人骨形成蛋白-2对人脑胶质瘤细胞增殖细胞周期的影响及其抑瘤作用

本研究旨在观察人骨形成蛋白(ＢＭＰ) 2对人脑胶质瘤细胞增殖、细胞周期的影响及其抑瘤作用 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.材料 :人脑胶质瘤细胞系ＳＨＧ 44由本所保存。 18只ＢＡＬＢ/Ｃ胸腺缺陷裸小鼠 ,4～ 6周龄 ,体重 (18± 2 )ｇ ,购自本校动物实验中心。重组人骨形成蛋白 2 (ｒｈＢＭＰ 2 )由本校生物化学教研室蒲勤博士提供 ,16 40培养基及胰蛋白酶购自Ｇｉｂｃｏ公司。四甲基唑蓝 (ＭＴＴ)及二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)购自华美生物公司。2 .细胞培养 :参照司徒镇强[1] 方法。3.ＭＴＴ实验 :以 5× 10 3 个对数生长期细胞接种于…     

改良翼点入路显微直视手术切除海绵窦肿瘤

为总结海绵窦肿瘤显微神经外科治疗的经验，作者对1990年1月－2001年6月收治的26例海绵窦肿瘤病例进行了回顾性分析。手术均采用改良翼点入路，显微直视手术，其中6例在神经导航辅助下进行。结果全切19例（73.1%)部分切除7例（26.9%)。术后14例（53.8%)颅神经症状逐渐改善，6例（23.1%)出现新的颅神经损害症状，无死亡。对部分切除的病人，术后加立体定向放射外科治疗。随访8个月－12年，未见肿瘤复发。作者认为，熟悉海绵窦区的显微解剖并具备熟练的显微神经外科技术，可使该类手术取得良好效果。     

C6脑胶质细胞瘤的在体实验研究

目的　建立大鼠C6脑胶质瘤模型 ,寻找简易判定颅内肿瘤大小的可靠指标。方法　应用立体定向法 ,将 1%琼脂糖含 1× 10 6C6瘤细胞悬液 10 μl注入大鼠右脑尾状核并行一般观察和MRI检查。在接种后第 10、15、2 0、2 5天和自然死亡前 ,对大鼠做主动脉多聚甲醛灌注固定 ,对脑组织和肿瘤标本进行大体观察和HE染色。结果　 5 0只接种大鼠均有颅内肿瘤生长 (10 0 % ) ,远处和颅外转移率为 0 % - 4 %。结论　成功建立大鼠C6脑胶质瘤模型 ,接种后大鼠的生存时间可作为判定颅内肿瘤生长大小的指标。     

白藜芦醇对小鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的:探讨不同剂量白藜芦醇对局灶性脑缺血后的神经保护作用及对脑内基质金属蛋白酶(matrixmetallopoteinases,MMPs)表达的影响。方法:实验于2003-11/2004-02在解放军第四军医大学西京医院神经外科研究所实验室分两部分进行。60只健康雄性昆明白小鼠,体质量18～22g。第1部分中随机分为4组,分别为白藜芦醇10,30,60mg/kg强饲预治疗组及单纯缺血组,第2部分随机分为白藜芦醇30mg/kg及单纯缺血组。各组均为10只。采用线段血管内栓塞大脑中动脉(MCA0)获得小鼠脑缺血模型,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色显示脑梗死范围,应用酶谱印记技术检测缺血后脑组织中MMPs活性。结果:各白藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度均明显小于单纯缺血组犤(120±17)mm,(21.5±2.5)%犦,差异均有非常显著3性意义(P<0.01)。30mg/kg白藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度犤(87±15)mm,(12.9±1.3)%犦明显小于10mg/kg组3犤(102±11)mm,(17.8±2.3)%,P<0.01犦,但与60mg/kg相比,无3明显差别犤(89±13)mm,(12.5±1.6)%,P>0.05犦。30mg/kg剂量3的白藜芦醇明显抑制了缺血后脑组织MMP-9的活性。结论:白藜芦醇具有脑保护作用,机制与对MMP-9的抑制有关。     

Endostatin裸DNA对人脑胶质瘤的抑瘤效应

目的：探讨endostatin裸DNA对裸鼠皮下脑胶质瘤生长的影响特点。方法：用脂质体包埋法将endostatin基因的真核表达载体pcDNA-S-Endo注入裸鼠皮下SHG44人脑胶质瘤内,观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率,结合免疫组化、电镜、微血管和瘤体坏死区计数,确定endostatin裸DNA治疗人脑胶质瘤的特点。结果：Endostatin裸DNA在荷瘤裸鼠体内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤血管生成能力显下降,肿瘤生长受到抑制,抑瘤率达到41．6％。结论：Endostatin裸DNA能够抑制人脑胶质瘤生长41．6％。结论：Endostatin裸DNA能够抑制人脑胶质瘤生长,它是通过抑制肿瘤血管生成,导致肿瘤坏死实现的。本研究为应用裸DNA药物治疗人脑质瘤奠定了初步基础。     

