用ELISA检测肺癌患者血清中Endostatin的变化

目的建立快速敏感的ELISA方法检测肺癌患者血清内皮抑素(Endostatin)。方法对41例肺癌患者及22例良性肺病患者进行血清Endostatin测定并与20例正常人进行比较。结果肺癌患者体内Endostatin水平高于良性肺病患者和正常人。结论快捷的ELISA检测法可以成为人们在临床及基础研究Endostatin的新方法。     

人野生型parkin基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的 克隆人野生型parkin基因并构建真核表达载体pCDNA3．1—parkin，将重组质粒转染PC12细胞获得高表达人野生型parkin基因的PC12细胞克隆。方法 从胎脑组织中提取总RNA，用RT—PCR方法获得人野生型parkin基因的全长cDNA，插入pCR2．1—TA克隆载体中进行序列测定，测序正确后将其亚克隆至表达载体pCD—NA3．1，利用脂质体将重组质粒转染PC12细胞，经G418筛选获得抗性细胞克隆，采用RT—PCR和Western Blot方法鉴定人野生型parkin基因在PC12细胞中的过表达。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒，RT—PCR和Western Blot证明经G418筛选得到的转基因PC12细胞克隆中存在人野生型parkin基因的表达。结论 成功构建了人野生型parkin基因的真核表达载体，获得了稳定表达人野生型parkin基因的PC12细胞克隆，为进一步研究parkin的生物学功能以及parkin在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。     

甲基强的松龙治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的作用机制

目的:研究细胞因子、T细胞凋亡和淋巴细胞增殖在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)形成中的作用及甲基强的松龙(MP)治疗EAE的作用机制。方法:采用人脑纯化的髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂免疫Lewis大鼠,建立EAE动物模型。用双抗体夹心ELISA法检测各组大鼠血清中IL-10、TNF-α、IFN-γ的含量:流式细胞仪检测外周血T细胞凋亡;3H-TdR释放法检测外周血淋巴细胞转化率。结果:与对照组比较,EAE组的外周血IFN-γ、TNF-α水平明显增高,IL-10水平明显降低,MP治疗后IFN-γ和TNF-α水平下降,IL-10浓度上调。MP还诱导外周血T细胞凋亡和抑制MBP致敏淋巴细胞增殖并呈剂量依赖性。结论:应用人MBP成功建立EAE大鼠模型,MP可能通过调节Th细胞因子格局、促进Th2细胞因子分泌、抑制MBP致敏淋巴细胞增殖及外周血T细胞凋亡而发挥治疗多发性硬化的作用。     

11β-羟类固醇脱氢酶与2型糖尿病

11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSDs)催化氢化可的松(皮质酮)和可的松(脱氢皮质酮)的相互转化，对调节局部糖皮质激素的活性起着重要作用，而糖皮质激素可诱导胰岛素抵抗。肝、脂肪等组织内11β-HSD活性的改变与肥胖、2型糖尿病等疾病密切相关。     

粗糙脉孢菌漆酶基因的克隆及在毕赤酵母中的初步表达

采用连续延伸PCR方法克隆到粗糙脉孢菌（Neurospora crassa）漆酶基因，并将其克隆到表达载体pPIC9k，重组质粒经线性化、电激转化Pichia pastoris KM71，部分阳性克隆的PCR结果表明：漆酶基因已整合到巴斯德毕赤酵母染色体上，重组菌经甲醇诱导后3～5d产漆酶量最高，为2-3U／mL。     

49Sibutramine accelerates gastric emptying, inhibits intestinal motility in conscious dogs

