福辛普利和氯沙坦对SHR血管紧张素Ⅱ受体1基因表达的影响

目的研究福辛普利和氯沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)血管紧张素Ⅱ受体1(AT1-R)的基因表达水平及心血管细胞增殖的影响,探讨高血压病的病理机制.方法 48只10周龄SHR随机分3组,1组服福辛普利5 mg*kg-1*d-1;2组服氯沙坦20 mg*kg-1*d-1;3组(对照组) 服安慰剂.3组分别灌胃持续9 周,实验前及实验中每2周测尾动脉血压,9周后,抽血并处死动物取材,放免法测血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ),用半定量RT-PCR 测量心肌AT1-R的 mRNA水平,光、电镜观察心肌及主动脉组织学改变. 结果血压对照组随增龄上升,两治疗组实验第2周起各次均较治疗前低,差异多具显著性,实验第8周福辛普利组为(165.1±4.9)mmHg、氯沙坦组为(156.3±4.2)mmHg,均较对照组(179.1±10.4)mmHg低,差异显著,P<0.01.血浆Ang Ⅱ浓度对照组为(440.0±190.3)pg/mL,福辛普利组为(566.0±149.3)pg/mL和氯沙坦组(529.3±200.9)pg/mL均较对照组高,但均无显著性差异,P>0.05.心肌AT1-R的mRNA水平福辛普利组为(72.0±35.0)%,对照组为(102.4±21.9)%,显著高于前者,P<0.05;氯沙坦组为(101.9±27.3)%,与对照组差异无显著性,P>0.05,但较福辛普利组高,差异显著,P<0.05;AT1-R的mRNA水平与治疗后血压不相关,与对照组Ang Ⅱ浓度正相关,r=0.596,P<0.05,而与两治疗组无相关性;心血管病变光、电镜下两治疗组心血管细胞增殖明显减轻,氯沙坦组减轻更显著. 结论福辛普利可下调SHR心肌AT1-R基因表达水平,氯沙坦则对其无影响;福辛普利和氯沙坦均可抑制SHR心血管细胞增殖,但不伴有Ang Ⅱ浓度的显著性改变.     

新诊断2型糖尿病患者二甲双胍治疗后外周血单个核细胞核因子κB活性的变化

背景：IKK／核因子κB通路是巨噬细胞分泌炎症因子的关键调节通路,可启动、放大炎症反应,二甲双胍可能有潜在的抗炎作用。目的：探讨二甲双胍对新诊断2型糖尿病患者外周血单个核细胞核因子κB活性及血清炎症指标的影响。设计：自身前后对照。对象：2004—10/2006-06中山大学附属第二医院内分泌科住院和门诊收治的新诊断2型糖尿病患者29例。二甲双胍为中美上海施贵宝公司产品。方法：29例患者经筛选进入实验后,给予二甲双胍治疗,由1．0g／d开始,最大剂量2．0g／d。每2周随访1次,根据血糖水平调整药物剂量,血糖控制目标为空腹血糖〈6．1mmol/L,餐后2h血糖〈8mmol／L。分别于治疗前及血糖达良好控制0,2,12周时进行各项指标检查。主要观察指标：Westernblot法检测外周血单个核细胞磷酸化核因子KBp65（Ser5.36）水平,高敏ELISA法检测血清炎症指标的变化。结果：与治疗前比较,血糖达标2周时外周血单个核细胞中磷酸化核因子κBp65（Ser5.36）水平明显降低（P〈0．05）,至血糖达标12周时降低程度更为显著（P〈0．01）。与治疗前比较,血糖达标时（0周）及达标后2周,12周,各项炎症指标水平均明显降低（P〈0．05或0．01）,其中血糖达标12周时超敏C反应蛋白降低56％,白细胞介素6降低30％,肿瘤坏死因子α降低24％。结论：二甲双胍可抑制新诊断2型糖尿病患者外周血单个核细胞中磷酸化核因子κB活性,显著改善患者炎症状态。     

HLA-DR2与中国人1型糖尿病相关性的探讨

目的 研究HLA－DR2与中国人Ⅰ型糖尿病的相关性。方法 应用序列特异引物PCR（PCR－SSP）技术检测华南地区汉族64例1型糖尿病（1型DM）患者（包括15岁前起病组17例，15－30岁起病组30例以及30岁后起病组17例）和72例健康对照者的HLA－DR2等位基因。结果 1型DM组和对照组HLA－DR2等位基因频率分别为31．3％和36．6％，差异无显著性（P＞0．05）。15岁前起病组、15－30岁起病组和30岁后起病组中HLA－DR2频率分别为17．6％、30．0％和47．1％，各组间比较及分别与对照组比较差异均无显著性，但15岁前起病组与30岁后起病组比较P＝0．058。HLA－DR2 1型DM组与非HLA－DR2 1型DM组比较DK及／或DKA发生率较低（55％及84％，RR＝0．65）。对包括本组的5份华人资料的联合分析显示HLA－DR2与IDDM呈弱负相关（P＜0．025，RR＝0．65）。结论 HLA－DR2与中国人1型DM发病的关系仍有待大样本研究的证实，尤应增加儿童起病1型糖尿病的研究。HLA－DR2与1型糖尿病患者DK及／或DKA发生的关系亦有待阐明。     

