HIF-1α、VEGF及AMH在多囊卵巢综合征中的表达及其临床意义

  目的  研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和抗苗勒管激素(AMH)在多囊卵巢综合征(PCOS)中的表达水平,探讨其临床意义。  方法  选择2018年6月—2020年6月湖州市中心医院收治的130例PCOS患者为观察组,同期100例健康女性为对照组,采用免疫化学发光法检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)、孕酮(P)和雌二醇(E2)水平,酶联免疫吸附法检测血清HIF-1α、VEGF和AMH水平,分析HIF-1α、VEGF和AMH的相关性及对PCOS的预测价值。  结果  观察组患者的FSH[(5.81±0.92)mU/mL]、LH[(10.54±0.72)mU/mL]、PRL[(398.55±80.47)ng/mL]、T[(7.76±2.27)nmol/L]、P[(5.29±0.92)nmol/L]、E2[(118.63±42.78)pmol/L]显著高于对照组(t值为3.179、12.150、4.284、11.223、43.724、3.955,均P＜0.05)。观察组患者HIF-1α[(163.12±25.17)pg/L]、VEGF[(257.03±30.45)pg/L]和AMH[(7.29±1.02)pg/L]显著高于对照组(t值为42.592、31.612、47.194,均P < 0.05)。HIF-1α与VEGF、AMH水平均呈正相关(r=0.811、0.848、0.762,均P < 0.05)。血清HIF-1α、VEGF及AMH曲线下面积分别为0.764、0.731、0.742,95%CI分别为0.681~0.852、0.634~0.819、0.649~0.827。  结论  PCOS患者HIF-1α、VEGF及AMH水平显著升高,对PCOS具有较高的预测价值,可作为临床诊断的指标。      

附子不同炮制品三种单酯型生物碱的含量差异研究

目的研究乌头碱、新乌头碱和次乌头碱在不同主产地不同附子炮制品中的含量变化,为附子中药的行业质量标准的建立提供依据。方法采用Alltimate C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以40 mmol·L-1醋酸铵(氨水调p H=10.00)-乙腈为流动相梯度洗脱;流速1.0 ml·min-1;检测波长240 nm。结果三种单酯型生物碱新乌头碱、乌头碱、次乌头碱均得到良好的分离,回归方程分别为:Y=15.952X-16.118 R2=0.9997;Y=15.906X-2.6445 R2=0.9998;Y=13.218X-23.044 R2=0.9999。三者线性范围是2.5~250μg,2.2~220μg,2.6~260μg。结论该方法的精密度、重复性和稳定性良好,可用于附子炮制品的鉴别和内在质量控制。     

阔叶黄檀三萜类化学成分分析

目的:对黄檀属植物中阔叶黄檀(Dalbergia latifolia)中的三萜类化学成分进行分离并对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。方法:将阔叶黄檀心材50.0 kg,粉碎,用70%乙醇加热回流提取3次,每次2 h,合并滤液,减压回收溶剂得到浸膏。浸膏经水分散,通过石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯及水饱和正丁醇萃取,制备得到上述4个萃取部位。然后分别采用硅胶,LH-20羟丙基葡聚糖凝胶,C18色谱柱(ODS)及大孔吸附树脂等色谱分离技术对各个萃取部位进行化学成分分离。通过理化分析、波谱分析及质谱分析等手段,对分离得到的各单体化合物进行结构鉴定。结果:从阔叶黄檀中分离鉴定得到7个三萜类化合物,分别为3-O-α-L-arabinopyranosyl-28-O-β-D-glucopyranosyl pomolic acid(1),β-sitostenone(2),β-sitosterol(3),豆甾醇(4),β-香树脂酸乙酸酯(5),β-香树脂醇-3-棕榈酸酯(6),3-乙酰齐墩果酸(7)。结论:化合物1,5,6为首次从该属植物中分离得到,化合物2,4为首次从该植物中分离得到。上述研究成果为进一步阐明阔叶黄檀药效物质基础提供了科学依据,同时为该植物资源综合开发利用打下了良好的基础。     

小叶菝葜不同部位提取物抗炎镇痛活性比较

目的 研究比较小叶菝葜不同部位提取物的抗炎、镇痛活性。方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀和蛋清诱发的大鼠足肿胀实验以及醋酸致小鼠扭体法实验研究抗炎、镇痛药理作用。结果 小叶菝葜乙醇提取的总浸膏、石油醚部位和乙酸乙酯部位均可降低二甲苯所致的小鼠耳肿胀度和蛋清诱发的大鼠足肿胀,乙酸乙酯部位效果最为显著;总浸膏和乙酸乙酯部位能明显的减少小鼠的扭体次数。结论 小叶菝葜乙醇总浸膏具有抗炎、镇痛作用,萃取后乙酸乙酯部位的抗炎、镇痛作用最为明显。     

抗痛风性关节炎中草药小叶菝葜中白藜芦醇的含量测定方法

目的：小叶菝葜是抗痛风性关节炎的中草药,探讨行质量评价方法很有必要。菝葜科植物中的标志性化合物—白藜芦醇是公认的具有明确疗效的化合物。方法：高效液相色谱（HPLC）,流动相乙腈-水（25颐75）;检测波长320 nm。结果：该方法可以用于小叶菝葜中白藜芦醇的含量测定。结论：本研究可建立小叶菝葜中白藜芦醇的测定含量方法,为进一步制定该中草药的质量标准奠定基础。     

