人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立

目的优化人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质样品制备方法,建立其亚细胞蛋白质组双向电泳技术。方法分步提取人肝癌细胞株QGY-7701细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,采用不同的方法除盐、浓缩样品,然后分别采用2种不同的水化上样缓冲液重悬样品,进行双向凝胶电泳。结果使用三氯乙酸/丙酮的除盐效果好,样品损失少;采用上样缓冲液(7mol/L尿素 2mol/L硫脲 4%CHAPS 40mmol/L Tris 65mmol/L DTT 2%两性电解质)有利于蛋白的溶解,获得更多的蛋白信息,检出的细胞质蛋白点数可达(995±53),细胞膜蛋白点数可达(1035±58),细胞核蛋白点数可达(893±45)。结论获得了清晰的人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳图谱。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV3的抗增殖作用

目的:探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV3的抑制增殖作用及其机制.方法:采用MTT法测定姜黄素在不同浓度、不同时间对SKOV3的抑制增殖效应,流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率,透射电镜观察细胞的超微结构变化,免疫细胞化学法检测凋亡相关基因蛋白的表达.结果:姜黄素可抑制SKOV3细胞的生长,其抑制率与药物浓度和作用时间呈依赖关系,72h的中效浓度(IC50)为79.96μmol/L,流式细胞仪分析证实姜黄素能使SKOV3细胞聚积在G2/M,电镜观察发现姜黄素可诱导细胞凋亡,姜黄素作用72h后,免疫细胞化学表明突变型P53蛋白(MTP53)及Bcl-2表达减弱,Bax及Fas表达增强.结论:姜黄素对SKOV3细胞有抑制增殖作用,通过下调MTP53、Bcl-2的表达及上调Bax、Fas的表达而诱导细胞凋亡.     

MDR1 siRNA对胰腺癌细胞株BxPC-3耐药性影响的实验研究

目的：观察阻断多药耐药基因1（MDR1）表达后胰腺癌细胞对化疗药物敏感性的变化,探索提高胰腺癌化疗疗效的新方法。方法：采用RNA干扰技术．构建MDR1 siRNA重组质粒．脂质体介导转染人胰腺癌细胞株BxPC-3,并筛选稳定转染细胞克隆,RT-PCR和Western印迹法检测MDR1 mRNA和蛋白的表达变化。将细胞接种于裸鼠,观察移植瘤对化疗药物吉西他滨敏感性的变化。结果：转染MDR1 siRNA质粒后胰腺癌细胞株BxPC-3 MDR1 mRNA与蛋白表达水平明显降低。体内实验结果显示,将转染前后的细胞接种于裸鼠,转染组移植瘤对化疗药物吉西他滨更为敏感（P〈0．05）。结论：通过RNA干扰技术,可在转录和翻译水平降低MDR1在胰腺癌细胞株BxPC-3中的表达,并能提高细胞对化疗药物的敏感性。     

1例原发性胼胝体变性

一、病例简介： 患者,男性68岁,退休会计。主因“记忆力、计算力下降一年”于2009年6月16日入院。     

原发性胰腺淋巴瘤1例

1临床资料患者女,47岁,因皮肤黄染2周,瘙痒5天入院。查体见全身皮肤黄染,巩膜黄染,余未见阳性体征。实验室检查血生化:总胆红素31.31μmol/L(正常参考值1.7～21.3μmol/L),直接胆红素13.98μmol/L(正常参考值0～6.80μmol/L),间接胆红素17.33μmol/L(正常参考值0～13.6μmol/L)。血细胞计数正常。彩色多谱勒超声显示肝脏内多发异常回声团块,肝内外胆管扩张,胆总管末端与胰头部见一4.8cm×4.4cm低回声团块,有分隔,伴有条状血管信号影,考虑胆总管末端与胰头部实性占位。多层螺旋CT平扫显示肝左、右叶多发低密度区,胆总管至肝内胆管扩张,其…     

认知控制的功能磁共振成像研究

认知控制指的是通过适应性整合信息的变化使对正在变化的或者新颖的任务要求作出灵活反应的一系列过程。对认知控制的研究一直是认知科学的重要内容。最常用的经典范式是Stroop任务和侧抑制（flanker）任务，以Stroop任务应用更久远、更广泛。利用Stroop效应研究认知控制可通过多种模式进行，如事件相关诱发电位、正电子发射体层摄影及功能磁共振成像（fMRI）。由于fMRI技术能无创伤性地对神经元活动进行较准确的定位，有较高的空间和时间分辨力，较好的可重复性，已成为神经科学领域内一种全新的研究手段。近年来使用这一技术进行了大量研究，其中利用经典的Stroop任务进行的fMRI成为研究人脑在认知控制中的冲突解决以及错误检测等方面一个主要的试验范式，提出并不断修订了对认知科学的理解心。本文回顾认知控制研究的主要任务及其神经机制、fMRI的一般原则及相关临床应用。     

