结膜松弛症患者泪液蛋白质组学研究

目的 比较结膜松弛症和正常人泪液中蛋白质成分的差异,从而探讨结膜松弛症的发病机制.方法 病例对照研究.收集结膜松弛症组和正常对照组各8例(8只眼),采用毛细管从每只眼收集15ul泪液,应用shotgun方法 检测泪液蛋白质,分别行溶液内酶解、反向高效液相色谱(RP-HPLC)分离、电喷雾离子化质谱(ESI-MS/MS)行质谱鉴定后生物信息分析.结果 结膜松弛症组泪液中共有蛋白质356个,正常人泪液中共有蛋白质352个,两组中有119个蛋白质相同.对泪液中蛋白质按基因本体注释(GOA)分类后,发现结膜松弛症组中出现的部分调节凋亡相关蛋白质、凋亡相关蛋白质及炎性反应相关蛋白质在正常对照组中缺失,并且在结膜松弛症泪液中发现了防御素.结论 shotgun方法 可有效分离和分析泪液蛋白质,结膜松弛症患者泪液中的特异性成分提示结膜松弛症可能与细胞凋亡和炎性反应有关.(中华眼科杂志,2009,45:135-140)     

结膜松弛症泪液蛋白质肽质量指纹谱分析

目的 分析结膜松弛症泪液蛋白表达谱的变化.方法 收集22例结膜松弛症患者和13例正常对照组的泪液样本,毛细管从每眼收集15μL泪液,采用Zip Tip C18柱浓缩和纯化泪液样本,利用基质辅助的激光解吸质谱进行线性模式和肽质量指纹谱(PMF)检测,并对PMF图谱数据进行多变量数据统计分析,比较结膜松弛症组和正常对照组的泪液PMF的差异.结果 2组泪液的质谱检测峰在数量上差异无统计学意义(P>0.05),主成分分析结合偏最小二乘法分析显示结膜松弛症组泪液蛋白质表达与正常对照组比较有差异,结膜松弛症组泪液蛋白质表现为"离群"样本,且离群分散度较大的样本为结膜松弛症Ⅳ级的患者.结论 应用Zip Tip C18柱分离联合基质辅助的激光解吸质谱技术可有效筛查泪液蛋白质.对PMF图谱进行多变量数据统计分析,可以观察到结膜松弛症组与正常对照组泪液蛋白质存在差异,并可为结膜松弛症,临床诊断、疾病发生发展的机理及治疗提供参考.     

结膜松弛症泪液中细胞因子的检测

目的:分析结膜松弛症泪液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的表达量的变化。方法:收集25例结膜松弛症患者和13例正常对照组的泪液样本,毛细管从每眼收集15μL泪液,采用放射免疫测定法测定结膜松弛症组和正常对照组的泪液中TNF-α,IL-6和IL-8的浓度并进行统计学分析。结果:结膜松弛症患者TNF-α浓度为19.05±6.35ng/mL,正常对照组TNF-α浓度为14.13±7.76ng/mL;IL-6浓度为13.16±8.97pg/mL,正常对照组IL-6浓度为4.24±3.97pg/mL;IL-8浓度为34.40±20.73pg/mL,正常对照组IL-8浓度为18.31±11.62pg/mL;两组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:应用放射免疫的方法可检测泪液中的细胞因子含量,结膜松弛症组泪液中三种细胞因子的含量显著增高提示结膜松弛症可能与细胞因子的增加及免疫反应有关。     

结膜松弛症结膜组织及泪液中黏蛋白的表达变化

目的:观察结膜松弛症松弛结膜组织和泪液中黏蛋白的表达变化,探讨结膜松弛症的发病机制.方法:收集结膜松弛症组38例38眼和正常对照组36例36眼的结膜组织和泪液标本,分别行免疫组织化学染色检测结膜组织中黏蛋白(MUC2、MUC4、MUC5AC、MUC16)表达情况,ELISA检测泪液中黏蛋白(MUC2、MUC4、MUC5AC、MUC16)A值,结果行统计学分析,比较两组之间的差异.结果:结膜松弛症组的结膜上皮细胞中MUC2、MUC4与正常对照组表达无统计学差异 (P=0.315、0.156);结膜松弛症组的结膜上皮细胞中MUC5AC、MUC16阳性表达细胞较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(P=0.016、<0.01).结膜松弛症组泪液中MUC2的A值与正常对照组无统计学差异(P=0.651),结膜松弛症组中MUC4、MUC5AC的A值较正常对照组明显降低,有显著的统计学差异(均P<0.01),结膜松弛症组中MUC16的A值较正常对照组下降,差异有统计学意义(P=0.022).结论:结膜松弛症患者结膜组织和泪液中MUC5AC和MUC16均下降,对其进一步研究可能揭示结膜松弛症的发病机制.     