大鼠全长OBRb cDNA克隆及真核表达重组体的构建

目的克隆SD大鼠全长长胞内段瘦素受体基因cDNA(OBRb cDNA)及构建其真核表达重组体,为进一步研究该基因打下基础.方法应用RT-PCR方法分段扩增全长OBRb cDNA,再将它们连接起来,并获得载有全长OBRb cDNA的阳性克隆质粒.将上述质粒中全长OBRb cDNA定向插入真核表达质粒pcDNA3中,筛选出阳性克隆.通过限制性内切酶酶切和核苷酸序列测定进行鉴定.结果重组的克隆质粒和真核表达质粒经限制性内切酶酶切后获得的片段大小均与理论值一致.结论成功地克隆了SD大鼠全长OBRb cDNA,并构建了真核表达重组体.     

分析输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管结石影响因素的评价性研究

目的对输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管结石影响因素进行分析。方法选取2011年10月至2012年10月在我院进行输尿管结石患者102例,随机分为两组患者,甲组患者50例,采用常规开放手术取出结石治疗;乙组患者52例,采用经输尿管镜钬激光碎石术进行碎石治疗;对比两组患者的手术操作时间、住院治疗时间、结石排净时间等情况。结果乙组患者的手术操作时间、住院治疗时间等显著优越于甲组患者,差异性显著,具有统计学意义(P<0.05)。乙组患者手术成功率、结石排净时间、术后合并症对比甲组患者,无显著性差异,无统计学意义(P>0.05)。乙组患者手术失败患者的主要原因为:结石体积较大、输尿管狭窄或者畸形病变等。结论输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管结石具有手术操作时间短,能有效的缩短住院治疗时间、结石排净时间,虽术后合并发生一定的临床不良反应,但手术成功率相对较高,影响手术失败的因素为结石体积较大、输尿管狭窄或是畸形病变等,在临床治疗中具有较高的临床意义。     

华南地区汉族胰岛素依赖型糖尿病易感性与HLA-DR_9相关性的初步探讨

应用套式PCR检测华南地区汉族64例Ⅰ型糖尿病病人（IDDM）（包括15岁前起病组17例，15～30岁起病组30例和30岁后起病组17例）和72例健康对照者的HLA－DR9等位基因。结果：IDDM组和对照组HLA－DR9等位基因频率分别为46.9％和33．3％，无显著性差异（P＞0．05）。15岁前起病组、15～30岁起病组和30岁后起病组中HLA－DR9频率分别为58．8％、46．7％和35．3％，各组间比较P均＞0．05，15岁前起病组与对照组比较，P=0．0517。结论：本组结果未发现HLA－DR9与华南地区汉族IDDM明显相关，有待增加样本数作进一步研究。     

脊柱结核手术治疗并发症及相关危险因素的探讨

[目的]探讨手术治疗脊柱结核并发症的发生及其危险因素。[方法]回顾性分析本院脊柱外科2004年1月²011年1月行手术治疗且获得2年及以上随访者491例,男268例,女223例;平均年龄(32.33±9.91)岁。256例行一期或分期前路病灶清除、植骨、后路内固定术治疗,188例行单纯后路病灶清除、植骨、内固定术,47例行前路病灶清除、植骨、内固定术。术后继续抗痨122011年1月行手术治疗且获得2年及以上随访者491例,男268例,女223例;平均年龄(32.33±9.91)岁。256例行一期或分期前路病灶清除、植骨、后路内固定术治疗,188例行单纯后路病灶清除、植骨、内固定术,47例行前路病灶清除、植骨、内固定术。术后继续抗痨12¹8个月,并定期复查。所有病例按术式分组,即前后组256例、后路组188例、前路组47例,后路组根据适应证选择是否得当又分为两组,即恰当组176例和不当组12例。记录住院期间至随访结束所有病例出现并发症的情况,Logistic回归分析脊柱结核手术并发症可能危险因素。[结果]随访218个月,并定期复查。所有病例按术式分组,即前后组256例、后路组188例、前路组47例,后路组根据适应证选择是否得当又分为两组,即恰当组176例和不当组12例。记录住院期间至随访结束所有病例出现并发症的情况,Logistic回归分析脊柱结核手术并发症可能危险因素。[结果]随访2⁵年,平均(29.4±4.8)个月。共出现并发症55例,前后组出现33例,发生率12.9%;后路组出现17例,发生率9.0%,其中适应证得当组出现10例,发生率5.7%,适应证不当组出现7例,发生率58.3%;前路组出现5例,发生率10.6%。后路组中适应证得当组与适应证不当组并发症发生率比较有统计学差异(x2=37.864,P<0.05),适应证得当组并发症发生率低于适应证不当组。脊柱结核手术并发症可能危险因素行单因素分析筛选出11个变量与手术治疗脊柱结核并发症有关联;多因素Logistic回归分析示:是否规范化疗(OR=5.784)、是否严格制动(OR=3.026)、是否严格把握各术式适应证(OR=2.190)、营养状况(OR=5.493)、病灶范围广(OR=4.631)与脊柱结核手术并发症发生的显著性相关(P<0.05)。[结论](1)化疗不规范、制动不严格、未严格把握各术式适应证及病人营养不良、病灶范围广与脊柱结核手术并发症的发生密切相关;(2)单纯后路病灶清除、植骨、内固定术出现并发症的主要原因是适应证掌握不当导致病灶清除不彻底,并非术式本身;(3)对于单节段胸、腰椎结核且椎旁脓肿局限者,单纯后路病灶清除、植骨、内固定术的并发症少见,而且创伤小。     

