不同比例甘草炮制吴茱萸毒性剂量下对小鼠肝脏氧化应激及自噬影响的比较

目的 通过比较吴茱萸生品及不同比例甘草炮制品在毒性剂量对小鼠肝脏氧化应激和自噬的影响,探讨甘草炮制吴茱萸的原理及科学内涵。方法 70只小鼠随机分为空白组、吴茱萸生品组、无甘草炮制品组及甘草炮制品组（吴茱萸与甘草质量比分别为100∶3、100∶6、100∶12、100∶24）,依次按30 g·kg^-1灌胃给予纯净水、吴茱萸生品及相应炮制品水煎液。利用紫外-可见分光光度法测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平;苏木素-伊红（HE）染色法评价肝组织病理形态变化;荧光法检测肝组织中活性氧（ROS）水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测血红素加氧酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO1）、谷胱甘肽巯基转移酶1（GSTA1）,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）和p62的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、磷酸化核糖体p70 S6蛋白激酶（p-p70S6K）、p62、微管相关蛋白1轻链3（LC3）Ⅰ和LC3Ⅱ的蛋白表达水平。结果 与空白组比较,吴茱萸生品组给药7 d后小鼠体质量的增加开始减缓,差异逐渐增大,肝体指数显著升高（P<0.01）;病理形态学观察显示肝小叶结构紊乱,局部肝窦狭窄或消失,存在炎性细胞浸润,局部出血等现象,血清中ALT、AST及肝组织中ROS水平均显著升高（P<0.01）,肝组织中Keap1、HO-1、NQO1、GSTA1、p62 mRNA及p-mTOR、p-p70S6K、p62蛋白表达显著下降（P<0.01）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著上升（P<0.01）。与生品组比较,所有炮制品组小鼠体质量升高,肝体指数、血清中ALT和AST、肝组织中ROS水平均有所下降,其中仅甘草炮制品组（100∶6）的肝小叶结构完整,肝窦大小趋近于空白组;各炮制品组肝组织中Keap1、HO-1、NQO1、GSTA1和p62 mRNA的表达整体呈上升趋势,其中仅甘草炮制品组（100∶6）各指标均有明显上升（P<0.05,P<0.01）;各炮制品组p-mTOR、p-p70S6K、p62蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均有所回调,其中甘草炮制品组（100∶6）p-mTOR、p-p70S6K的蛋白表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,以及甘草炮制品组（100∶24）p62蛋白表达回调幅度最大,除p-mTOR外差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 吴茱萸造成肝损伤与其能够诱发氧化应激,进而产生病理性自噬,造成肝细胞损伤密切相关,不同比例甘草炮制后可相应减弱该作用,尤以100∶6比例甘草炮制效果最优。     

基于GC-TOF-MS代谢组学研究栝楼桂枝汤对脑缺血大鼠的作用机制

目的 研究栝楼桂枝汤对脑缺血MCAO模型大鼠的神经保护作用机制。方法 运用气相色谱-飞行时间质谱联用的代谢组学技术及多元统计分析方法分析正常组、模型组和栝楼桂枝汤给药组大鼠血清中内源性代谢物的变化,筛选差异代谢物,并分析差异代谢物代谢途径。结果 代谢组学研究结果显示各组间大鼠代谢谱出现显著差异,在大鼠血清质谱图中共筛选鉴定得吲哚乙酸、丙二酸、乙醇胺、肉豆蔻酸、鸟氨酸等13个差异代谢物,涉及的相关的代谢途径包括糖-葡萄糖醛酸相互转化途径,色氨酸代谢途径,嘧啶代谢和甘油磷脂代谢途径。结论 栝楼桂枝汤可使造模后大鼠的体内代谢物有不同程度的恢复,其对缺血性脑卒中的保护作用主要反映在能量代谢、脂质代谢、氨基酸代谢等代谢途径的变化,改善大鼠脑缺血再灌注损伤症状。     

UHILIC-MS/MS法同时测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素的含量

目的 建立一种超高效亲水作用色谱串联三重四极杆质谱法（UHILIC-MS/MS）,同时测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、烟酰胺和泛酸钙的含量。方法 采用超高效液相色谱仪,Waters ACQUITY BEHHILIC Amide色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,以90%乙腈（含0.5%甲酸）-10 mmol/L甲酸铵水（含0.5%甲酸）为流动相,进行梯度洗脱,流速0.30 ml/min;在电喷雾（ESI）正离子模式下,用多反应监测（MRM）模式进行含量测定。结果 在5 min内,样品中5种维生素分别在各自考察的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数（r）均大于0.998 4;整体加样回收率在93.27%~100.39%之间,RSD为1.41%~4.96%;10批样品中维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、烟酰胺、泛酸钙的含量测定结果分别为32.40~38.91、7.002~8.462、9.677~11.17、33.64~39.58、3.276~3.771 mg/250 g。结论 本研究建立的UHILIC-MS/MS方法可快速实现对复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素类成分定性鉴定或定量检测,为复方三维右旋泛酸钙糖浆的开发利用和质量评价提供了可靠的技术检测方法。     

红豆属植物化学成分及其药理活性研究进展

豆科红豆属Ormosia Jacks.植物共有135种,中国有35种,2变种,2变型,主要分布于福建、广东、广西、云南等地,具有较高的药用价值。目前,红豆属植物中已发现的化学成分主要有生物碱类、黄酮类、三萜类及其他类型化合物,具有良好的抗氧化、抗癌、杀虫、抑菌等药理活性。对红豆属植物的化学成分及药理活性进行综述,为进一步开发该属药用植物资源和有效物质基础提供理论依据。     