EDA-A1基因突变体对人脐静脉内皮细胞 ECV304增殖及细胞周期的影响

目的：研究少汗型外胚层发育不良症 EDA‐A1基因突变体对人脐静脉内皮细胞（ECV ）周期和增殖活性的影响。方法构建 EDA‐A1基因编码序列（CDS）突变体和野生型的真核表达载体 pcDNA3．1（‐）‐EDA‐A1‐M /W ,转染人脐静脉内皮细胞,逆转录 PCR（RT‐PCR）扩增 EDA‐A1基因,蛋白免疫印迹法（Western blot）法检测 EDA‐A1蛋白表达,M TT 法、流式细胞术检测EDA‐A1基因突变体对 ECV 细胞增殖和细胞周期的影响。结果 RT‐PCR 、Western blot 结果显示,野生型组和突变体组 ECV细胞表达 EDA‐A1基因及其蛋白,而空质粒转染组[pcDNA3．1（‐）]和空白对照组细胞无表达。与对照组（空质粒租）相比,突变体组 ECV 细胞增殖活性下降,生长抑制率为45．70％（P＜0．01）,野生型细胞增殖活性无明显改变（P＞0．05）。突变体组中有更多细胞进入 G0/G1期、S 期;野生型组 S 期细胞增多,G2/M 期细胞明显减少（P＜0．05）。结论突变体和野生型 EDA‐A1基因对 ECV 细胞增殖和细胞周期有不同的生物学功能。     

胰腺巨大囊性实质性肿瘤的诊断和治疗

目的 探讨胰腺巨大囊性实质性肿瘤术前有效的诊断和外科治疗方法。方法 回顾性总结分析巨大胰腺囊性实质性肿瘤（直径〉8cm）的术前诊断方法和手术治疗结果。结果 复旦大学华山医院外科自1999年至今收治15例直径〉8cm的胰腺囊性实质性肿瘤，均行根治性手术切除。病理诊断：实性假乳头状瘤9例，囊腺瘤4例，囊腺癌2例。结论 胰腺巨大囊性实质性肿瘤的诊治较为困难，螺旋CT、DSA结合肿瘤标记物检测有助于肿瘤的诊断和可切除性判断，手术切除仍是目前主要的治疗手段。     

血清癌抗原19-9水平对胰腺癌可切除性判断的临床意义

目的 探讨血清癌抗原19-9 (CA19-9)水平在胰腺癌可切除性判断中的应用价值.方法 采用放射免疫法检测胰腺癌患者血清CA19-9的表达,通过接受者操作特征(ROC)曲线分析确定最佳分界点,通过ROC曲线下面积分析血清CA19-9水平对胰腺癌可切除性判断的临床应用价值.结果 可切除性胰腺癌患者CA19-9的水平为(313.6±515.5)kU/L,明显低于不可切除患者的(852.1±865.1)kU/L(P=0.00).根据接受者操作特性曲线,血清CA19-9对胰腺癌可切除性判断的最佳分界点为312.1 kU/L,其灵敏度为56.6％,特异度为73.3％,ROC曲线下面积0.67.结论 血清CA19-9水平可作为辅助性手段应用于胰腺癌可切除性的判断.     

胆道支架置入联合介入化疗治疗恶性胆道梗阻的临床疗效分析

目的探讨胆道支架置入联合介入化疗技术治疗恶性胆道梗阻的临床疗效和价值。方法对比分析胆道支架置入联合介入化疗组(C组)、单纯胆道支架置入组(B组)及保守治疗组(A组)患者间的术前、术后肝功能改变,并发症发生率,支架通畅率及远期生存时间。结果共纳入病例58例,同A组相比,B、C组肝功能得到明显改善,差异有统计学意义(P0.05);B、C两组与操作有关的并发症发生率为19.1%(9/47),均经保守治疗后恢复,无严重并发症发生;B组术后第3、6、12月时支架通畅率分别为77.8%(14/18)、38.9%(7/18)、11.1%(2/18);C组术后第3、6、12月支架通畅率分别为85%(17/20)、55%(11/20)、30%(6/20);A组、B组及C组的中位生存期分别为2.4、8.2及12.9个月。结论胆道支架置入联合介入化疗技术治疗恶性胆道梗阻切实可行,安全有效,能显著改善肝功能,延长支架通畅时间,延长患者远期生存时间。