以异种血管内皮细胞疫苗进行肿瘤免疫治疗的研究进展

手术、化疗和放疗是治疗恶性肿瘤的三大传统模式,但大多数肿瘤仍得不到根治,必须探寻新的治疗策略。肿瘤生物治疗包括免疫治疗、基因治疗、干细胞治疗、诱导肿瘤细胞分化和凋亡、抑制肿瘤新生血管治疗等,研究领域广泛,极具应用前景,因此有望成为肿瘤治疗的第四种模式。 我们通过对多种肿瘤患者的淋巴细胞在体外、体内杀伤其自身癌细胞的直接形态观察和功能分析,结合随访资料,发现人体淋巴细胞在肿瘤微环境内能直接杀伤癌细胞,这种自身肿瘤细胞杀伤活性与肿瘤的发生和转移密切相关,反映了患者的抗肿瘤能力[1－8],是一个极其重要的免疫指标。进一步的研究发现,抗体[9－10]、超抗原[11]、抗原肽[9]、转基因[12]、加热[4,13]、化疗药物处理[14]等均可诱导自身肿瘤细胞杀伤活性,并对肿瘤患者有一定治疗作用。诱导自身肿瘤杀伤活性的有效途径之一是用肿瘤疫苗进行主动免疫,因此,以各种形式的肿瘤抗原制成肿瘤疫苗对患者进行免疫接种,激发患者机体对肿瘤产生特异性的免疫应答反应,并排斥肿瘤,成为近来肿瘤免疫治疗的热点。构建肿瘤疫苗的策略较多,如用肿瘤细胞疫苗、基因修饰疫苗、肽和蛋白质疫苗、树突状细胞疫苗、融合细胞疫苗等诱导机体抗肿瘤免疫反应,然而至今仍有很多因素制约着肿瘤免疫基因治疗的发展,例如,除恶性黑色素瘤外,大部分肿瘤,包括常见的肝癌、肺癌、胃癌等,能诱导特异性免疫反应的特异抗原仍未被确定。而且,已鉴定的大部分肿瘤抗原是自身分子,免疫系统对此易产生免疫耐受,难以激发有效的免疫反应。因此,有必要探索肿瘤免疫基因治疗的新途径。     

颊粘膜鳞癌中p27~(Kipl)基因的蛋白质表达及临床意义

目的　分析口腔颊癌癌变过程中 p2 7蛋白表达与临床病理资料及预后的关系 ,阐明 p2 7蛋白检测在颊癌诊断与治疗中的临床意义。方法　回顾性研究 40例颊癌、2 0例白斑及 7例正常颊粘膜 p2 7蛋白表达情况 ,采用 SP法根据染色指标计数 ,并利用 Cox比例风险模型进行生存多因素分析。结果　 p2 7多分布于上皮细胞核和胞浆 ,正常组织和不伴上皮异常增生的白斑表达最强 ,伴上皮异常增生的白斑及颊癌分化较好的强阳性表达较多 ,分化较差的颊癌 p2 7表达最弱 ,甚至不表达。单因素生存分析表明 ,p2 7表达、区域淋巴结和远处转移与生存期显著相关 ,多因素 Cox回归分析表明 p2 7蛋白表达可作为辅助性颊癌预后指标。结论　 p2 7蛋白表达与口腔肿瘤的发生发展有密切关系 ,它与肿瘤的侵袭性生长及预后密切相关 ,可作为一个新的辅助性预后指标     

含铂方案治疗进展期NSCLC与p53、p16、bcl-2表达的关系

目的 :化疗耐药是影响非小细胞肺癌 (NSCLC)预后的主要原因 ,本研究旨在探讨进展期NSCLC化疗耐药与凋亡相关基因p5 3、p16和bcl- 2的关系。方法 :用免疫组化方法检测进展期NSCLCp5 3、p16和bcl- 2的表达 ,同时收集患者的临床资料及化疗方案 ,比较p5 3、p16和bcl- 2表达与化疗疗效的关系。结果 :共有 14 1患者纳入研究 ,男性 12 1例 ,平均年龄 6 3岁 ;Ⅲ期 6 7例 ,Ⅳ期 76例 ;p5 3阳性 72例 (5 1% ) ,p16阴性 83例(5 9% ) ,bcl- 2阳性 15例 (10 % )。p5 3阳性组患者化疗有效率为 2 6 % ,p5 3阴性组化疗有效率为 5 7% ,两者相关显著 (P =0 0 0 4 )。结论 :本研究探讨了以顺铂为基础的联合化疗与p5 3表达的关系 ,对指导进展期NSCLC治疗及判断预后有一定意义。     

特尔立联合顺铂治疗恶性腹腔积液的临床分析

目的：为了提高晚期恶性肿瘤的治疗效果,分析特尔立联合顺铂对恶性腹腔液的疗效及毒副反应。方法：在综合治疗的基础上,将58例患者随机分为两组：生物化疗组（在抽腹腔积液后腔内注入特尔立150-225μg＋生理盐水5ml及顺铂20-40mg＋生理盐水50ml）及单线化疗组（在抽腹腔积液后腔内注入等量顺铂）。结果：生物化疗组完全缓解（CR）63.89%,部分缓解（PR）25.00%,无效（NC）11.11%,总有效率88.89%;单纯化疗组,完全缓解（CR）13．64％,部分缓解（PR）27．27％,无效（NC）59．09％,总有效率40．91％。生物化疗组总有效率明显高于单纯化疗组（P〈0．05）。两组患者均未出现严重的毒副反应,生物化疗组发热反应明显多于单纯化疗组。结论：特尔立联合顺铂治疗恶性腹腔积液较单用顺铂有效率高。     

