高致龋变形链球菌寡脱氧核苷酸探针的设计及有效性检测

目的：设计变形链球菌ATCC25175毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针,并进行敏感性和特异性检测。方法：采用斑点杂交法,将体外合成的变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针与经PCR扩增的S.M及7种口腔常见细菌DNA进行杂交检测,然后,使用该探针测试来源于髙龋和无龋个体的唾液样本。结果：探针检测同源性序列敏感性达到1ng水平;与7株口腔常见菌种的杂交结果不存在菌株间的交叉反应,具有较高的特异性。结论：变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针敏感性高而且特异性好,化学性质稳定。同时,观察临床唾液样本测试结果发现,其阳性率与个体龋患现状基本一致。可以进一步考察该探针检测结果与临床病例龋患风险的一致性,为今后用于大规模流行病学调查中龋高危人群的筛查奠定基础。     

类风湿关节炎成纤维滑膜细胞端粒保护蛋白TPP1及POT1 mRNA表达的研究

目的 检测端粒保护蛋白TPP1及POT1 mRNA在类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者及健康人成纤维样滑膜细胞(SFs)的表达水平.探讨其在RA发病机制中可能的作用.方法 体外培养SFs,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测28例RA、15例OA和3名健康者SFs TPP1,POT1mRNA的表达水平,并与疾病活动性等临床指标进行分析.结果 TPP1,POT1 mRNA在RA SFs组的表达低于OA组及健康对照组(P均＜0.05).OA组和健康对照组间差异无统计学意义.TPP1 mRNA在RA SFs的表达水平与RA患者抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及类风湿因子(RF)呈负相关(P均＜0.05),与疾病活动指数(DAS)、红细胞沉降率(ESR)、血清C反应蛋白(CRP)无相关性;POT1 mRNA表达与DAS、CCP、RF均无相关性.结论 端粒保护蛋白TPP1、POT1基因表达的降低可能在RA SFs出现转化细胞特性中发挥重要作用;TPP1基因表达降低可能与RA出现关节侵蚀性改变密切相关.通过调整端粒保护蛋白TPP1、POT1基因的表达水平,有望为RA的治疗寻找新的靶点.     

抗C1q抗体与系统性红斑狼疮患者病情活动的相关性及其临床意义

目的探讨抗C1q抗体（C1qAb）与系统性红斑狼疮（SLE）患者病情活动的相关性及其临床意义。方法用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测98例SLE患者、108例其他风湿病患者及67例健康体检者中血清抗C1qAb,并对SLE患者的其他实验室检测结果进行统计学分析。结果SLE患者血清中抗C1qAb阳性率显著高于其他风湿病及健康体检者（P〈0．05）;其中,抗C1qAb阳性的SLE患者肾损发生率、活动性狼疮发生率及抗dsDNA抗体的阳性率均高于抗C1qAb阴性患者（P〈0．05）。结论血清抗C1qAb与SLE肾脏损害密切相关,其还可作为判断SLE病情活动的指标。     

原发性干燥综合征相关肺间质病变治疗的研究进展

原发性干燥综合征（pSS）是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫疾病,除引起口干、眼干外,还能影响其他组织或器官,导致多系统受累。其中,肺是最常受累的器官之一,易发生相关性肺间质病变（ILD）。pSS相关肺间质病变有着较高的发病率和病死率。但是,pSS ILD早期缺乏典型症状及体征,也无确凿有效的治疗方案。近几年来,pSS ILD引起了国际上广泛的关注。本文就近年pSS ILD的药物治疗现状及进展予以综述。     

针刺治疗90例甲状腺肿的经验介绍

作者等总结了申守田老先生用针刺治疗甲状腺肿90例的疗效,并将其经验作了介绍.90例患者中,男性39例,女性51例.病期最长者14年,最短者半年.所有病例经3-8次的针治后,全愈者有72例;进步者14例;减轻者4例.根据治疗经过来看,发病时间的长短和针刺次数对疗效有密切关系.其针刺取穴及操作手法如下:     

趋化因子受体CXCR4 shRNA真核表达载体的构建

目的：构建趋化因子受体（CXCR4）特异的RNA干扰质粒载体。方法：根据GenBank数据库提供的CXCR4基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA（short hairpin RNAs,shRNA）的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体（pWH1-CXCR4）稳定转染至人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系,并应用RT-PCR和流式细胞术对细胞CXCR4的表达进行检测。结果：与Mc3细胞和转染空白质粒pWH1 Mc3细胞相比,转染pWH1-CXCR4表达载体的Mc3细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论：构建的CXCR4特异性shRNA表达载体可有效的沉默CXCR4基因,为进一步研究CX-CR4表达对涎腺黏液表皮样癌增殖和转移的意义及治疗涎腺黏液表皮样癌奠定了基础。     

