清咽排毒颗粒的药效学研究

目的研究清咽排毒颗粒在解热、镇痛、抗炎、止咳、祛痰、体外抗菌、体外抗病毒等方面的作用,为其临床用于风热型急性咽炎提供了实验依据。方法选用2,4-二硝基苯酚致大鼠发热法、热板法、二甲苯所致小鼠耳廓肿胀法、氨水引咳法、小鼠酚红排泄法、最低抑菌浓度法和鸡胚内抗病毒法。结果清咽排毒颗粒对2,4-二硝基苯酚所致大鼠发热有显著的解热作用;对热板法引起的疼痛具有明显的镇痛作用;对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用;能明显抑制氨水引起的小鼠咳嗽,促进小鼠气管酚红排泄;对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、甲型流感病毒H1N1有一定抑制作用。结论清咽排毒颗粒具有解热、镇痛、抗炎、止咳、祛痰、体外抗菌、体外抗病毒等方面的作用。     

调经止血颗粒的质量标准研究

目的研究复方制剂调经止血颗粒的质量标准.方法采用TLC法对黄芪、白芍、墨旱莲、补骨脂进行了定性鉴别;采用HPLC法对方中芍药的有效成分芍药苷进行了含量测定.结果TLC可鉴别出与黄芪、白芍、墨旱莲、补骨脂对应的斑点;高效液相色谱法测定芍药苷含量,在0.0968～0.4838μg范围内线性良好(r=0.9999),加样回收率为99.71%,RSD=1.33%.结论所建立的质量标准简便可行、重复性好,可以用来评价调经止血颗粒的质量.     

基于UPLC-MS对牛黄解毒片中胆酸类成分定量测定及化学模式识别研究

目的 建立超高效液相色谱串联四级杆-静电轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS/MS)同时测定牛黄解毒片(Niuhuang Jiedu Tablets,NJT)中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、7-酮基胆石酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、12-酮脱氧胆酸、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸21种胆酸类成分含量的方法,并对不同批次的NJT进行质量评价。方法 采用Thermo Bremen Hypersil Gold色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以含0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min,柱温为40℃;质谱采用加热型电喷雾离子源(HESI),在负离子平行反应监测模式下进行含量测定,采用SIGMA 14.0软件对定量结果进行化学计量学分析。结果 21种胆酸成分在线性范围内呈良好的线性关系(r2≥0.998 9)...     

八宝丹通过抑制NLRP3/Caspase-1通路减轻对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤

目的：研究八宝丹(BBD)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的急性肝损伤小鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3/胱天蛋白酶-1(NLRP3/Caspase-1)通路蛋白的影响。方法：将C57BL/6小鼠随机分组,BBD(75、150、300 mg·kg^-1)灌胃给药3 d,2次/d,于末次给药后2 h,腹腔注射APAP(400 mg·kg^-1),14 h后摘眼球取血,随后脱颈椎处死取材。苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织细胞形态学变化;生化法检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠肝脏中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肝脏中环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、NLRP3、Caspase-1、白细胞介素-18(IL-18)的...     

泽泻滴丸的质量控制标准

目的建立泽泻滴丸的质量标准。方法用薄层色谱法对泽泻滴丸进行定性鉴别,用紫外-可见分光光度法测定泽泻滴丸总三萜含量,用高效液相色谱法,Ultimate XB-C18色谱柱:4.6mm×150mm,5μm;流动相:乙腈-水（65∶35）;流速:1mL/min;检测波长:208nm,测定23-乙酰泽泻醇B的含量。结果薄层色谱图中可以检出泽泻的特征斑点,UV-Vis法含量测定,香草醛-高氯酸显色,总三萜以23-乙酰泽泻醇B计,浓度在5.9715.92μg/mL与吸光度值呈良好线性关系,平均加样回收率97.08%,RSD 3.75%,HPLC法测定23-乙酰泽泻醇B的浓度在9.8859.28μg/mL,与峰面积呈良好线性关系、平均加样回收率98.04%,RSD 2.20%。结论薄层色谱法、UV-Vis法、HPLC法简便,准确,专属性强,重复性好,可有效控制泽泻滴丸的质量。     

建泽泻与川泽泻转录组测序及泽泻三萜生物合成分析

目的 利用高通量测序技术获得建泽泻与川泽泻的转录组特征信息,并进行泽泻三萜类成分合成生物信息学分析。方法 通过Illumina HiSeqTM2500对建泽泻与川泽泻进行转录组测序,采用Trinity软件组装获得Unigene,与SwissProt、Pfam、SignalP、TMHMM、GO、COG和KEGG数据库比对,对Unigene进行功能注释和生物信息学分析,得到建泽泻与川泽泻转录组数据。结果 测序组装后,Unigene与7个数据库比对,获得建泽泻、川泽泻分别注释53 566条、49 448条Unigene。其中,在GO数据库中注释泽泻生物过程、细胞组分和分子功能3大类,其包含30个亚类;在COG数据库中注释泽泻24个功能类别;KEGG注释结果表明泽泻三萜类化合物生物合成途径为乙酰辅酶A在羟甲基戊二酰辅酶A合酶、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、甲羟戊酸激酶、甲羟戊酸磷酸激酶、焦磷酸甲羟戊脱羧酶催化下反应生成焦磷酸法尼酯,其次焦磷酸法尼酯在法尼基焦磷酸合酶催化下生成前喹啉,再经角鲨烯合酶生成角鲨烯,最后在角鲨烯环氧酶催化下生成骨架类型为原萜烷型的泽泻三萜。利用MISA软件对建泽泻与川泽泻...     