Fasting interdigestive myoelectric complex (IMC) and postprandial gastroduodenal myoelectric activities are regulated by motilin and leptin, respectively (L. Zhou 2005). This study is to observe whether electrical acupuncture points could increase fasting gastroduodenal IMC and postprandial activities, as well as increase the release of motilin and leptin. Methods: Bipolar platinum electrodes were implanted on the serosa of antrum and duodenum in 10 conscious Wistar rats to record IMC and postprandial digestive myoelectric activities. We acupunctured Points Zusanli (S‐36), Tianshu (S‐25), and Liangmen (S‐21) during phase I of IMC (Frequency 20~100 Hz, Strengthen 12~16 mA, period 90 min) and compared with non‐specific electric stimulation (sham acupuncture) group. Serum motilin and leptin level was measured by RIA. Results: (1) Acupuncture points could shorten markedly phase I of antroduodenal IMC and increase the period of phase III (P < 0.01). Acupuncture points also increased the number of spike burst of antral and duodenal slow wave by (121.24 ± 20.0)% and (97.34 ± 15.20)% (compared with control group, P < 0.01). In postprandial period, acupuncture points could increase the number of spike burst of antral and duodenal slow wave by (142.52 ± 23.50)% and (102.48 ± 13.25)% (compared with control group, P < 0.01). (2) When acupuncture points increased the number of spike burst of IMC in fasting state, serum motilin concentration also increased, which was (74.56 ± 8.20)% more than control group (P < 0.01). When acupuncture points with meal, serum leptin concentration increased with myoelectric activity, which was (139.84 ± 20.25)% more than control group (P < 0.01). There was no change of motilin and leptin concentration in non‐specific electric stimulation group. (3) Cutting off subphrenic vagus nerves could totally block the effect of acupuncture points on antroduodenal myoelectric activities and release of motilin and leptin. Conclusions: Acupuncture points could effectively increase fasting and postprandial antroduodenal myoelectric activities. This effect is mediated by motilin and leptin, respectively.     

前列腺素E1对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨前列腺素E1（PGE1）对肝脏 因再灌注损伤的保护作用。方法 制作常温下大鼠部分肝叶缺血再灌注模型，于缺血前经门静脉给予PGE1，45min后恢复血流灌注，并于1h后取门静脉血测定血清谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GPT）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及内皮素1（ET－1），同时取缺血肝叶行病理组织学检查。结果 缺血再灌注组GOT、GPT、LDH及TNF－α和ET－1均明显高于正常对照组，PGE1组则明显低于缺血再灌注组。PGE1组的肝脏病理组织学改变明显轻于缺血再灌注组，并接近正常对照组。结论 PGE1对肝缺血再灌注具有保护作用。     

胱蛋白酶抑制剂C和内生肌酐清除率与肾脏病理变化的关系探讨

目的　了解血胱蛋白酶抑制剂 (cystatin)C和内生肌酐清除率 (Ccr)与肾脏病理变化的关系。 方法　选择 1999年 1月～ 2 0 0 3年 2月因各种肾脏疾病收治入院行肾穿刺活检术的患儿共 12 4例 ,入院后查血cys tatinC和Ccr ,并行肾穿刺活检术以了解肾脏病理变化 ,然后通过相关及多元线性回归分析了解血cystatinC和Ccr与肾脏病理变化的关系。结果　血cystatinC与肾脏病理变化的复相关系数 (R) =0 .6 91(P <0 .0 1) ,血cys tatinC与肾脏病理变化之间存在直线关系 ,其回归方程为Y =0 .6 0 5 +0 .30 7X1+0 .4 93X2 (F =5 5 .18,P <0 .0 1)。Ccr与肾脏病理变化的R =0 .4 0 5 (P <0 .0 1) ,Ccr与肾脏病理变化之间亦存在直线关系 (F =11.89,P<0 .0 1)。结论　血cystatinC比Ccr更能反映肾脏病理变化的严重程度。血cystatinC和Ccr均与肾间质的变化密切相关 ,尤以血cystatinC更敏感。因此 ,血cystatinC可作为判断肾脏疾病预后的重要参考指标 ,以及时了解肾脏病理变化采取有效的治疗。     

脑动静脉畸形血管重构的分子生物学机制

脑动静脉畸形存在活跃的血管重构,本文就其重构的分子生物学机制作一综述。     

环氧合酶-2和血管内皮生长因子共表达与肝细胞癌血管形成的关系

目的　探讨环氧合酶 (COX) 2与肝细胞癌血管形成的关系。方法　利用免疫组织化学、Westernblot方法检测 48例肝癌组织中COX 2和血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白及逆转录 聚合酶链反应法 (RT PCR)检测COX 2和VEGFmRNA的共表达 ,对共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织进行微血管记数。结果　免疫组织化学检测中 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2和VEGF蛋白。类似结果见于蛋白电泳分析。RT PCR显示 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2mRNA和VEGFmRNA。两者之间的表达明显相关 (γ =0 .845 )。共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织中 ,平均微血管数 (5 6.8± 17.5 )个 ,明显高于阴性表达组。结论　COX 2可能与肝细胞癌的血管形成有关 ,且其作用之一可能是通过上调VEGF通道来发挥的