miRNA-10a在胃癌中的功能及其甲基化调控

目的研究miRNA-10a在胃癌中的表达及其在胃癌中的功能,探讨其启动子区的高甲基化与胃癌发生的相关性。方法使用Taqman探针对35对胃癌组织标本进行实时定量PCR检测,统计学分析miRNA-10a的表达情况与临床病理因素的相关性,随后使用甲基化特异性PCR（MSP）检测样本中miRNA-10a上游启动子区的甲基化情况。并通过细胞增殖实验研究miRNA-10a在胃癌细胞系中的功能。结果在35对胃癌样本中,其中．24例miRNA-10a的表达水平下调。11例表达水平上调。与临床病理因素的相关性分析显示,miRNA-10a在胃癌组织中的低表达,与胃癌的TNM分期呈负相关（P〈0．05）。MSP结果显示,癌组织的甲基化水平明显高于相对应的癌旁组织,差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞增殖实验显示,过表达miRNA-10a后能够明显抑制胃癌细胞的增殖速度。结论胃癌组织中miRNA-10a的表达呈现普遍的低表达趋势,且miRNA-10a的低表达与胃癌的TNM分期呈负相关,其启动子区的高甲基化可能是导致miRNA-10a表达下调,参与胃癌发生的原因之一,并且miRNA-10a可能在胃癌的发生中起肿瘤抑制基因的作用。     

经前平对PMS肝气逆证大鼠海马β-内啡肽表达的影响

目的:通过观察中药对中枢神经递质受体表达的影响,探讨中药治疗情志障碍及经前期综合征(PMS)的微观机制。方法:脉冲电流结合噪音刺激大鼠,造成肝气逆PMS模型。分别给予生理盐水、经前平颗粒灌胃,连续4个月经周期,免疫组化法检测海马β-内啡肽阳性细胞。结果:处于发情期的PMS大鼠β-内啡肽(β-EP)阳性细胞表达显著低于同一月经周期的正常鼠(P<0.05),经前平颗粒能够缓解焦虑症状,且可以使大鼠海马β-内啡肽阳性细胞明显增多(P<0.05)。结论:中药经前平颗粒可能通过调节中枢β-内啡肽的表达,而治疗与PMS有关的情志障碍。     

miR-320e促进胰腺癌细胞系耐药

目的研究miR-320e在胰腺癌耐药中的作用及其机制。方法用定量PCR的方法确定miR-320e在胰腺癌耐药细胞系中的表达,进而通过在胰腺癌细胞中过表达miR-320e,检测细胞对5-FU化疗药物敏感性、细胞增殖的影响。同时通过报告基因实验及Western blot法确定miR-320e的靶基因。结果在胰腺癌耐药细胞系(PATU8988/5-FU)中miR-320e表达显著上升(P0.01)。在胰腺癌细胞PATU8988和PANC-1中过表达miR-320e后,细胞对5-FU化疗药物出现耐受,IC_(50)显著上升(P0.01),细胞增殖速度加快(P0.01)。PDCD4是miR-320e的直接靶基因,miR-320e的过表达显著降低了PDCD4蛋白水平。结论 miR-320e的高表达可显著促发胰腺癌细胞化疗耐药,可作为胰腺癌耐药检测的分子标志及新的治疗靶点。     

大狼把草的化学成分液质联用快速鉴定分析

目的:建立大狼把草化学成分的液质联用定性表征方法并总结裂解规律。方法:按照化学成分数据库构建-液质数据采集-数据库检索-质谱数据解析的步骤,采用HALO C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,2.7μm);0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,5%~25%B;10~30 min,25%~45%B;30~35 min,45%~70%B;35~45 min,70%~90%B;45~60 min,90%~100%B;60~70 min,100%B)。柱温25℃,流速0.2 mL·min-1,进样量5μL;质谱条件为采用ESI离子源,在正离子模式下进行检测,对大狼把草中的橙酮、查尔酮、苯丙素等进行分析。结果:从大狼把草的提取液中,鉴定出黄酮类22个,苯丙素类5个,有机酸2个,碳烯1个,发现在正离子模式下,绿原酸及其衍生物会有规律的断裂产生[奎尼酸+H-H_2O]+,[咖啡酰基+H]+,多羟基酸会脱水裂解。黄酮类化合物,主要会丢失CO,H_2O等碎片,橙酮类化合物会产生286,270,230等碎片离子。结论:采用高效液相-飞行时间液质联用法可以快速有效的对中药中已知化学成分进行定性分析,为大狼把草的物质基础表征提供质谱依据。     

花蕊石、煅花蕊石重金属及砷盐含量限度标准制定

目的：制定花蕊石和煅花蕊石中重金属及砷盐等有害元素的含量限度,有效控制该药的质量。方法：采用比色法和古蔡氏法分别测定花蕊石和煅花蕊石中重金属、砷盐含量。结果：测得不同产地的10批样品花蕊石和煅花蕊石含重金属少于2μg·g-1,含砷量少于0.5μg·g-1。结论：该测定方法简便、快速、准确,能有效控制花蕊石和煅花蕊石的质量。