高效液相-质谱串联方法快速测定大鼠血浆中的槲皮素-3’-O-葡萄糖苷含量(英文)

建立大鼠血浆中槲皮素-3’-O-葡萄糖苷的高效液相-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测法。生物样品中槲皮素-3’-O-葡萄糖苷和卡马西平(内标)采用液-液萃取的方法提取,乙酸乙酯作为提取溶剂。HPLC-MS/MS方法采用多离子反应模式(MRM)进行检测,被测物质和内标均在3.5min内出峰。槲皮素-3’-O-葡萄糖苷在血浆中的最低定量限是10.625ng/mL,最低检测限是4.25ng/mL,平均回收率大于66.80%,日内、日间精密度和准确度的RSD值均小于10.44%。尾静脉注射10mg/kg槲皮素-3’-O-葡萄糖苷后,其t1/2和AUC分别是(0.02±0.01)h和(1.22±0.28)×104μg/L·h。本法准确、稳定、灵敏度高,适用于槲皮素-3’-O-葡萄糖苷的大鼠药代动力学研究。     

宽筋藤有效部位对D-半乳糖联合Aβ2535所致AD大鼠海马蛋白组学的影响

目的探讨宽筋藤大孔树脂提取物大孔树脂提取物体积分数80%,100%乙醇洗脱部位对D-半乳糖联合Aβ2535,所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马蛋白组表达的影响。方法采用D-半乳糖联合Aβ2535复制AD大鼠模型,随机分成假手术组、模型组、多奈哌齐组(多奈哌齐,6.0 mg·kg^-1)、宽筋藤80%提取部位组(生药量6 g·kg^-1)。多奈哌齐组灌胃多奈哌齐0.1mL·10 g^-1,给药宽筋藤有效部位组灌胃0.1 mL·10 g^-1,模型组与假手术组灌胃等容量的生理盐水,每日1次,连续给药15 d后分离大鼠海马提取蛋白,Nanol-ESI液相-质谱联用系统检测,Protein Discovery软件进行蛋白鉴定,SIEVE软件对海马蛋白进行相对定量定性分析PANTHER Classification System软件对差异蛋白进行GO分析,运用IPAD软件进行信号通路富集。结果后得结果与模型组相比,给药组大鼠共有66个差异蛋白包含微管蛋白、热休克蛋白、能量代谢相关蛋白、囊泡生成/转运相关蛋白和脑保护相关蛋白等与AD密切相关的蛋白以上差异蛋白共涉及21条信号通路。结论宽筋藤可能通过上调网格蛋白等与囊泡生成转运及神经递质释放相关蛋白,促进了神经递质的合成与释放,改善了脑内胆碱能功能来达到干预AD病理进程的作用。     

HPLC测定菝葜茋类提取物在大鼠体内组织中的分布

目的：研究菝葜茋类提取物在大鼠体内的组织分布规律。方法：菝葜茋类提取物大鼠灌胃给药1 g·kg^-1 后,应用HPLC测定氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量。色谱柱：Zorbax SB-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相：(A)乙腈－(B)水进行梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;检测波长320 nm;进样量10 μL;柱温40 ℃。结果：建立了氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量测定方法。结论：本方法简便、准确、专属性强,可以成功应用于大鼠灌胃给药菝葜茋类提取物后,氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠体内组织分布的研究。     

山楂体外降三酰甘油主要活性组分谱效关系研究

目的探讨山楂降三酰甘油(TG)主要活性成分UPLC指纹图谱与药效之间的相关性。方法利用TG体外模拟消化模型,筛选出山楂降TG主要活性组分。采用UPLC法建立12批不同产地山楂降TG主要活性组分指纹图谱,并获取相应的药效数据,运用偏最小二乘法,进行相关性分析。结果山楂中富含黄酮的组分能够明显地降低TG水平。经相关性分析,在该组分指纹图谱所含的11个共有峰中,1(B型原花青素二聚体)、3(原花青素C1)、4(B型原花青素二聚体)、5(芦丁)、6(金丝桃苷)、7(异槲皮苷)、8(B型原花青素二聚体)号色谱峰所对应的化合物对降TG呈正相关作用,其余包括2(表儿茶素)、10(槲皮素)、11(5-O-咖啡奎尼丁酯)号色谱峰在内的各峰则呈负相关。结论山楂黄酮类成分对降低TG水平存在不同程度的影响。     

利用ISSR-PCR方法分析单叶蔓荆居群的遗传多样性

目的:对山东和江西单叶蔓荆的4个居群80个样本进行资源考察和种内遗传变异情况分析。方法:利用ISSR分子标记技术。结果:从100条ISSR引物中筛选出15条特异性强、稳定性好的引物进行ISSR分析。共获得129个位点,其中多态位点数115个,多态位点百分率为89.15%。利用PopGene软件进行分析,结果表明居群之间的平均多态位点百分率为71.89%,Shonnon表型多样性指数(I)平均值为0.220 4,具有较高的遗传多样性。结合聚类分析和地理变异规律把种群划分为2个大的种群组:山东居群组和江西居群组。结论:以上结果可为单叶蔓荆种质资源的保护和利用以及物种分化研究提供依据。