川芎嗪对肝星状细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究川芎嗪对大鼠肝星状细胞(HSC)凋亡的影响及可能机制,为肝纤维化的治疗提供新的方法.方法 以血小板衍生生长因子(PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞系HSC-T6,建立体外肝纤维化细胞模型,在此基础上,给予川芎嗪30μmol/L刺激HSC-T6,作用24 h后,Western blot法检测相关蛋白的表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Hoechst 33258染色法观察各组HSC的凋亡形态.结果 Western blot法结果表明,与PDGF组比较,川芎嗪组ERS标志性蛋白GRP78表达增多,并且ERS特异性凋亡蛋白CHOP及C-Caspase12表达增强,Bcl-2/Bax比例明显下调,p-ERK/ERK水平降低.流式细胞仪检测结果表明川芎嗪组较PDGF组HSC凋亡率增强,同时Hoechst 33258染色结果表明川芎嗪组HSC呈现典型的核固缩等凋亡形态变化.结论 川芎嗪可以诱导PDGF活化的HSC发生凋亡,其可能与ERS特异性凋亡蛋白CHOP及C-Caspase12的表达上调、ERK1/2磷酸化水平降低,进而下调Bcl-2/Bax比例,发生相关凋亡.     

超高效液相色谱-质谱联用测定人血浆二甲双胍浓度

目的建立测定人体内二甲双胍血浆中药物浓度的超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS)。方法液相分离条件X-Bridge HILIC色谱柱(2.1 mm×50.0 mm,3.5μm);流动相:乙腈-20 mmol乙酸铵(含1.8%甲酸)比例93-7,流速为1.35 mL/min,柱温为25℃。ESI+(M/z=130.2→70.7),毛细管电压3.5 kV;雾化气流量45 psi;辅助气化气流量12 L/min;离子源温度350℃,碰撞电压70 V。结果二甲双胍在3.05~3.12ng/mL(r2=0.999)范围线性关系良好,最低定量限为3.05 ng/mL,二甲双胍出峰时间为1.055 min,日内和日间RSD均小于10%。结论此方法能够简便、高效、快速和灵敏的检测健康志愿者血浆中二甲双胍,可用于二甲双胍药物代谢动力学研究。     

CT引导下经皮穿刺置管灌洗治疗小儿腰骶段结核

目的:评价CT引导下经皮穿刺置管(percutaneous catheter drainage,PCD)灌洗治疗儿童腰骶段脊柱结核的疗效.方法:2006年1月～2011年2月我科采用CT引导下PCD灌洗治疗9例腰骶段脊柱结核患儿,其中男6例,女3例,年龄2岁2个月～7岁,平均5.4岁.术前血沉25～57mm/h,平均39mm/h,C反应蛋白22.9～40mg/L,平均29mg/L.术前4例有神经功能障碍,Frankel分级D级3例,C级1例.所有患儿在全身抗结核药物治疗的同时,在CT引导下经皮穿刺置管、异烟肼溶液灌洗病灶,同时行TLSO支具外固定保护.结果:9例患者全身抗结核药物治疗9～12个月,病灶局部灌洗10～12周,TLSO支具外固定6～18个月.随访12～36个月,平均24个月,术后1～3个月ESR、CRP恢复到正常.8例治愈,1例因过早停用抗结核药物致病灶复发,改行开放手术治疗.置管处均无窦道形成,3例Frankel D级患者恢复到E级,1例C级恢复到D级.末次随访时患者临床症状完全消失,影像学检查示结核病灶均愈合,无复发病例.结论:在全身抗结核药物治疗和术后TLSO支具外固定保护下,CT引导下PCD灌洗治疗儿童腰骶段脊柱结核是一种微创、简单、安全、有效的方法.