肿瘤基因治疗的研究现状和展望

基因治疗(gene therapy)是随着DNA重组技术、基因克隆技术等的成熟而发展起来的最具革命性的医疗技术之一,它是以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗手段。经过近三十年的发展,基因治疗已经由最初用于单基因遗传病的治疗扩大到恶性肿瘤、感染性疾病、心血管疾病、自身免疫性疾病、代谢性疾病等多种重大疾病的治疗,其中针对恶性肿瘤的基因治疗临床试验方案占了总数的2/3。本文将主要聚焦全球基因治疗的发展历史和我国肿瘤基因治疗的发展现状,重点介绍肿瘤基因治疗所用的表达载体、基因导入系统、临床试验、重点产品的研发和产业化发展以及近年来基因治疗在恶性肿瘤、重大遗传性疾病等治疗领域所取得的重点突破。此外,还从基因的体内递送、基因治疗的安全性、新技术用于肿瘤的基因治疗、肿瘤基因治疗与其他治疗方法的联合应用、基因检测技术与基因治疗相结合等五个方面,对未来肿瘤基因治疗所面临的发展机遇和挑战进行重点阐述。有理由相信,随着肿瘤基因治疗关键技术的不断突破,未来几年将是肿瘤基因治疗产品上市的重要时期,将为恶性肿瘤的临床治疗提供更多的新选择。     

Fas/Fas配体在结直肠腺癌发生和免疫逃避中的作用

目的:探讨Fas、FasL(Fas 配体)在结直肠腺癌发生和免疫逃避中的作用.方法:采用Fas、FasL免疫组织化学染色和TUNEL法细胞凋亡染色双重标记法.对50例结直肠腺癌、44例大肠腺瘤、9例正常结肠组织及24例结直肠腺癌伴淋巴结转移癌进行Fas和FasL的检测.对50例结肠癌再用TUNEL法,检测不同FasL表达区结直肠癌细胞的凋亡情况.结果:①Fas在不同结肠组织中的表达规律是:结直肠腺癌中表达最低,其次是结肠腺瘤,表达水平最高的是正常结肠组织.FasL在不同结肠组织中的表达规律与Fas正好相反,结直肠腺癌组织中表达最高,其次是结肠腺瘤,正常结肠组织中几乎不表达FasL.②Fas、FasL的表达与结直肠腺癌患者的年龄、性别无关(P＞0.05),与Duke's分期、分化程度、有无淋巴结转移有关(P＜0.05).③在同一结直肠腺癌组织切片中,FasL表达不均匀:FasL表达阳性区(n=45)结直肠癌细胞的凋亡率(5.013%))比FasL阴性区(n=5)(2.815%)高(P＜0.05).④在24例结直肠腺癌淋巴结转移癌组织中,FasL均强阳性表达.结论:Fas/FasL系统在结直肠腺癌发生和免疫逃避中起重要的作用.     

RNA干扰PLK1基因诱导人前列腺癌细胞PC-3的凋亡研究

目的探讨质粒表达载体介导的RNA干扰抑制PLK1基因表达对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响。方法构建靶向人PLK1基因的RNA干扰表达质粒（psh—PLK1）。将该干扰质粒转染到人前列腺癌细胞PC-3中，应用RT—PCR技术分析RNA干扰后各组细胞PLK1基因mRNA表达水平的变化。采用MTT法和细胞形态学分析检测PLK1基因表达受到抑制后PC-3细胞的增殖情况的变化，通过流式细胞分析技术以及PI染色技术进行对各组细胞进行细胞凋亡检测。结果RT—PCR结果显示，转染RNA干扰表达质粒（psh-PLK1）24h和48h后，实验组PC-3细胞较对照组的PLK1基因mRNA表达分别降低了74．6％和91．2％；转染了psh-PLK的PC-3细胞与对照组相比生长受到明显抑制（P〈0．05），而各对照组之间差异无显著性（P〉0．05）；流式细胞仪检测发现转染了psh-PLK1的PC-3细胞较对照组细胞产生了更强的细胞凋亡（39．2％），PI荧光染色可见实验组细胞呈现出典型的细胞凋亡形态学变化。结论RNA干扰PLK1基因能够有效地抑制PC-3细胞中PLK1基因的表达，从而抑制PC-3细胞的生长与增殖，并诱导PC-3细胞产生凋亡。     

小鼠骨髓间充质干细胞在体外对淋巴细胞增殖和凋亡的影响

骨髓间充质干细胞(MSC)是骨髓基质祖细胞,具有多向分化潜能,可应用于各种组织的修复和重建。MSC同时还具有调节免疫系统的作用。在体内及动物实验中,MSC可以减少移植物抗宿主病的发生率并减轻其严重程度。能够延长皮肤移植物的存活时间。国内也有资料显示MSC能够抑制脐血淋巴细胞的转化。但MSC对淋巴细胞的免疫抑制作用机制尚不清楚。我们对此进行了探索。     

肌钙蛋白的克隆表达及对卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:研究肌钙蛋白（Troponin,TnI）对卵巢癌的治疗作用。方法:将TnI构建于原核表达载体PTrc99A并转化到大肠杆菌JM109中。细胞在LB培养基中培养到对数生长期后,加IPTG至终浓度为5mmol/L诱导。离心收集菌体,超声破菌。包涵体纯化并复性后在体内、体外抑制血管生成,并用于治疗荷有卵巢癌SKOV3的裸鼠,肿瘤体积每周测2次。结果:TnI能在体内和体外抑制血管生成。TnI治疗组肿瘤生长明显受到抑制,生存率升高。结论:TnI可抑制荷瘤小鼠的卵巢癌生长,延长其生存率。