结膜松弛症的发病机理研究

结膜松弛症的发病机理是出现了球结膜、泪液和睑缘三者平衡失调,眼表自动反馈调节系统失灵。球结膜组织发生以弹力纤维减少为主要的组织病理改变,泪液中出现蛋白质及酶的异常表达,在瞬目或闭眼时下睑缘张力增高向上推压已经过度变薄、弹性下降、张力降低、与其下方组织结合疏松的球结膜,松弛结膜就会明显堆积在下睑缘上、内、外眦部之间,形成皱褶,突出于眼表曲面,影响泪液的流动、分布、排泄,在松弛结膜上不能形成正常泪膜,而发生干燥、充血、水肿、上皮角化、泪河变窄或残缺不全,泪液不能正常流动到泪湖区,泪湖不能聚泪,泪液不能进入泪点,使泪液排泄出现障碍,泪液清除延缓又可导致大量降解酶的堆积,可能使胶原纤维溶解,弹力纤维变性,引起眼表泪液学异常的病理循环,而发生结膜松弛症。     

泪液蛋白质组学研究进展

蛋白质组学是研究各细胞、组织、器官和机体总的蛋白质的科学,泪液蛋白质组学研究是眼科研究中的一个弱点,现正逐渐被关注.本文就蛋白质组学的概念、研究方法及其在泪液研究中的进展做一综述.     

蓝/黄视野检查法对原发性开角型青光眼正常半侧视野的检测

目的　探讨蓝/黄视野检查法( blue-on-yellowperimetry,BYP)检测早期青光眼视野异常的能力。方法　对普通白/白视野检查法(white on-white-perimetry,WWP)检查结果仅为半侧视野异常的23例23眼原发性开角型青光眼患者进行BYP检查。结果　BYP检查的平均光敏感度、平均缺损及偏离缺失值与WWP检查的平均光敏感度、平均缺损及偏离缺失分别呈明显正相关(r 分别为0.597 0,0.787 9和0.850 7,P<0.000)。WWP检查异常的半侧视野中,BYP检查的视野缺损点数明显多于WWP检查的缺损点数(t=2.1535,P=0.018 4);WWP检查正常的半侧视野中,有52.17%(12/23)的患者出现BYP检查结果异常。结论　BYP检查法能发现WWP检查法尚不能检出的视野缺损。     

老年结膜松弛症中医证素分布的相关性研究

目的 研究老年结膜松弛症(CCh)中医证素分布特点及其与眼表之间的关联性，以求进一步诠释CCh的病因病机。方法 纳入2019年2月—2020年1月上海中医药大学附属普陀医院诊断为CCh的60岁及以上患者250例，均以右眼纳入研究。采用CCh流行病学调查表进行临床流行病学调查，利用上海中医药大学自主研发的“便携式中医智能镜”获取CCh中医证素，并行统计学分析。结果 (1)CCh临床分级与眼表疾病指数量表(OSDⅠ)评分的关系：Ⅰ级OSDⅠ评分为(12.15±3.97)分，Ⅱ级为(20.9±3.82)分，Ⅲ级及以上为(27.42±4.35)分，且差异有统计学意义(F=140.42,P=0.000)。(2)CCh临床分级与泪膜破裂时间(BUT)的关系：BUT<10 s的患者分别为Ⅰ级21例(77.8%),Ⅱ级121例(72.9%),Ⅲ级52例(91.2%)，且差异有统计学意义(χ²=8.175,P=0.017)。(3)CCh临床分级与基础泪液分泌试验(SⅠT)的关系：SⅠT<10 mm的患者分别为Ⅰ级20例(74.1%);Ⅱ级98例(59.0%);Ⅲ级48例...     

结膜松弛症中医证型、证素与眼部症状的关联规则分析

目的 探索结膜松弛症（CCh）中医证型-证素-症状之间的关联性。方法 纳入2019年2月—2020年1月上海中医药大学附属普陀医院诊断为CCh的患者250例，均以右眼纳入研究。制作CCh临床流行病学调查表，收集患者一般信息及眼部症状，由2名中医专家现场进行中医证型判定。利用“便携式中医智能镜”收集患者中医证素。将采集到的临床数据录入IBM SPSS Modeler 18.0进行预处理，形成“数据源-类型-Apriori-网络”数据流，再利用统计软件进行关联规则（AR）统计分析。结果 （1）一般情况：常见的中医证型有5个，分别为肝肾阴虚证、肺阴不足证、气阴两虚证、脾虚气弱证、阴虚湿热证。中医证素有5个，分别为气虚、阴虚、气滞、阳虚、痰湿。眼部症状共8个，分别为异物感、畏光、流泪、眼痒、疼痛、干涩、视疲劳、视物模糊。（2）中医证型与证素的AR分析：关联最强的前5位分别是气阴两虚-阴虚、肝肾阴虚-阴虚、气阴两虚-气虚、脾虚气弱-气虚、肝肾阴虚-气虚。（3）中医证型与眼部症状的AR分析：关联最强的前5位分别是脾虚气弱-流泪、肝肾阴虚-流泪、气阴两虚-视物模糊、气阴两虚-异物感、脾虚气弱-异物感...