淫羊藿苷通过调节PGRN表达减轻L-谷氨酸诱导的HT22细胞损伤

目的:研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)对L-谷氨酸诱导HT22细胞损伤的保护作用及对颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)表达的影响。方法:应用CCK-8法检测不同浓度L-谷氨酸(0、2.5、5、10、20、40、80 mmol/L)诱导HT22细胞损伤24 h后细胞存活率,确定L-谷氨酸对细胞损伤的浓度;CCK-8法确定淫羊藿苷对HT22细胞的无毒范围及不同浓度淫羊藿苷对L-谷氨酸诱导的HT22细胞存活率下降的影响;免疫组织化学法检测PGRN在HT22正常细胞中的表达;免疫荧光法和蛋白质印迹法检测淫羊藿苷对PGRN在HT22细胞中表达的影响。结果:确立10 mmol/L L-谷氨酸与HT22细胞共孵育24 h为损伤模型的实验条件;淫羊藿苷实验浓度范围内HT22细胞存活率无明显下降;加入淫羊藿苷与L-谷氨酸共孵育后,HT22细胞存活率出现明显上升,且具有显著性差异(P0.001);PGRN在HT22细胞的胞浆和突起中有明显表达;免疫荧光法和蛋白质印迹法均表明不同浓度淫羊藿苷影响PGRN在L-谷氨酸诱导HT22细胞损伤模型中的表达,且随着淫羊藿苷浓度增加,PGRN表达量增加。结论:高浓度L-谷氨酸对HT22细胞具有明显的损伤作用,且呈剂量依赖性,而淫羊藿苷可发挥保护作用,显著提高细胞存活率。淫羊藿苷可能通过调节PGRN的表达从而缓解L-谷氨酸诱导的HT22细胞损伤。     

苦石莲对大鼠非细菌性前列腺炎的影响

目的通过用苦石莲治疗大鼠非细菌性前列腺炎的实验研究,观察具有清热解毒、化湿、散瘀止痛的苦石莲治疗大鼠非细菌性前列腺炎的作用效果。方法将60只Wistar大鼠随机分成正常组,模型组,苦石莲低、中、高剂量组以及前列康组,每组10只。除正常组外,其余各组用消痔灵注射液制备大鼠非细菌性前列腺炎病理模型。苦石莲低、中、高剂量组分别灌胃苦石莲水煎液2 g生药.kg-1,4 g生药.kg-1,8 g生药.kg-1,前列康组灌胃前列康0.3 g.kg-1,正常组和模型组给予等量生理盐水,各组均每日给药1次,连续给药10 d。观察苦石莲对大鼠前列腺液中白细胞数、卵磷脂小体密度、前列腺指数及病理组织检查等指标的影响。结果苦石莲中、高剂量组能降低前列腺炎大鼠前列腺液中白细胞数和前列腺指数,增加卵磷脂小体密度,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。并对前列腺炎模型大鼠病理组织学的改变有明显改善作用。结论苦石莲对大鼠非细菌性前列腺炎有明显的治疗作用。     

双黄连口服液抗炎作用的代谢组学研究

目的运用代谢组学方法研究角叉菜胶致大鼠足肿胀后的变化及双黄连口服液发挥抗炎作用的相关代谢途径。方法大鼠血清和尿液的代谢指纹利用核磁共振氢谱(1H-NMR)进行表征,综合使用多变量统计分析方法如主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和单变量统计分析方法探讨炎症引起相关代谢标志物含有量变化。结果双黄连口服液可以使角叉菜胶致大鼠足肿胀后发生紊乱的机体代谢表型回归到正常水平。在血清和尿液中分别选取了12种和10种生物标志物含有量变化作对比。结论双黄连口服液能有效地缓解角叉菜胶导致的大鼠机体脂质和糖代谢失衡,同时,可以调节肠道菌群。     