规范透明敷料更换操作对降低PICC相关并发症的影响

[目的]探讨临床护士规范透明敷料更换操作对经外周静脉穿刺置入中心静脉导管(PICC)相关并发症发生率的影响。[方法]对护士进行PICC透明敷料更换的专项培训后为128例PICC留置病人实施规范操作,对比培训前132例实施PICC维护病人相关并发症的发生率。[结果]与培训前比较,通过培训规范透明敷料更换操作PICC穿刺部位皮疹、穿刺点红肿、透明敷料松脱等发生率有所下降,差异无统计学意义(P0.05);PICC透明敷料区域皮肤损伤发生率下降,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]通过对护士PICC透明敷料更换操作进行专项培训,规范其操作流程,可提高病人PICC维护质量,降低PICC相关并发症的发生率,提高护理质量。同时可增加病人舒适度,减轻护士工作量。     

miR-182-5p和自噬在外周血单个核细胞和THP-1细胞痛风性关节炎模型炎症反应中的研究

目的:探讨miR-182-5p及自噬参与原发性痛风性关节炎发生的可能机制.方法:采用尿酸盐(MSU)晶体刺激健康男性外周静脉血建立痛风炎症模型,在0、1、2、4、6、8 h分离血浆及提取外周血单个核细胞(PBMCs).培养THP-1细胞,给予MSU晶体刺激建立痛风炎症模型,分别在0、3、6、9、12 h时间点收集细胞及上清液.实时荧光定量PCR检测PBMC和THP-1中IL-1βmRNA、linc00173、linc00963、miR-182-5p和LC3-2 mRNA水平;Western Blot技术检测IL-1β蛋白和LC3-2蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测血浆和上清液中IL-1β蛋白浓度.结果:MSU刺激健康男性外周血后PBMCs中IL-1βmRNA水平在1、2、4、6、8 h较0 h增高(P<0.05),血浆IL-1β蛋白浓度水平在1、2、4、6 h较0 h增高(P<0.05),PB-MCs中IL-1β蛋白水平在2、4、6、8 h较0 h增高(P<0.05).PBMCs中linc00173水平在1、2、4 h较0 h增高(P<0.05),linc00963水平在1、2 h较0 h增高(P<0.05),miR-182-5p水平在4 h较0 h降低(P>0.05),在8 h较0 h增高(P<0.05).PBMCs中LC3-2 mRNA水平在4、6、8 h较0 h增高(P<0.05);LC3-2蛋白水平在6、8 h较0 h增高(P<0.05).MSU刺激THP-1细胞:THP-1细胞中IL-1βmRNA水平和上清液IL-1β蛋白浓度在3、6、9、12 h较0 h增高(P<0.05),THP-1细胞IL-1β蛋白水平在9、12 h较0 h增高(P<0.05).linc00173水平在9、12 h较0 h增高(P<0.05),miR-182-5p水平在6 h较0 h增高(P<0.05).LC3-2 mRNA水平在6、9、12 h较0 h增高(P<0.05),LC3-2蛋白水平在12 h较0 h增高(P<0.05).结论:miR-182-5p可能与linc00173和linc00963相互作用,通过调控自噬参与痛风炎症反应.     

改良一步法分离变形链球菌RNA

目的快速、高效分离高质量变形链球菌RNA。方法溶菌酶处理变形链球菌后加入10%SDS,再经沸水浴1~2min可快速裂解细菌;裂解产物以一步法分离RNA。琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计观察和测量RNA完整性及浓度。结果与其他方法比较,该法所获RNA产量高,几乎达30μgRNA/109细胞且无DNA污染。反转录(RT)-PCR证实mRNA的完整性好。结论改良一步法简便、经济、稳定,所得RNA可用于后续研究。     

人牙釉质和牙骨质获得性膜的实验研究

牙齿的表面被清洁以后,很快被选择性吸附的唾液蛋白质形成的一层薄膜所覆盖,这层薄膜叫获得性膜(简称获膜)。他与牙齿紧密相连,因而与牙齿的健康密切相关。为了研究获膜在龋病发生中的作用以