Endostatin基因真核表达载体的构建及活性鉴定

目的：构建endostatin基因的真核表达载体,并将其转染C6脑胶质瘤 细胞,探讨其体外抑制血管内皮细胞生长的活性。方法：利用PCR将大鼠血清蛋白分泌信号连接在endostatin基因的碳末端,构建成真核表达载体pcDNA3-Sendostatin,利用Lipofectamine法将其转染C6脑胶质瘤细胞,采用细胞增殖实验进行endostatin表达蛋白体外活性鉴定。结果：成功构建了endostatin基因真核表达载体,转染该载体的C6脑胶质瘤细胞可分泌表达抑制血管内皮细胞增生的endostatin蛋白。结论：endostatin是一种有效的血管生成抑制剂,可进一步用于在体肿瘤的抗血管生成治疗。     

大鼠脑创伤后小胶质细胞激活的时程及形态变化研究

目的探讨大鼠脑创伤后小胶质细胞激活的时程及形态变化。方法采用改良的Feeney等人的方法造成大鼠颅脑损伤模型,21只SD大鼠随机分为对照组和创伤组,后者根据伤后处死时间点不同,再分为伤后1h,6h,12h,24h,48h和72h组,每组动物3只,在伤后不同时间点处死动物,取伤区脑组织行抗OX-42免疫组织化学染色。结果正常大鼠脑内小胶质细胞一般为静息状态,OX-42为阴性,在切片上不易发现或细胞形态不清晰;伤后1h,小胶质细胞为轻度反应,OX-42浅染,细胞形态隐约可见,不规则;伤后6h,小胶质细胞反应明显,由静息状态变为早期反应状态,OX-42深染,细胞形态清楚;伤后12h,小胶质细胞反应达高峰,细胞形态更清楚,突起上可见到小棘;24h以后,反应减弱,OX-42浅染,细胞数量减少。结论大鼠脑创伤后小胶质细胞被激活,细胞形态发生改变,海马区亦有激活改变;反应的时程变化是伤后1h出现激活,6h反应明显,12h达高峰,以后逐渐减弱。     

肿瘤坏死因子作用于大鼠C6胶质瘤的1H磁共振波谱研究

目的　采用1H磁共振波谱 (MRS)观察大鼠C6胶质瘤在肿瘤坏死因子 (TNF α)治疗后的代谢改变 ,评价1HMRS在肿瘤疗效观察中的有效指标及应用价值。方法　采用立体定向的方法将C6细胞悬液种植于 3 3只SD大鼠脑尾状核部位 ,高场强磁共振波谱仪观察C6胶质瘤大鼠在腹腔给予TNF α后 3、6、9、12、15d的代谢改变 ,比较N 乙酰门冬氨酸 (NAA)、胆碱类化合物 (Cho)、肌酸和磷酸肌酸 (Cr)及乳酸 (Lac)以及Cho/Cr、NAA /Cr、NAA/Cho积分值的变化 ,进行统计学分析。结果　在给予TNF α后第 3天 ,Cho出现降低 ,在第 15天达到治疗前水平 ,其积分值在未治疗组与 3d组 ,3d组与 6d组以及 9d与 12d组间差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,而NAA及Cr无明显改变。NAA/Cho在治疗后 3、6以及 9、12d组差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。Cho/Cr在用药后第 3、6天下降 ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。而NAA /Cr无明显改变。结论　1HMRS能够早期观察肿瘤治疗的效果 ,Cho是肿瘤疗效观察的有效指标。     

白藜芦醇对小鼠脑组织线粒体形成的诱导作用观察

目的观察白藜芦醇(Resveratrol,Res)对脑组织线粒体形成的影响,探讨其影响线粒体形成的可能机制。方法实验动物被随机分为3组,分别为空白对照组、羟甲基纤维素组和Res组,15天后检测脑组织中ATP含量和mtDNA表达水平,电镜观察线粒体变化,采用蛋白印迹和Real-time PCR法检测线粒体形成相关分子表达变化。结果 Res能够明显促进脑组织中ATP含量的增加,提高mtDNA表达水平,增加线粒体的数量。且蛋白印迹和Real-time PCR检测发现,Res能促进线粒体形成相关分子基因和蛋白的表达。结论 Res预处理可能具有通过影响线粒体形成相关基因的表达来促进脑组织线粒体形成的潜能。