最早的医药学，可分为三个内容：第一，从伏羲制九针的传说，到总结成《黄帝针灸》；第二，由黄帝、歧伯讨论经脉的传说，到总结成《素女脉诀》；第三，由神农尝百草的传说，到总结成《神农本草经》。针灸、本草究竟应始于何人?事实上中医药的起源和发展，绝不     

伦拿连灭菌剂在透析器复用中灭菌效果观察

目的观察伦拿连灭菌剂复用透析器的灭菌效果.方法使用0.5%过氧乙酸(A组)、2%甲醛(B组)和3.5%伦拿连(C组)复用透析器,观察3组热原反应和透析器破膜发生率.结果随机抽取3组血路管、透析器进行细菌学监测,无细菌生长;C组、B组和A组热原反应发生率分别为0.12%、2.54%和1.82%,提示3组间热原反应发生率差异有非常显著性(χ2=82.5,P<0.05);透析器破膜发生率分别为0.053%、0.46%和2.92%(χ2=107.1,P<0.05),提示3组间透析器破膜发生率差异有非常显著性.结论选用伦拿连灭菌剂对透析器进行复用灭菌,热原反应及透析器破膜发生率明显低于过氧乙酸和甲醛.     

结肠造口结肠癌原位移植模型的建立

Objective To establish a colorectal cancer colostomy orthotopic transplantation mice model. Methods A colostomy was preformed in BALB/C nu-nu nude mice. After two weeks, when the stoma healed, tumor tissues developed from Lovo cells were implanted into the submucosa of the stoma. When tumor grew up to 5 nun, fluorouracil(5-FU, 20 mg/kg) was administrated by intraperitoneal injection. Tumor developed at the colostomy was observed and its biological characteristics and behaviour were evaluated. Results Colostomy was performed in 10 mice and stoma healed at two weeks. Ten colostomies developed detectable tumor in two to three weeks. Three to five weeks later, the tumors grew up to 5 mm. Survival time of mice injected with 5-FU was (15.2±3.7) weeks (ranged: 11-21 weeks), and the survival time of the no-treantment group was (12.3±2.8)weeks (ranged:9-19 weeks). The difference was statistically significant (P=0.001). The rate of mesenteric metastasis was 1/5 and 2/5 in the treatment and no-treatment group respectively. Conclusion Colostomy orthotopic transplantation mice model is an ideal mice model with the advantages of having high success rate, visualization of implanted tumor in living animal, long survival time and significant tumor response to common chemotherapeutic agent.