苦参查尔酮异构酶的基因克隆与表达分析*

目的为明晰苦参查尔酮异构酶（sfCHI）的结构基因信息及其在苦参黄酮类化合物生源路径中的表达调控机理。方法 本实验以苦参为研究对象，基于其转录组学数据，克隆sfCHI基因并针对该cDNA序列展开生物信息学分析，采用半定量PCR方法检测安徽产苦参不同组织中sfCHI基因表达情况。结果 结果显示苦参sfCHI基因的cDNA序列长度为1 265 bp，含有630 bp的开放式阅读框(ORF)，编码209个氨基酸；序列分析表明sfCHI与狭叶羽扇豆查尔酮异构酶基因相似性最高，达89.95%；进化树分析该基因与大豆、野大豆等植物的亲缘关系较近；半定量PCR结果显示sfCHI基因在苦参根中表达量最低，在叶、叶柄与茎中的表达未见明显差异。结论 本研究通过对苦参查尔酮异构酶的基因克隆与不同组织间的表达分析，初步明确了该基因的序列信息与理化特征，这对进一步研究苦参黄酮类物质生物合成机制将起到积极的推动作用。     

药用植物学实习教学体系改革

药用植物学的教学具有实践性、直观性强的特点,好的实习教学对理论知识具有很好的巩固作用。通过实习基地建设、实习教材建设、实习过程组织与实施、实习考试形式及实习课件等方面进行了积极的探索和有效的改革,并实际运用到教学实践中,收到了显著的效果。     

老鹳草类药材的显微定量研究

目的:实验以东北地区收集到的9种老鹳草类药材为研究对象,采用显微定量的方法对其进行比较鉴别,通过显微特征常数的差别,对不同品种进行相关分析,以达到区别鉴定的目的,从而为该类药材的鉴别提供一种新的手段.方法:采用容量分析手段,以老鹳的草酸钙簇晶为显微特征物,对老鹳草显微特征常数进行测定.结果:得到了老鹳草药材草酸钙簇晶的显微特征常数.结论:该类药材9个品种间的显微特征常数差别较大,可作为区别鉴定的依据;该法结果真实可靠,鉴别中草药品种是科学可行的.     

老鹳草属植物遗传多样性的RAPD分析

目的:分析8种老鹳草属植物遗传多样性和亲缘关系。方法:利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析遗传多样性,UPGMA类平均法聚类分析。结果:筛选出的11个随机引物供试材料DNA随机扩增,共得到145条带。其中多态性条带114条,多态性为78.62%。经聚类分析,可将供试材料分为3类,与传统分类方法差异不大。结论:RAPD技术用于老鹳草属的遗传多样性和分类研究是可行的。     

多花黄精多糖PcUER1基因的克隆与表达分析

目的 探究安徽生产的多花黄精多糖3,5-异构酶/4-还原酶基因（PcUER1）的结构基因信息及其在多花黄精中单糖鼠李糖化合物生源路径中的表达调控机制。方法 以多花黄精为研究对象,基于其转录组学数据,克隆PcUER1基因并针对该cDNA序列展开生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR方法检测多花黄精不同组织中PcUER1基因的表达水平。结果 多花黄精多糖PcUER1基因的cDNA序列长度为900 bp,编码299个氨基酸;序列分析表明多花黄精与百合科虎眼万年青的相似度达到92.03%;实时荧光定量PCR检测结果显示,PcUER1基因在多花黄精的根、须根、茎、叶中表达水平逐渐降低,茎和叶中PcUER1基因表达水平的差异无统计学意义。结论 多花黄精多糖PcUER1基因的活性位点有辅因子结合基序和催化四分体基序,其蛋白表达产物理化性质稳定。     

不同生长期辽宁省栽培五味子指标含量测定

目的：测定辽宁省8个产地不同生长期的五味子果实中5种木脂素类指标成分含量。方法：采用高效液相色谱法对五味子果实木脂素类指标成分含量进行测定。结果：不同生长期,各指标及指标总含量的最高值分别为：五味子醇甲（7.4785±0.4443）mg/g、五味子醇乙（2.7325±0.4542）mg/g、五味子酯甲（0.4397±0.1193）mg/g、五味子甲素（1.9215±0.3762）mg/g、五味子乙素（4.5677±0.6253）mg/g、指标总含量（17.0527±1.0826）mg/g。结论：就样品所得实验结果表明,除五味子酯甲外,其它4种指标成分及5种指标总含量在半成熟期时含量达到最大值。     

