蝎毒抗癌多肽对肝癌细胞株中癌症高表达蛋白Hec1的抑制作用

目的:对蝎毒抗癌多肽对肝癌细胞株中癌症高表达蛋白Hec1抑制作用进行研究。方法:小鼠肝癌细胞株Hec1和人肝癌细胞株SMMC-7721。阳性对照选用5-Fu(10μg/ml),蝎毒抗癌多肽选用3个浓度(0.09μg/ml、0.06μg/ml和0.03μg/ml)。结果:蝎毒抗癌多肽的IC50剂量效应关系不明显,细胞毒性最强。随着蝎毒抗癌多肽作用时间的延长,其对肝癌细胞株中癌症高表达蛋白Hec1抑制作用也日益增大。结论:蝎毒能够对肝癌细胞株中的游离钙水平进行影响,能够降低细胞分裂信使的钙离子水平,还能够有效抑制住肝癌细胞株中癌症高表达蛋白Hec1增殖。     

非酒精性脂肪性肝病患者血清Betatrophin水平评估病情严重程度的应用价值

目的研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清Betatrophin水平评估病情严重程度的价值。方法选取我院2017年4月—2018年4月收治的50例NAFLD患者纳入研究对象,设为观察组;另外选取50名体检健康的志愿者作为对照组。对比两组及不同病情严重程度患者促代谢因子(Betatrophin)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平及身体质量指数(BMI)差异,另外以Spearman系数分析NAFLD患者血清Betatrophin与ALT、AST、TC、TG及BMI的相关性。结果观察组Betatrophin、ALT、AST、TC、TG及BMI显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。不同严重程度NAFLD患者Betatrophin、ALT、AST、TC、TG及BMI对比重度中度轻度,差异有统计学意义(P0.05)。经相关性分析血清Betatrophin水平与ALT、AST、TC、TG及BMI呈正相关,均有(P0.05)。结论 NAFLD患者Betatrophin水平呈现出高表达,且随病情严重程度的加重而上升,可用于NAFLD病情严重程度的评估,值得临床关注。     

利用血透超滤液代替血液生化检测透析效果评价

长期以来 ,血液透析工作者为评价透析效果、计算透析充分性和了解病情变化 ,均抽取血液进行生化检测 ,这对一个原有肾性贫血尿毒症患者来说是不适宜的 ,一方面易造成血液浪费 ,加重贫血 ;另一方面易引起血液污染。 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 1年 12月 ,我们对本院 4 3例血液透析患者 131例次血液生化检测的同时 ,同步检测血透超滤液的生化指标 ,以探讨其能否代表血液进行生化检测评价透析效果、计算透析充分性和了解病情变化 ,现报告如下。1　资料与方法1 1　一般资料。 4 3例接受血液透析的患者 ,男2 0例 ,女 2 3例 ,其中慢性肾小球肾炎 31例…     

抗原冲击致敏树突状细胞诱导特异性CTL杀伤Lovo细胞实验研究

目的：本研究以健康人外周血单核细胞为前体细胞,体外诱导其为树突状细胞（DC）,负载直肠癌细胞株Lovo细胞冻融抗原,产生特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic Tlymphocytes,CTLs）,探讨其对Lovo细胞的杀伤作用。方法：联合应用rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-a及rhsCD40L等细胞因子,密度梯度离心法、贴壁法从外周血获取单核细胞并进行诱导扩增,培养出DC,用冻融抗原冲击致敏DC。实验分3组：冻融抗原致敏DC组（Ⅲ组）,未致敏DC组（Ⅱ组）,T细胞组（Ⅱ组）,观察CTL对Lovo细胞的杀伤作用。结果：冻融抗原致敏DC激活CTL的能力显著高于未致敏的DCs组,两组CTLs对Lovo细胞的杀伤率差异有统计学意义（50．9％ vs 24．7%,P〈0．05）。结论：冻融细胞抗原致敏树突状细胞后活化CTLs,有抗肿瘤活性。     

嗜中性粒细胞损害嗅鞘细胞神经修复功能的体外研究

从流产人胚胎中分别培养OECs、星形细胞,健康志愿者外周血浓缩白细胞中分离嗜中性粒细胞。6孔板中,1×103 OECs与1×105 嗜中性粒细胞共孵育48h后,观察OECs的细胞形态和凋亡状况,并收集OECs,RT-PCR检测NGF, BDNF, GNDF基因表达情况;通过OECs和星形胶质细胞的相遇培养实验,检测OECs的迁移能力。结果 共培养处理后,嗜中性粒细胞促使OECs凋亡,使OECs的NGF、BDNF及GNDF的表达显著下降（p<0.01）;在OECs和星形胶质细胞的相遇培养实验中,形成迁移的明显边界。结论 嗜中性粒细胞削弱了OECs在神经再生中的能力。     