基于 GC-TOF/MS 代谢组学技术探讨藿香正气滴丸干预湿困脾胃型大鼠的作用机制

目的 通过基于气相色谱-飞行时间质谱联用 （GC-TOF/MS）技术的代谢组学方法探讨藿香正气滴丸干 预湿困脾胃型大鼠的作用机制。方法 将雄性 SD 大鼠随机分为正常组、模型组和藿香正气滴丸组 （1 g·kg-1 ）。 采用综合物理模型复制方法结合饮食失节制备湿困脾胃大鼠模型。灌胃给药,每日 1 次,连续给药 10 d。观察 大鼠宏观体征和行为学指标 （体质量、体长、尾长、腹围指数与自主活动次数）。利用 GC-TOF/MS 方法对大鼠 血清和尿液代谢组进行分析,鉴定与湿困脾胃相关的潜在生物标志物,分析藿香正气滴丸干预湿困脾胃型大鼠 的代谢通路。结果 与正常组比较,模型组大鼠的体质量、体长、尾长、自主活动次数明显减少 （P＜0.05）, 腹围指数明显升高 （P＜0.05）。与模型组比较,藿香正气滴丸组大鼠的体质量、体长、自主活动次数明显增加 （P＜0.05）,腹围指数明显降低 （P＜0.05）。在大鼠血清、尿液中分别鉴定了 38、44 个与湿困脾胃相关的潜在 生物标志物。藿香正气滴丸对模型大鼠的血清和尿液代谢表型能产生有效的干预,并能使血清、尿液中的 17、13 个潜在生物标志物水平显著回调,共涉及 7 条代谢通路。结论 藿香正气滴丸对湿困脾胃型大鼠的干 预机制可能与调节色氨酸代谢、组氨酸代谢、谷氨酸-谷氨酰胺代谢、能量代谢及肠道菌群等有关。     

降解组测序技术对人参miRNA靶基因的分析鉴定

目的分析鉴定人参miRNA靶基因。方法采用降解组测序技术对石柱参(Shizhu ginseng)、园参(Yuan ginseng)的miRNA及靶基因进行检测;利用公共数据库KEGG/NR/GO数据库对降解组基因进行功能注释;通过荧光实时定量PCR(q RT-PCR)技术验证石柱参、园参的miRNA及靶基因表达量。结果共得到8个miRNA家族的13个靶基因;利用KEGG/NR/GO数据库分析发现该miRNA的靶基因类型主要是转录因子、应答因子及信号转导通路等。对5个差异表达mi RNAs:aqc-miR-159、bdi-miR162、cpa-miR319、pgi-miR4376、smo-mi R396及其靶基因进行的q RT-PCR验证结果与降解组测序结果一致。结论明确了部分人参miRNA的靶基因,为进一步研究人参miRNA的可能功能奠定基础。     

基于1H-NMR代谢组学技术研究火麻仁油干预溃疡性结肠炎的作用

目的:利用经典指标结合核磁共振氢谱(¹H-NMR)代谢组学技术对火麻仁油干预大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用进行研究。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、火麻仁油组和柳氮磺胺吡啶组,通过饮用4%葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)水溶液建立UC模型;进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分和结肠组织病理学检测;采用¹H-NMR代谢组学技术探讨火麻仁油对与UC相关的生物标志物及代谢通路的干预作用。结果:火麻仁油能显著降低DAI评分并改善结肠细胞损伤;火麻仁油对UC大鼠的血清和尿液代谢紊乱产生有效干预,并分别有效回调14种和9种与UC相关的潜在生物标志物。结论:火麻仁油干预大鼠UC的作用机制可能与调节氨基酸代谢、能量代谢、肠道菌群代谢、一碳代谢和嘧啶代谢有关,本研究为火麻仁油治疗UC的进一步药物开发奠定了基础。     