牻牛儿苗挥发性成分GC-MS分析

目的:采用GC-MS对长嘴老鹳草中挥发性成分进行分析。方法:用挥发油提取器对长嘴老鹳草中的挥发油进行了提取和测定。采用30m×0.25mm弹性石英毛细管柱,FID检测器,结合GC-MS,对该药材的挥发油进行了分析。结果:长嘴老鹳草挥发油含量为0.0167%,并鉴定了14个化合物,占挥发油总量的93.33%;挥发油的主要成分以十四(烷)酸和叶绿醇为主,占挥发油总量的70.87%。结论:该实验方法稳定、可靠、操作合理,为系统开发、利用该药用植物资源打下了坚实的基础。     

牛蒡根粉减肥、降血脂功效实验研究

目的：观察牛蒡根粉减肥、降血脂的功效。方法：利用高脂营养饲料建立小鼠营养性肥胖模型,对小鼠生化指标、体重、生殖器周围脂肪重量进行测量。结果：牛蒡根粉对营养性肥胖模型小鼠的体重和生殖器周围脂肪重量有明显的降低作用,对小鼠生化指标有显著影响。结论：牛蒡根粉有良好的减肥、降血脂功效。     

多花黄精多糖对STZ诱导的Ⅰ型糖尿病小鼠影响作用研究*

目的研究多花黄精多糖对Ⅰ型糖尿病小鼠血糖、存活率及肝保护等的影响。方法采用连续腹腔注射链脲佐菌素（STZ），建立雌性C57BL/6c小鼠Ⅰ型糖尿病模型。实验分四组：空白对照组、模型组、多花黄精多糖低剂量组（450 zmg·kg-1）和高剂量组（900 mg·kg-1）。实验中检测各组小鼠存活率、体重以及血糖变化。实验结束后，分离小鼠肝脏，采用HE染色法评价肝脏病理变化，实时定量PCR（qPCR）法检测肝脏中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、胰岛素受体底物1（IRS-1）mRNA水平。结果雌性C57BL/6c小鼠连续5天腹腔注射STZ，一周后可使血糖明显升高。在高血糖状态下，模型组小鼠死亡率急剧上升，多花黄精多糖高剂量显著提高模型小鼠的存活率；多花黄精多糖低、高剂量可显著增加模型小鼠体重；同时，多花黄精多糖高剂量有一定程度降低血糖的作用。HE染色结果显示，模型小鼠肝脏病变明显：出现大量的单核炎症细胞浸润，肝细胞发生变性明显。并且，肝细胞结构紊乱。而多花黄精多糖高剂量能够改善模型小鼠肝脏炎症浸润、肝细胞变性以及肝脏结构紊乱等病变。qPCR结果显示多花黄精多糖能显著降低糖尿病肝脏中IL-6，IL-1β mRNA的水平，显著升高IRS-1 mRNA的水平。结论多花黄精多糖显著降低Ⅰ型糖尿病小鼠的死亡率，可能与其改善小鼠体重、降低血糖、肝保护等相关。     

“毒热证”胃溃疡大鼠模型的制备与评价

目的:改进大鼠胃溃疡模型制备方法,探讨胃毒热证动物模型的制备及评价方法,为毒热证研究及清热解毒药物药理作用研究提供动物模型制备方法和检测指标选择参考。方法:将大鼠随机分为正常对照组、假手术对照组、胃溃疡模型组、清热解毒药物治疗组(溃得康组)。采取胃黏膜局部投与乙酸方法制备胃溃疡模型,治疗组术后第2d开始给药,对照组给纯水,分别于术后第1、4、8、12、18d后,取材观察胃溃疡局部改变,取血清,酶联免疫法检测血清炎症因子的含量,取组织进行病理切片,HE染色,观察黏膜炎症情况。结果:模型组大鼠胃黏膜局部溃疡,溃疡底部有附苔,溃疡周边红肿;溃疡部位组织切片病理染色可见黏膜上皮脱落,黏膜下层大量的炎症细胞浸润;血清白细胞介素-6(IL-6)和血清白细胞介素-8(IL-8)含量术后第1d开始升高,持续至12d,明显高于假手术组(P<0.01);溃得康组与模型组相比溃疡面积减小,炎症细胞浸润减少,血清IL-6、IL-8水平降低。假手术组与正常组相比,各项指标均无显著差异。结论:使用胃黏膜局部投与乙酸方法制备的胃溃疡模型急性期为毒热证胃溃疡模型,可用胃黏膜局部的溃疡状态和炎症浸润情况及血清中IL-6、IL-8含量等微观指标进行评价。