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51.
52.
目的:对新基因NS5ATP2(615)转染肝癌细胞的基因表达谱进行分析,探索该基因表达对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能.方法:应用生物信息学(bioinformatics)技术,分析我们研究组通过抑制消减杂交(SSH)技术筛选得到的新基因NS5ATP2(615)的全长编码序列,构建NS5ATP2的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP2(615).应用基因表达谱芯片技术对重组表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5ATP2(615)和pcDNA3.1(-)空载体分别转染的HepG2细胞的mRNA的差异性表达进行检测.结果:确定基因NS5ATP2(615)由615nt组成,编码204aa的蛋白.基因表达谱芯片所检测的1 152条目的基因均为GenBank中登录的基因,NS5ATP2(615)表达质粒转染的细胞有40条差异表达基因,其中18条基因表达增强,22条基因表达降低.这些差异表达的基因与细胞信号转导、凋亡、肿瘤的发生密切相关.结论:基因表达谱芯片技术对于初步探索新基因的功能提供重要的资料.本实验结果为进一步阐明NS5ATP2(615)生物学功能及HCV NS5A的致病机制提供了理论依据. 相似文献
53.
目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建新基因丙型肝炎病毒F蛋白结合蛋白2(HCVFBP2)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCVFBP2反式激活相关基因.方法:以HCVFBP2表达质粒pcDNA3.1(-)-FBP2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制多聚酶链反应(PCR),将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库,转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建人类新基因HCVFBP2反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后选取48个克隆,进行菌落PCR分析,均得200~1000bp插入片断.挑取30个克隆进行测序,通过生物信息学分析获得28个已知功能基因序列和2个未知功能基因.结论:应用SSH技术成功构建了HCVFBP2反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.该文库的建立为阐明HCVFBP2生物学功能提供理论依据. 相似文献
54.
目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白(β2m)的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48 h后,核心启动子在β2-微球蛋白(β2_m)的影响下,其启动子活性降底2倍.结论:β2-微球蛋白(β2-m)明显HBV核心启动子的表达. 相似文献
55.
重度妊娠高血压综合征的护理龙岩地区第一医院黄燕萍,林燕妊娠高血压综合征(简称妊高征)是孕妇所特有的常见疾病。重度妊高征(先兆子痫、子痫)是妊高征的最严重阶段,若治疗不妥或护理不当可危及母婴生命。因此除应及时治疗外,护理人员应积极做好护理工作。一、一般... 相似文献
56.
长春新碱冲击治疗小儿难治性肾病综合征60例临床观察 总被引:8,自引:0,他引:8
采用长春新碱冲击疗法联合强的松治疗小儿难治性肾病综合征 60例 ,其中单纯性肾病 2 5例 ,肾炎性肾病 35例。激素耐药性 47例 ,频繁复发性 8例 ,激素依赖性 5例。肾活检 1 0例中 ,Ig A肾病 1例 ,Ig M肾病 2例 ,弥漫系膜增生性肾小球肾炎 4例 ,微小型病变 2例 ,局灶节段性肾小球硬化 1例。经 6~ 1 0次治疗后总有效率为 91 .7%。提示长春新碱冲击疗法对小儿难治性肾病仍是一种有效疗法 相似文献
57.
应用聚合酶链反应(PCR)技术对乙肝病毒(HBV)血清学指标一项或多项阳性的产妇检测其脐血及乳汁中乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)。31名产妇共采集脐血标本20份,乳汁标本31份,有脐血标本者同时有乳汁标本,另11人仅有乳汁标准。检测结果:脐血中HBV-DNA阳性8例,阳性率40%;乳汁标本中HBV-DNA阳性11例,阳性率35.5%;脐血、乳汁双阳性4例,占20%。其中抗原阳性组检出率脐血 相似文献
58.
目的:探讨预防产后尿潴留的护理干预措施及效果。方法:将分娩的健康产妇80例随机分为观察组40例(护理干预)和对照组40例(常规护理),对两组的效果进行对比。结果:两组尿潴留预防的总有效率、产后导尿率及平均首次排尿时间相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:预防产后尿潴留的护理干预措施可以有效降低导尿率,缩短术后排尿时间,值得临床推广运用。 相似文献
59.
60.
慢性乙型肝炎患者HBV DNA YMDD变异的检测及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的了解慢性乙型肝炎患者HBV DNA YMDD变异的存在情况及意义.方法检测90例慢性乙型肝炎患者HBV DNA YMDD变异,对发生HBV DNA YMDD变异的20例患者的肝功能、HBeAg、HBV DNA及HBV DNA YMDD变异情况进行分析.结果 90例慢性乙型肝炎患者中检出HBV DNA YMDD变异共20例(阳性率12.00%),已服用拉米夫定者36例,检出YMDD变异9例(25.00%),未服用拉米夫定患者54例,检出YMDD变异11例(阳性率20.37%).在20例YMDD变异患者中有5例HBeAg阴性;20例YMDD变异患者HBV DNA在3.021×105~2.369×108 (5.41×107±7.75×107) copies/ml,ALT 34~1 216(288.20±338.07)IU/L,TB 8.9~326.7 (48.74±72. 20) μmol/L.结论 YMDD变异株可在拉米夫定治疗过程中出现,也可天然存在,YMDD变异可与前C基因变异同时存在,提示HBV的变异常常是多位点的;YMDD变异株HBV复制处于中~高度水平;YMDD变异株的致病性轻重不等,肝功能可为正常,也可是轻度~高度等不同程度异常. 相似文献