脾气虚证大鼠尿液代谢组学异常及补中益气汤干预作用的研究

目的 运用代谢组学方法研究脾气虚证大鼠尿液的代谢表型变化,筛选出与脾气虚证相关的代谢标志物,并探讨补中益气汤的治疗作用。方法 利用核磁共振氢谱(1H-NMR)技术建立大鼠尿液的代谢指纹谱。应用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究正常对照组与模型组、模型组与补中益气汤组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)在尿液中选取生物标志物。结果 模型组及补中益气汤组的代谢表型发生了明显的变化,并筛选出与脾气虚证相关的9种代谢产物,补中益气汤对部分生物标志物有逆转作用。结论 脾气虚证大鼠的脂质及氨基酸代谢都出现了紊乱,能量代谢降低;经补中益气汤治疗后大鼠蛋白质代谢明显增强,保证了大鼠机体能量的供给。     

HPLC法同时测定双丹颗粒中3种成分的含量

目的:建立同时测定双丹颗粒中丹酚酸B、丹参酮ⅡA、丹皮酚含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Pheonomenex C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-甲酸(甲酸8.3 ml→500 ml)水溶液(30∶7∶63,V/V/V),流速为1.0ml/min,检测波长为286 nm,柱温为30℃。结果:丹酚酸B、丹参酮ⅡA、丹皮酚的进样量分别在0.414⁴.140、0.0644.140、0.064⁰.640、0.2280.640、0.228².280μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 8、0.999 7、0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3%;平均加样回收率分别为97.35%(RSD=1.19%,n=6)、97.56%(RSD=1.86%,n=6)、96.86%(RSD=1.67%,n=6)。结论:该方法简单、可靠、专属性强,可作为双丹颗粒的质量控制方法。     

枸杞对阴虚小鼠的抗疲劳作用

目的:考察枸杞对阴虚小鼠的抗疲劳作用.方法:将小鼠随机分成5组,枸杞低、中、高剂量组每天分别ig给予5,10,20 g·kg-1的枸杞水煎液,空白组和模型组则ig给予等体积的蒸馏水,连续ig 14 d,每天1次.除空白组外,其余4组小鼠于第6天给药1h后,分别经SC氢化可的松100 mg·kg-1,连续注射4d.选用已完善的小鼠游泳计算机自动控制系统,观察枸杞对阴虚小鼠自主活动、运动后血乳酸( LAC)和尿素氮(BUN)的影响及枸杞对小鼠游泳计算机自动管理系统的指标评价体系的改变.结果:10,20 g·kg-1枸杞水煎液能明显增加阴虚小鼠自主活动次数(P＜0.05),降低运动后的LAC,BUN(P ＜0.05),并能延长小鼠负重游泳的下沉时间(ST)和死亡时间(TD)(P＜0.05).结论:枸杞能提高阴虚小鼠的抗疲劳能力,且从行为学上看主要增加游泳后期的耐力.     

基于代谢组学的补中益气汤“益气升阳”配伍机制研究

目的：通过补中益气汤不同配伍组合代谢产物的比较,揭示补中益气汤“益气升阳”的配伍机制。方法：运用核磁共振氢谱（¹H-NMR）技术建立大鼠血清的代谢指纹谱。应用正交偏最小二乘判别分析研究模型组和补中益气汤组、升柴加剂量组、去升麻柴胡组（20 g·kg^-1,ig 15 d）之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影（VIP）在血清中选取生物标志物,比较各组的标志物并找出差别。结果：补中益气汤组对脾气虚证的调节作用体现在对能量代谢方式、糖代谢、脂肪代谢、氨基酸代谢的调节修正上面,而升柴加剂量组、去升麻柴胡组虽然能一定程度的改善模型组大鼠的三大营养物质代谢,但未能从根本上恢复模型大鼠的能量代谢方式,仍然以无氧呼吸为主。结论：补中益气汤组对脾气虚的调整作用最强,主要体现在氨基酸代谢及能量代谢方式的恢复方面。