sDR5封闭TRAIL减少内毒素引起小鼠肝细胞凋亡

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在内毒素诱导小鼠肝细胞凋亡中的作用.方法 内毒素作用于可溶性死亡受体-5(sDR5)封闭TRAIL的小鼠,不同时间检测小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氧酶(LDH)的含量;HE染色及Annexin V、PI双染法流式细胞术检测小鼠肝细胞凋亡;免疫组织化学法及流式细胞术检测小鼠肝细胞和肝细胞膜表面DR5的表达.结果 内毒素可以上调肝细胞DR5的表达.DR5封闭TRAIL可显著抑制内毒素引起的小鼠肝细胞凋亡和改善肝细胞损伤.结论 内毒素引起疾病过程中TRAIL起重要作用.     

斑点免疫渗滤法检测抗精子抗体的反应条件优化

近年的研究显示,精子膜抗原与生育关系密切,其抗体的产生可导致免疫性不育。目前比较快速的抗精子抗体(AsAb)检测法是斑点免疫渗滤法,但经与酶免试剂盒相比,市售的胶体金免疫渗滤试剂盒灵敏度不十分理想。因此,我室用自己提取的精子膜抗原,建立了快速检测AsAb的实验方法。一、材料和方法1.对象不育症患者来自河南大学医学院男性病研究所门诊部,共50例,男23例,女27例,年龄25~33岁。对照血清10份来自女学生。2.试剂AsAb酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒、金标抗体及渗滤实验包装盒购自华美生物工程公司。精子膜抗原为本室自制。硝酸纤维素…     

白癜丸对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨白癜丸对小鼠免疫功能的影响.方法:应用免疫抑制药建立小鼠免疫功能低下模型,使用不同剂量的白癜丸进行体内拮抗试验.结果:白癜丸可明显提高免疫功能低下小鼠ANAE阳性细胞百分率,对免疫抑制小鼠的胸腺有明显的增重作用,可显著提高地塞米松致免疫功能低下小鼠溶血素含量.结论:白癜丸具有提高免疫力、调节免疫功能的作用.     

解脲支原体感染对精液各参数的影响

解脲支原体感染,精子活率降低,为43.20％,活动力显著降低,具Ⅱ、Ⅲ级活动力的精子只有25.84％;感染者精液中白细胞数增多(平均5.71/HP),精子畸形率增高(平均22.80％),而精液量、酸硷度、精液液化时间、红细胞数/HP则无明显变化     

CD8α+树突状细胞研究进展

根据细胞表面CD8α的表达差异,小鼠脾脏中树突状细胞(DC)可以分为2种,即CD8α-DC和CD8α+ DC,二者功能迥异.本文回顾了近年来CD8α+ DC的研究动向,重点分析了CD8α+ DC的在肿瘤免疫、移植免疫和生殖免疫等中的作用.     

血流动力学新特点与冠状动脉粥样硬化发生的关系

动脉粥样硬化(atheroscleorsis,AS)最早的改变为血管内皮细胞功能异常.作用于血管内皮细胞的力有2种:流体对管壁的剪应力(wall shear stress,WSS),是由血流驱动的；而固体周围牵张力(circumferential strain,CS)和相关的周围应力则是由血压驱动引起的.这2种力同时作...     

联合应用CD3/CD28单克隆抗体对小鼠T淋巴瘤细胞EL4活化的影响

目的:研究联合应用CD3/CD28单克隆抗体对小鼠T淋巴瘤细胞EL4活化的影响.方法:ELISA方法检测不同浓度CD3/CD28抗体在不同时间点体外刺激EL4细胞后培养上清中IL-2的分泌;CCK-8方法检测EL4细胞增殖能力;流式细胞术检测EL4细胞周期;RT-PCR检测IL-2、NF-κB和NF-AT转录因子的转录情况.结果:在48小时抗CD3抗体(25μg/ml)与抗CD28抗体(2μg/ml)共刺激EL4细胞明显增加IL-2的分泌和细胞增殖能力,不影响细胞周期.结论:EL4细胞可以作为研究小鼠T淋巴瘤细胞活化的细胞模型.     

肝细胞癌中差异表达N-连接糖蛋白的分析鉴定

目的分析鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达的N-连接糖蛋白。方法应用刀豆蛋白凝集素(ConA)、晶状体凝集素(LCH)和雪花凝集素(GNA)组成的亲合层析柱富集10对HCC和癌旁非癌组织中N-连接糖蛋白、二维电泳(2DE)比较分析差异表达的蛋白质点、串联质谱鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证人羧酸酯酶1(hCE1)、触珠蛋白(HP)及组织蛋白酶D(CD)的差异表达;体外侵袭实验检测CD表达沉默后对HCC的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术鉴定了28个与HCC相关的差异表达蛋白(HCC中高表达和低表达的蛋白均为14个),Western blotting验证hCE1、HP在HCC中明显低表达,组织蛋白酶D前体(pCD)在HCC中高表达;而ConA亲和层析柱富集的ConA-CD在HCC中显著高表达。CD-siRNA介导的CD表达沉默能够显著降低肝癌细胞系SNU449、SNU473的体外侵袭能力。结论 HP、hCE1蛋白表达变化和CD N-糖链变异可能参与了HCC发生发展过程。     

靶向TIPE2基因的shRNA慢病毒载体构建及病毒包装

目的包装表达TIPE2-shRNA的慢病毒颗粒。方法查询并合成7对针对TIPE2的shRNA序列,将其克隆入pLK0.1载体,经酶切及测序正确后,将构建好的7种pLKO.1-TIPE2-shRNA质粒分别与pCDNA3.1/3×FLAG-TIPE2共转染293T细胞,Western blot鉴定干扰效率并进行后续的病毒包装。结果 4号质粒沉默效果最好,将其与Non-target-shRNA质粒分别进行病毒包装,Western blot和免疫荧光证实病毒具有良好的感染效率和沉默效果。结论 TIPE2-shRNA的慢病毒载体构建及病毒包装成功。