沙眼衣原体外膜蛋白2重组蛋白的表达纯化和免疫性鉴定

目的表达沙眼衣原体外膜蛋白2,纯化表达产物,并对其免疫性进行鉴定。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术获得沙眼衣原体D型外膜蛋白2第167～434位氨基酸的编码基因片段,将此片段克隆于表达载体pET28b(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDSPAGE、蛋白印迹试验分析表达产物,亲和层析法纯化重组蛋白;重组蛋白免疫家兔以检测其免疫原性。结果重组质粒酶切分析及DNA测序证实成功构建pET28b(+)/Omp2aa167～aa434表达质粒;通过优化表达和纯化条件,获得了相对分子质量约为35.0×103纯化蛋白产物,蛋白印迹试验证实该重组蛋白能与Ct感染者阳性血清反应;ELISA法测定免疫血清特异性抗体效价在1∶1280以上。结论表达的重组外膜蛋白2aa167～aa434具有良好的免疫性。     

重症监护病房病原菌分布及耐药性分析

目的 了解医院近2年重症监护病房(ICU)病原菌分布及其耐药情况.方法 收集2007～2008年ICU送检的1013份标本,采用API鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验.结果 共分离出562株病原菌,阳性率55.5%,革兰阴性菌构成比明显高于革兰阳性菌,最常见的革兰阴性菌分别是铜绿假单胞菌(21.0%)、鲍氏不动杆菌(16.7%)、大肠埃希菌(8.2%)、产酸克雷伯菌(7.1%)、肺炎克雷伯菌(6.0 0A)、嗜麦芽寡养单胞菌(5.2%)与阴沟肠杆菌(4.6%);在革兰阳性菌中以葡萄球菌属和肠球菌属为主;主要革兰阴性杆菌对头孢哌酮/舒巴坦均敏感,而对其他多数常用抗菌药物耐药,肠杆菌科中产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗菌药物耐药率明显高于非产ESBLs菌株,葡萄球菌属对万古霉素、替考拉宁等敏感;耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)对常用抗菌药物耐药性均高于对甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS),肠球菌属对多数常用抗菌药物耐药,仅对万古霉素与喹奴普汀/达福普汀敏感.结论 调查结果表明,ICU病原菌以革兰阴性菌为主,检出菌均存在严重耐药问题,及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要.     

湖南衡阳地区呼吸道感染革兰阴性杆菌的菌群分布及耐药性分析

目的了解本院近2年呼吸道感染革兰阴性杆菌菌群分布及常见致病菌的耐药情况。方法收集本院2006年10月~2008年10月临床送检的5914份痰标本,采用API鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验。结果共分离出1386株革兰阴性杆菌,最常见的呼吸道革兰阴性杆菌是铜绿假单胞菌(31.0%),其次是鲍曼不动杆菌(14.2%)、大肠埃希菌(12.6%)、肺炎克雷伯菌(11.3%)、阴沟肠杆菌(8.4%)、产酸克雷伯菌(7.6%)与嗜麦芽寡养单胞菌(4.6%)。主要革兰阴性杆菌均对头孢哌酮/舒巴坦敏感,且除嗜麦芽寡养单胞菌外对亚胺培南和美罗培南也均敏感。各主要致病革兰阴性菌对替卡西林、替卡西林/克拉维酸、头孢他啶、环丙沙星、头孢吡肟、哌拉西林/三唑巴坦、哌拉西林、庆大霉素与妥布霉素均耐药。产酸克雷伯菌产ESBLs的菌株高达52.8%,大肠埃希菌为46.0%,肺炎克雷伯菌为38.5%,肠杆菌科中产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗生素耐药率明显高于非产ESBLs菌株。产ESBLs和非产ESBLs肠杆菌科细菌均对替卡西林、头孢噻吩、复方磺胺甲唑与阿莫西林耐药,而对亚胺培南、美罗培南与头孢哌酮/舒巴坦均敏感。结论呼吸道分离的革兰阴性杆菌均存在严重耐药问题,及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要。     