HPLC测定冠心七味片中丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、和对甲氧基桂皮酸乙酯的含量

目的:建立复方制剂冠心七味片(丹参,山奈,降香,檀香等)中多种有效成分的高效液相色谱测定方法。方法:采用Krom asil C18(5μm,250 mm×4.60 mm)色谱柱;以甲醇-0.2%醋酸溶液为流动相,流速为1 mL/m in,检测波长为270mm。结果:甲氧基桂皮酸乙酯、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA的线性范围分别为0.120~0.840μg(r=0.999 95),0.015~0.105(r=1.000 00),0.007~0.049(r=0.999 90),0.022~0.154(r=0.999 95);平均加样回收率(n=6)分别为98.293%,97.561%,98.226%,96.302%,RSD分别为1.10%,1.84%,1.29%,1.10%。结论:本测定方法简便可行、重复性好,可用于本制剂中各有效成分的含量测定。     

冠心七味片鉴别方法研究

目的：考察三大色谱法鉴别冠心七味片的各味药材。方法：采用TLC、GC、HPLC心七味片方中药材进行鉴别。结果：制剂中丹参、降香、广枣、山奈可采用TLC鉴别，丹参、降香、肉豆蔻、山奈可采用HPLC鉴别，含挥发性成分的檀香、肉豆蔻、山奈可采用GC鉴别。结论：三大色谱共检出方中七味药材中的六味，三大色谱结果相互比较和验证，可以使所获得的信息更趋全面。     

巴戟天经不同比例甘草炮制后对腺嘌呤致肾阳虚模型大鼠肾功能和HPG轴改善作用的比较

目的 通过比较巴戟天生品及不同比例甘草炮制品对腺嘌呤致肾阳虚模型大鼠肾功能和下丘脑-垂体-性腺轴（HPG轴）的改善作用，以及对大鼠组织中Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）和转化生长因子-β₁（TGF-β₁）/Smad信号通路蛋白表达的调节作用，分析不同比例甘草炮制（甘草与巴戟天质量比分别为0∶100、3∶100、6∶100、12∶100、24∶100，以下分别简称无甘草炮制品和100∶3、100∶6、100∶12、100∶24炮制品）对巴戟天补肾助阳功效的影响，阐释制巴戟天的炮制内涵。方法 巴戟天炮制品按2020年版《中华人民共和国药典》收载的制巴戟天方法进行制备。采用腺嘌呤灌胃给药复制肾阳虚大鼠模型，利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E₂）、睾酮（T）水平，分光光度法测定尿素氮（BUN）和肌酐（SCr）水平，苏木素-伊红（HE）染色法评价组织病理形态变化，免疫组织化学法分析E-钙黏蛋白（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Wnt2b、β-catenin、Smad1和Smad4蛋白的表达。结果 100∶6、100∶12炮制品对体态的改善较好，100∶12炮制品降低血清中BUN、SCr、FSH和LH水平及调整E₂/T比值的作用最优，100∶6、100∶12炮制品调节E-cadherin、α-SMA、Wnt2b、β-catenin、Smad1和Smad4蛋白表达的作用较佳。结论 巴戟天经100∶6、100∶12比例甘草炮制后对腺嘌呤致肾阳虚模型大鼠肾功能和HPG轴有较好的改善作用，这与其能更好地调节大鼠肾脏和睾丸组织中Wnt/β-catenin通路及睾丸组织中TGF-β₁/Smads通路密切相关。     

泽泻水提物的化学成分研究

目的 研究泽泻水提物中的化学成分,并筛选激活核因子E2相关因子2(Nrf2)的活性成分。方法 综合应用多种色谱技术分离纯化泽泻水提物,采用凝胶色谱或制备液相色谱法,获得单体,通过¹H-NMR、¹³C-NMR、MS等波谱技术进行结构鉴定,采用荧光素酶报告基因法筛选泽泻水提物中激活Nrf2的活性成分。结果 从泽泻水提物中分离鉴定15个化合物,分别为β-D-呋喃果糖（1）,β-D-乙基呋喃果糖苷（2）,5-羟甲基糠醛（3）,蔗糖（4）,棉子糖（5）,水苏糖（6）,毛蕊花糖（7）和甘露三糖（8）以及环氧泽泻烯（9）,泽泻烯醇（10）,泽泻醇C（11）,泽泻醇L（12）,16-羰基泽泻醇A（13）,16-羰基-24-乙酰泽泻醇A（14）,16-羰基-11-去氧泽泻醇A（15）,其中化合物11至化合物15具有激活Nrf2的活性。结论 从泽泻水提物中共分离15个成分,包括8个糖类（化合物1至8）,2个倍半萜类（化合物9和10）和5个16位羰基取代的三萜类（化合物11至15）,化合物2、3、5、6、7、8为首次从泽泻水提物中分离,15个化合物经活性评价,5个三萜类成分具有激活Nrf2的作用,16-羰基取代的泽泻三萜可能是泽泻激活Nrf2信号系统的药效物质基础之一。