沙眼衣原体pORF5 蛋白通过激活PI3K / Akt 信号通路抑制细胞凋亡

目的:探讨沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5 蛋白对细胞凋亡的影响,并进一步分析其分子机制,为阐明Ct 致病机制提供实验依据。方法:pGEX-6p/ pORF5 重组质粒转化XL1-blue 大肠杆菌,IPTG 诱导表达GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B 纯化及蛋白酶切除GST 标签后得到pORF5 蛋白。用不同浓度的pORF5 蛋白刺激HeLa 细胞,Western blot 检测不同时间Bax 和Bcl-2 的表达水平以及PI3K/ Akt 磷酸化水平,Hoechst 33342 及流式细胞技术分析细胞凋亡情况;HeLa 细胞经PI3K/ Akt 特异性抑制剂LY294002 预处理1 h 后,再用pORF5 蛋白刺激24 h,测定细胞凋亡率,并进一步分析凋亡相关蛋白Bax 和Bcl-2 的表达水平及PI3K/ Akt 磷酸化水平。结果:凋亡相关蛋白Bax 和Bcl-2 的表达变化与pORF5 蛋白浓度呈现一定的浓度和时间依赖性,当pORF5 蛋白浓度达10 μg/ ml 时,Bax 表达下调,Bcl-2 的表达上调,当升高至15 μg/ ml 时,Bax 和Bcl-2 的表达量变化最明显;15 μg/ ml 的pORF5 蛋白刺激HeLa 细胞24 h,Bax 和Bcl-2 表达变化最明显;流式细胞检测结果显示:pORF5 蛋白刺激组较TNF鄄琢处理组和未处理组细胞凋亡率分别降低了27.3% (P<0.01)和8.4% (P<0.05);Akt 在pORF5 蛋白刺激15 min 后发生磷酸化,30 min 后磷酸化水平达到峰值,用PI3K 抑制剂LY294002 预处理Hela 细胞后,发现Akt 的磷酸化显著减少,Bax 蛋白表达明显上调,Bcl-2 表达明显下调;LY294002 处理组细胞凋亡率相比于对照组增加了13.0% (P<0.01)。结论:pORF5 蛋白通过激活PI3K/ Akt 信号通路调节Bcl-2 和Bax 蛋白的表达抑制细胞凋亡。     

参麦注射液治疗病毒性心肌炎的临床疗效及其对血清TNF-α、IL-6的影响研究

目的 观察参麦注射液治疗病毒性心肌炎的临床疗效,以及对血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6( IL-6)的影响.方法 将68例病毒性心肌炎患者分成治疗组和对照组,对照组给予一般治疗(休息、高营养、高热量饮食)、保护心肌[1,6二磷酸果糖100～250mg·kg-1·d-1静脉滴注,维生素C100～200mg·kg-1·d-1,用10％葡萄糖注射液稀释后缓慢静脉滴注,复合维生素B口服]等综合治疗;治疗组在对照组的基础上加用参麦注射液60 ml/d静脉滴注,疗程2周.观察患者的临床疗效,同时采用酶联免疫吸附法检测治疗前后血清TNF-α、IL-6浓度.结果 治疗2周后,治疗组有效率、心功能和心肌酶谱指标改善方面均优于对照组(均P＜0.05).治疗后两组血清TNF-α、IL-6均较治疗前低(均P＜0.05);且治疗组浓度低于对照组浓度(均P＜0.05).结论 参麦注射液治疗病毒性心肌炎临床疗效显著,其作用机制可能与其能抑制患者血清TNF-α和IL-6的合成与释放有关.     

连续传代对鼠衣原体生长相关性状及其毒力影响的初步研究

目的探讨体外特殊条件下鼠衣原体(Chlamydia muridarum,Cm)连续传代培养后在感染性、生长发育以及致病性等生物学性状上的变化,为筛选减毒活疫苗,筛查毒力相关基因提供依据。方法将实验室Cm野生株(G0)通过常规细胞培养,在辅助或不辅助培养条件下交替连续传代后,将亲本株G0与获得的传代株G28进行衣原体感染离心依赖性、细胞吸附能力、衣原体感染细胞生长曲线、衣原体形成的噬斑大小以及两种菌株在感染小鼠生殖道后所形成的输卵管病变情况进行检测。结果与亲本株G0相比,传代株G28对感染离心条件的依赖性显著下降(P<0.05);对感染细胞的吸附能力却明显上升(P<0.05);G0与G28在感染细胞32 h内的生长曲线差异并无统计学意义;在感染细胞中所形成的噬斑大小也无明显区别;但体内毒力试验中,G0感染小鼠后致输卵管病变率为87.5%,而G28的输卵管病变率仅为37.5%,两者形成差异有统计学意义。结论Cm传代株G28与亲本株G0相比,在感染能力显著增强的情况下,其致病性却显著降低,为后续鉴定毒力基因,进一步提取基因型单一的减毒株并应用于衣原体减毒活疫苗带来了希望。     

针刺联合意拳养生桩训练治疗慢性非特异性腰痛40例

目的探究针刺联合意拳养生桩训练对慢性非特异性腰痛(CNSLBP)的疗效。方法选取2019年1月—2020年12月在惠安县中医院针灸科就诊的CNSLBP门诊患者80例,采用随机数字表法分为对照组与观察组各40例。对照组采用常规针刺治疗,观察组在对照组治疗基础上配合意拳养生桩训练,2组均隔日治疗1次,疗程均为2个月。治疗前后及治疗后30 d采用视觉模拟评分(VAS)评价患者的腰痛程度,采用焦虑和抑郁评分(HADS)评价患者的焦虑与抑郁程度,采用Oswestry功能障碍指数(ODI)评价患者的腰背功能障碍程度。结果与治疗前比较,治疗后2组VAS评分、HADS评分及ODI评分均明显降低(P均<0.05),观察组比对照组降低更为明显(P均<0.05);与治疗后比较,治疗后30 d观察组VAS评分、HADS评分及ODI评分均明显降低(P均<0.05),治疗后30 d对照组VAS评分、HADS评分及ODI评分反而升高(P均<0.05)。结论针刺联合意拳养生桩训练法治疗CNSLBP可有效改善腰痛,缓解焦虑和抑郁症状,增强腰背活动功能,具有远期疗效。     

蒙医治疗子宫肌瘤的临床常用药

子宫肌瘤是一种常见的妇科良性肿瘤。蒙医认为,子宫肌瘤是在子宫和卵巢形成大小不一的肉块,主要以经血淋漓、白带增多、小便艰涩为特点的疾病,主要用蒙药治疗,配合五疗,效果良好且不良反应少。本文总结了吉祥丸、朝努音·哈日木格-7、沙棘十一味散、十味贝齿灰散、暖宫七味丸等几种常用的妇科蒙药复方,以期为其临床应用提供借鉴及参考意义。