降钙素原指导重症监护室脓毒症患者抗生素治疗的临床价值

目的:为促进重症监护室脓毒症患者合理进行抗生素治疗,探究降钙素原(PCT)检查用于指导用药的意义。方法:以2015年11月~2016年9月我院重症监护的150例脓毒症患者为研究对象,采用双盲法分为常规组、治疗组,每组75例。常规组患者给予一般用药,治疗组患者给予降钙素原动态监测,根据降钙素原指导使用抗生素,对比两组患者重症监护时间、药物使用时间、ICU费用,统计抗生素用药期间不良反应、死亡情况。结果:治疗组较常规组ICU费用低、药物使用时间短、重症监护时间少,P<0.05;同时常规组不良反应、死亡发生率为16.0%、12.0%,明显高于治疗组的6.7%、2.7%,P<0.05。结论 :临床对重症监护室脓毒症患者进行降钙素原检查,能有效指导临床抗生素合理使用,减少不良反应、死亡情况发生。     

轮状病毒性肠炎护理体会

目的探讨护理干预对轮状病毒性肠炎的疗效。方法选择2012年6月-2013年6月我院儿科收治的100例轮状病毒性肠炎患儿,随机分为两组,对照组50例采用常规内科治疗及常规护理,干预组50例在常规内科治疗的基础上进行综合护理干预。比较两组干预后临床疗效的差异,并评价其住院方面及护理满意度。结果护理后干预组临床总有效率96.0%高于对照组80.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）;干预组住院天数及费用低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;干预组护理满意率94.0%高于对照组78.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论护理干预对轮状病毒性肠炎的疗效显著,具有较高的临床有效率,患儿住院费用及天数也较少,能够显著增加患儿对护理的满意度,进而改善患儿生活质量及治疗依从性,值得临床推广。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测伤寒杆菌脂多糖O抗体的研究

我们试用ELISA 法检测了抗伤寒杆菌脂多糖O抗体。结果表明,与肥达氏试验相比,本法有较高的特异性,敏感性和重现性,具有快速、简便、经济和用血置少等优点。材料和方法1.既往伤寒病人(平均发病5～6月后,均分别经血和粪培养阳性及肥达氏试验效价增高而证实)血清109份,发病一周以内伤寒病人的血清3份,健康人血清43份,非伤寒发热病人血清6份。2.热酚——水萃取法提取伤寒杆菌的脂多糖抗原,751型分光光度计测提取液的蛋白质浓度。每毫升包被抗原溶液含蛋白质10~μg。3.ELISA 操作程序如前报道。结果和讨论1.ELISA 特异性:(1)用10μg/ml牛血清白蛋白代替伤寒杆菌脂多糖抗原包被反应板凹     

高效离子色谱法测定二氧化氯消毒剂中二氧化氯含量

目前开发的稳定性二氧化氯消毒剂中二氧化氯（ＣｌＯ２）以稳定的亚氯酸盐（ＣｌＯ２－）形式存在［１,２］。本文以阴离子色谱分离,电导检测可同时分析该消毒剂中ＣｌＯ２－、ＣｌＯ－、ＣｌＯ３－、Ｃｌ－离子,能有效排除现在常用的ＣｌＯ２含量测定方法的干扰,如碘...     

沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答

目的构建沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗,并观察其诱导小鼠产生的体液免疫和细胞免疫。方法将核酸疫苗(pcDNA3.1MOMP)或对照空质粒(pcDNA3.1)注射于4～6周龄小鼠后腿股四头肌,每次剂量为100mg。间隔2周加强免疫2次。末次免疫后,ELISA法测定脾淋巴细胞培养上清液中IFNγ及小鼠血清中抗MOMP水平;MTT法测定脾淋巴细胞特异性增殖反应。结果小鼠接种核酸疫苗后,能产生特异性抗体,第3次免疫后抗体最高滴度达1∶1024,培养上清液中IFNγ达(532.0±45.4)pg/mL;实验组小鼠脾淋巴细胞刺激指数为3.94±0.25,其抗原特异性反应明显高于对照组。结论沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗能刺激机体产生特异的细胞免疫和体液免疫。     

接种狂犬疫苗后1369例抗体水平分析

我站自１９９３年开始对接种浓缩狂犬病疫苗者进行接种前、后抗体水平测定，至１９９７年９月共检测１３６９例，结果报告如下：１对象１３６９例被犬、猫、蝙蝠等咬、抓伤后接种浓缩人用狂犬疫苗者，疫苗为卫生部长春生物制品研究所和上海生物制品研究所生产，均在效期内...     

深化教学改革 加强《医学微生物学》精品课程建设

精品课程建设是教学质量工程的重要组成部分，我们从教学内容、教学方法和教学手段、师资队伍、教学与科研良性互动等方面进行实践，加强医学微生物学精品课程的建设。