高糖对大鼠胰星状细胞增殖和细胞外基质合成的影响

目的探讨高糖刺激对大鼠胰星状细胞(pancreatic stellate cell, PSC)增殖和细胞外基质(extracellular matrix, ECM)合成的影响.方法分离培养大鼠PSC,取传第3～5代细胞,分别用正常葡萄糖(5.6 mmol/L葡萄糖)(正常对照)、高葡萄糖(25 mmol/L葡萄糖)(高糖组)和甘露醇(5.6 mmol/L葡萄糖+19.4 mmol/L甘露醇)(等渗对照组)处理5天后,用MTT法、3H-Thymidine掺入和3H-Proline掺入法分别检测细胞增殖、DNA合成和总胶原合成,同时用放免法检测细胞培养上清中Ⅲ型前胶原氨基末端多肽(amino-terminal propeptide of type Ⅲ procollagen, PⅢNP)和透明质酸(hyaluronic acid, HA)含量.结果与等渗对照组比较,高糖组PSC增殖、DNA合成、总胶原合成和细胞上清HA含量均显著增加(P<0.05),但细胞上清PⅢNP含量无显著性差异(P>0.05).结论高糖可刺激PSC增殖与胶原合成,参与PSC活化.体内高糖血症可能是PSC活化的机制之一.     

慢性胰腺炎患者粪弹力蛋白酶检测的临床价值

为探讨粪弹力蛋白酶 (E1)试验对慢性胰腺炎患者胰腺外分泌功能检测的临床应用价值 ,应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法对 5 5例慢性胰腺炎、2 5例非胰腺消化系疾病患者进行了E1的检测 ,并同时与尿BT PABA检测结果进行对比。慢性胰腺炎患者粪E1及尿BT PABA排除率均明显低于非胰腺疾病组 (P <0 0 5 )。以 2 0 0 μg/ g为界 ,对慢性胰腺炎患者粪E1的敏感性轻度者为 14 3% ,中度者为 36 8% ,重度者为 86 7% ,总的敏感性为 5 1% ,特异性为 86 %。提示慢性胰腺炎患者存在E1的下降 ,但对诊断轻至中度慢性胰腺炎者其敏感性较差 ,而对重度胰腺炎患者其敏感性、特异性均较高 ,对临床诊断、治疗有指导意义。     

幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白DNA疫苗的构建及鉴定

目的 构建幽门螺杆菌(Hp)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)DNA疫苗。方法 扩增全长napA(编码HP-NAP)，将其与克隆载体pBT连接，经测序及同源性分析后，将相应片段亚克隆入真核表达载体pIRES，经双酶切及PCR鉴定。结果 PCR扩增-435bp产物，核苷酸序列测定及BLAST分析表明，所克隆序列与基因库中Hp悉尼株(SS1)napA核苷酸及蛋白质的同源性均为98％。ANTHEPROT软件预测其蛋白质具有良好的疏水性和抗原性。经PCR及双酶切鉴定，证实成功构建携带，napA的重组真核表达质粒plRES-napA。结论 成功构建并鉴定了HP-NAP重组DNA疫苗，为进一步研究其免疫原性及研制口服DNA疫苗奠定了基础。     

胰液VEGF检测对胰腺癌的诊断意义

目的探讨胰液中血管内皮生长因子(VEGF)检测在胰腺癌的诊断和良、恶性鉴别中的意义.     

插入序列IS605与cag致病岛分割在中国人幽门螺杆菌中的不一致性

目的:探讨中国人群感染的幽门螺杆菌(Hp)中IS605在 cag致病岛基因分割中的地位和作用.方法:采用PCR方法检测107例临床分离培养的Hp菌株,分别扩增cagA中的298 bp片段、cag致病岛中cagⅠ与cagⅡ连接处的228 bp片段及IS605中的1 167 bp片段.结果:作为cag致病岛一部分的cagA,其阳性的检出率为92.5％,在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等疾病间的检出率无显著差异(P>0.05).cagⅠ与cagⅡ连接处、即未被分割为cagⅠ与cagⅡ的cag致病岛的检出率仅有4.7％,而作为参与分割cag致病岛的IS605,其检出率仅有43.9％,明显低于被分割为cagⅠ与cagⅡ的cag致病岛的检出率,IS605在十二指肠溃疡中的检出率(13.6％)明显低于慢性胃炎(52.2％)中的检出率(P<0.05).而呈连续状态cag致病岛在十二指肠溃疡中的检出率(14.8％)则显著高于慢性胃炎(1.5％)中的检出率(P<0.01).结论:在中国人群感染的Hp中,IS605的检出率与cagⅠ与cagⅡ呈连续状态的cag致病岛检出率明显不符,提示不仅有IS605,可能还存在有其他类似转座子的基因成分参与cag致病岛分割.     

RL—9尿液分析仪测定白细胞酯酶筛选脓尿的评价

RL-9尿液分析仪因操作简单快速而被迅速推广应用。朱汉民等用RL-9尿液分析仪对正常人尿液作了分析。本文旨在探讨尿液白细胞酯酶(Leucocyte esterase,测定值与传统手工法镜检尿沉渣中     

~(13)C-尿素呼气试验和血清抗CagA IgG检测对幽门螺杆菌感染的诊断价值

幽门螺杆菌(Hp)是慢性胃炎,消化性溃疡的主要致病菌,并与胃癌、MALT淋巴瘤的发生发展密切相关。在我国,有报道Hp的感染率可高达70％。Hp感染的诊断方法有血清抗Hp抗体检测,~(13)C-或~(14)C-尿素呼气试验、胃粘膜快速尿素酶试验、胃粘膜组织学染色检查、细菌分离培养及PCR扩增检测等。血清学检查和尿素呼气试验(UBT)具有非侵入性、无痛苦和检查相对简单等优点。为了进一步比较这两种诊断方法对Hp感染的临床应用价值,我们用双盲法对195例患者进行双重检测,现将结果报道如下。     

人胰液蛋白质组的双向电泳方法初步研究

目的 在已有实验基础上进一步建立优化的用于人胰液差异蛋白质组研究的双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)方法;探讨利用混合胰液进行胰腺疾病的胰液差异蛋白质组学的可行性.方法 通过ERCP术中放置鼻胰管引流收集5例胰腺癌(其中2例手术病理分别为胰腺中分化导管腺癌及导管内乳头状瘤癌变,另外3例经影像学检查结合临床诊断)和6例慢性胰腺炎胰液标本,取其中一例慢性胰腺炎胰液标本,通过改进胰液标本的处理方法、泡胀液的组成和一向等电聚焦条件后进行双向凝胶电泳,并和先前实验条件下的胰液2-DE图谱进行比较分析;同时利用优化后的双向凝胶电泳方法比较单份胰液和同病种混合胰液标本的2-DE图谱.结果 应用优化的2-DE方法,在胰液蛋白质加样量为200 μg时,可见凝胶上约有280个蛋白质点,有较好分辨率,较原条件下电泳图谱有较大改进.单份胰液和同病种混合胰液标本的2-DE图谱有较高程度的相似性(>75%).结论 优化后的胰液2-DE方法切实可行,通过各不同胰腺疾病混合胰液的2-DE图谱差异比较可为胰腺疾病的胰液差异蛋白质组学研究建立良好的基础.