马齿苋治疗蜂毒过敏反应的实验研究

目的 以蜂针针刺动物足部使出现红肿热痛等局部过敏反应症状,建立峰针疗法所致局部过敏反应的动物模型,比较马齿苋不同给药方式对蜂毒过敏动物的抗炎作用、镇痛作用及解热作用大小,为马齿苋临床上用于治疗蜂针疗法引起的过敏反应提供依据.方法 以抗炎试验、镇痛试验、解热试验为主要试验方法,考察马齿苋水煎液口服给药、泡洗给药、口服兼泡洗给药对蜂毒引起的动物过敏反应的治疗作用.结果 与模型对照组比较,给药组、泡洗给药组及口服兼泡洗给药组对蜂针引起局部过敏反应均有显著抑制作用(P＜0.05或P＜0.01);与口服给药组、泡洗给药组比较,口服兼泡洗给药组抑制作用最强(P＜0.05).结论 提示中药马齿苋对蜂毒引起的局部过敏反应具有较强治疗作用,且给药方式不同其治疗作用强度不同.     

片仔癀通过抑制TLR4/MAPK信号通路减轻LPS诱导的BV2小胶质细胞神经炎症损伤研究

目的:研究片仔癀(PZH)对脂多糖(LPS)诱导的BV2 小胶质细胞神经炎症损伤的保护作用及机制.方法:将BV2 小胶质细胞培养于含有10％胎牛血清和1％青霉素-链霉素的RPMI-1640 完全培养基中,并置于5％CO2,37℃培养箱中常规培养.将BV2 小胶质细胞以5×104 个/m L 的密度接种于96 孔板,LP...     

HPLC法测定舒筋片中的延胡索乙素含量

目的建立复方制剂舒筋片中有效成分延胡索乙素的含量测定方法。方法采用酸溶碱沉法分离纯化延胡索中的延胡索乙素,并用HPLC法对其进行含量检测。结果本品中延胡索乙素含量测定线性范围为0.2922~1.7532μg,平均加样回收率为100.28%(n=12),RSD为1.16%。结论本测定方法简便可行、重复性好,可用于舒筋片的质量控制。     

灵芝孢子油体内抗 Friend 鼠白血病病毒的实验研究

目的 探讨灵芝孢子油体内抗 Friend 鼠白血病病毒 (Friend murine leukemia virus, Fr.MuLV) 感染的疗效和作用机制。方法 用 Fr.MuLV 感染 BALB/C 雌性小鼠,造模小鼠 ig 给药 21 d,比较各组动物的体质量、脾指数、胸腺指数,CD4+、CD8+、CD4、+/CD8+ 等指标变化情况。结果 小鼠感染 Fr.MuLV 后体质量严重减轻,脾明显肿大,胸腺萎缩,CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值均显著降低。灵芝孢子油 50、100、200 mg/kg 剂量均可显著改善体质量增长抑制、脾肿大及胸腺萎缩 (P＜0.01),100、200 mg/kg 剂量组 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+ 值均有明显升高(P＜0.01、0.05)。结论 灵芝孢子油对 Fr.MuLV 感染小鼠有保护作用,能够改善体质量增长抑制,抑制脾肿大及胸腺萎缩,升高感染小鼠的 T 淋巴细胞。     

泽泻滴丸的加速稳定性试验

目的对泽泻滴丸进行加速稳定性试验。方法按"新药稳定性试验"对滴丸剂质量稳定性考察的要求,对3批中试泽泻滴丸样品,在温度(40±2)℃、相对湿度(75±5)%的条件下,进行6个月的加速试验,考察其性状、鉴别、检查、含量、微生物限度的变化。结果各项指标符合新药加速试验的要求。结论泽泻滴丸的稳定性良好。     

替米沙坦激活PPARγ改善衰老大鼠脑血管内皮依赖性舒张功能

目的观察替米沙坦对自然衰老模型大鼠脑血管内皮功能的改善作用及PPARγ与PPARβ阻断剂对上述作用的影响。方法选取12只雄性衰老SD大鼠（24月龄）,分衰老组（6只）和衰老-替米沙坦组（6只）（5mg/kg/d,灌胃给药,1月）,并以6月龄SD大鼠（6只）作为对照组。观察替米沙坦对大鼠血压、心率、脑血管功能的影响。分离大鼠脑基底动脉进行体外培养,以PPARβ的阻断剂GSK0660（1μM,24h）、PPARγ的阻断剂GW9662（1μM,24h）为工具药物,分析上述药物对替米沙坦（10μM,24h）介导的衰老大鼠模型脑血管内皮功能改善作用的影响。结果 24月龄衰老大鼠的血压、心率与6月龄大鼠比较,差异无统计学意义。与对照组大鼠比较,衰老模型大鼠乙酰胆碱诱导的脑血管内皮依赖性舒张功能显著下降,而硝酸甘油诱导的非内皮依赖性舒张功能未见明显改变。在培养血管组织中,替米沙坦孵育可显著改善衰老大鼠模型脑基底动脉的血管内皮依赖性舒张功能,PPARγ的阻断剂GW9662可显著阻断替米沙坦的作用,但PPARβ的阻断剂GSK0660对替米沙坦的作用则无显著影响。结论替米沙坦介导的脑血管内皮功能的改善作用依赖于PPARγ。