蝎毒对人肝癌Bel-7404 细胞端粒酶活性的影响

目的：观察蝎毒(BMK)对人肝癌Bel-7404细胞端粒酶活性的影响。方法：不同浓度的BMK处理体外培养的人肝癌Bel-7404细胞72h,聚合酶链反应一端粒重复扩增(PCR-TRAP)法测定端粒酶活性,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法测定细胞增殖抑制。结果：BMK可抑制Bel-7404细胞端粒酶活性,随BMK浓度增大,端粒酶活性抑制增强。MTT结果显示BMK抑制Bel-7404细胞增殖且抑制有浓度依赖性。结论：端粒酶活性的抑制可能是BMK发挥抗癌活性的作用机制之一,并可作为评价BMK抗肝癌冶疗效果的指标之一。     

嗅鞘细胞诱导树突状细胞成熟的作用研究

目的体外研究嗅鞘细胞(OEC)调节树突状细胞(DC)成熟的作用。方法从流产人胚胎和健康志愿者外周血浓缩白细胞中分别培养OEC和DC。使用DMEM/F-12(5%FBS)培养基,在24孔板中进行10~3OEC、10~3OEC+10~5DC共培养、10~3OEC/10~5DC分室培养、10~5DC或者10~5DC+1μg/mL LPS。在37℃,5%CO_2条件下孵育,48 h后,分别收集培养上清液和DC,用ELISA试剂检测上清中的TNF-α和IL-12p40的含量,流式细胞仪检测DC成熟的表面标志物CD40、CD80、CD86和HLA-DR的表达水平。结果经过10~(-5)mol/L的阿糖胞苷筛选培养12 d,NGFRp75免疫荧光检测表明OEC纯度达到90%以上,RT-PCR检测OEC表达NGF、BDNF、GDNF。OEC作用于DC能够增强DC分泌TNF-α和IL-12p40的表达,DC成熟表面标志物CD40、CD80、CD86和HLA-DR表达增加;同时,细胞因子和成熟表面标志物在分室培养中表达量增加更为显著。结论 OEC体外可诱导DC的成熟,且这种作用为非细胞接触的作用而是OEC通过分泌的可溶性分子作用结果。     

第三代头孢菌素的用药频度与细菌耐药性相关分析

目的分析第三代头孢菌素（简称TGC）的用药频度（DDDs）、临床分离的革兰阴性杆菌（G-杆菌）对TGC的耐药率、G-杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）率以及三者之间的相关性，为合理使用该类抗菌素提供参考。方法以中等城市五家医院3年用药资料和药敏试验结果为研究对象，采用世界卫生组织（WHO）推荐的限定日剂量（Defined daily Dose，DDD）法分析TGC的DDDs；采用纸片扩散法、Mierosean系统的Mic法进行药敏试验；用直线相关分析法考察三者之间的相关性。结果3年TGC总的DDDs为130．64万个治疗日，2000、2001、2002年的DDDs分别为33．35、43．12、54．17万个治疗日；3年共分离出G-杆菌3603株，2000、2001、2002年分离菌株数分别为：1191株、1148株、1264株。3年来G-杆菌对TGC的年均耐药率为40．92％，2000、2001、2002年的耐药率分别为39．04％、41．05％、42．58％；3年G-杆菌年均产ESBLs率为33．67％，2000、2001、2002年分别为29．64％、32．58％、38．45％：DDDs与G-杆菌耐药率相关系数r=0．99，DDDs与G-杆菌产ESBLs率相关系数r=0．98，。G-杆菌耐药率与产ESBLs率相关系数r=0．97。结论DDDs增长过高过快，G-杆菌对TGC的耐药率偏高，G-杆菌产ESBLs率偏高。DDDs与G-杆菌耐药率呈正相关，DDDs与G-杆菌产ESBLs率呈正相关；G-杆菌耐药率与产ESBLs率呈正相关。降低药物的DDDs能降低细菌对药物的耐药率和减少细菌耐药菌株的变异，建议临床采取有效措施，科学合理使用TGC，整体降低TGC的DDDs，进而降低或延缓细菌耐药的蔓延和扩散，保证用药的有效和安全.     

白藜芦醇对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及对HMGBl及TLR4mRNA表达的影响

目的:研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对脓毒症大鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的保护作用及对ALI大鼠肺组织中高迁移率族蛋白(high mobility group box 1 protein,HMGBl)及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)和白藜芦醇组(Res组),采用盲肠结扎穿刺术(Cecal ligation and puncture,CLP)制备脓毒症相关性ALI大鼠模型,造模1 h后,Res组给予40mg/kg,Sham和Sep组给予等量生理盐水,均经股静脉注射。各组分别于2、6、12和24h,取大鼠肺组织,HE染色观察病理形态学变化,RT-PCR检测脓毒症大鼠各器官组织HMGB1及TLR4的mRNA的动态表达变化。结果:Res组在造模后12 h,肺组织病理变化与Sep组相比有所减轻,24 h Res作用达到最强,各种病理改变明显减轻,部分肺组织开始接近正常形态;Res组与Sepsis组比较,肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达明显下调。结论:Res可以通过下调肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达减轻脓毒症诱导的肺损伤。