UHPLC-MS/MS法测定瑞戈非尼中两种痕量基因毒性杂质

目的 建立UPLC-MS/MS方法测定瑞戈非尼中两类基因毒性杂质（3-氟-4-氨基苯酚（SM2）、3-三氟甲基-4-氯异氰酸苯酯（SM3））的含量。方法 采用色谱柱Agilent RRHD C₁₈（2.1mm ×100 mm,1.8 μm）,流动相为 0.05% 甲酸水－甲醇,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温为35℃;采用Agilent 1290-6470A液质联用仪和电喷雾离子源（AJS ESI）源检测,正负离子模式采集数据。结果 本方法的专属性、线性与范围、定量限与检测限、准确度、精密度及稳定性均符合中国药典的验证指标。结论 本方法操作简便,结果可靠,用于两批瑞戈非尼中潜在毒性杂质（3-氟-4-氨基苯酚、3-三氟甲基-4-氯异氰酸苯酯）的测定。两批样品中均未检测到SM2,而基因毒性杂质SM3的含量分别为13.6×10^-6和41.4 ×10^-6。     

多重耐药革兰阴性杆菌重症肺炎临床分析

目的对感染革兰阴性杆菌的重症肺炎患者进行多重耐药性分析,探讨重症肺炎患者的危险因素和预后。方法对大连市中医医院2013年3月—2014年7月期间确诊重症肺炎的126例患者进行细菌培养分析并纳入革兰阴性杆菌感染的重症肺炎患者40例,根据是否多重耐药将其分为多重耐药组和非多重耐药组,对两组患者住院期间的理化指标、急性生理学和慢性健康评分(APACHE-II)、住院时间及死亡率进行对比分析。结果 126例重症肺炎患者共分离细菌182株,其中革兰阴性菌129株,革兰阳性菌53株。抗生素耐药结果显示5种主要的革兰阴性菌对庆大霉素的耐药率均较高,鲍曼不动杆菌对常用的抗生素耐药明显,大肠埃希杆菌对环丙沙星耐药率较高,嗜麦芽寡养单胞菌对美洛培南完全耐药,同时对头孢噻肟、亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林均有较高的耐药率。多重耐药组22例患者分离出多重耐药革兰阴性杆菌33株,分别为鲍曼不动杆菌11株(33.3%)、铜绿假单胞菌8株(24.2%)、肺炎克雷伯杆菌7株(21.2%)、大肠埃希杆菌5株(15.2%)和嗜麦芽窄假单胞菌2株(6.1%)。多重耐药组患者的APACHE-Ⅱ评分、住院时间以及死亡率方面均明显高于非多重耐药组(P0.05)。两组患者理化检查指标除血清白蛋白多重耐药组明显低于非多重耐药组外(P0.05),其余指标差异均无无统计学意义(P0.05)。结论多重耐药革兰阴性杆菌重症肺炎患者病死率明显升高,在临床治疗上要综合分析多种因素,加强对革兰阴性杆菌的药敏检测,合理选择抗生素,改善患者预后。     

宫颈癌细胞PAX1基因甲基化的CRISPR靶向调控系统的构建

目的:建立PAX1基因甲基化的CRISPR靶向调控系统。方法:首先,通过甲基化特异性PCR（MSP）测定宫颈癌细胞系（CaSki,SiHa）及正常细胞（人胚肾细胞HEK293T）中 PAX1基因启动子的DNA甲基化水平;通过荧光定量PCR（RT-PCR）和免疫印迹（Western blotting）分别检测上述细胞系的mRNA及蛋白表达。然后,在PAX1高甲基化的宫颈癌细胞共转染sgRNA（single guide RNA）和dCas9-Tet1质粒,采用焦磷酸测序（Pyrosequencing）和 RT-PCR分别检测其基因甲基化和表达水平的改变。最后,结合生物信息学预测和RT-PCR评估该CRISPR系统的脱靶效应。结果:与HEK293T细胞相比,宫颈癌细胞的PAX1基因启动子呈现高甲基化,且其mRNA（CaSki:t=9.13;SiHa:t=12.31;P<0.05）和蛋白表达水平（CaSki:t=16.72;SiHa:t=11.81;P<0.05）均降低。在CaSki及SiHa细胞系中,去甲基化sgRNA3（act-sgRNA3）组调控最显著,其PAX1基因的甲基化水平在CaSki和SiHa细胞系中分别下降了22.21%（t=6.65,P<0.05）、19.62%（t=17.00,P<0.05）,其mRNA表达水平均显著上调（P<0.05）。且该系统脱靶效应基因的表达差异均小于2倍。结论:本研究成功建立了PAX1基因甲基化的CRISPR靶向调控系统,可有效的降低其甲基化水平,增强其内源性的表达水平。     

塞来昔布联合帕瑞昔布钠超前镇痛方案对胸腰椎后路手术术后镇痛的效果观察

目的:观察塞来昔布联合帕瑞昔布钠超前镇痛方案治疗胸腰椎后路手术后早期疼痛的效果.方法:2011年5月～2012年4月将拟接受手术治疗且无消化性溃疡、冠心病病史的138例胸腰椎患者(胸腰椎骨折57例,腰椎间盘突出症49例,腰椎管狭窄症21例及退变性腰椎滑脱11例)随机分为3组,每组46例,A组为术后塞来昔布镇痛方案组,B组为术后帕瑞昔布钠镇痛方案组,C组为塞来昔布联合帕瑞昔布钠的围手术期超前镇痛方案组.3组患者病种分布情况、性别、年龄、体重及术前疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)均无统计学差异(P＞0.05).所有患者均接受全麻下胸腰椎后路减压、椎间植骨融合或后外侧植骨融合、椎弓根螺钉内固定术,并分别按照各自组内用药方案予以镇痛.记录每例患者术后6、12、24、48、72h的疼痛评分、术后追加盐酸曲马多及盐酸哌替啶用量和发生不良反应的例数,并进行统计学分析.结果:C组术后各时间点镇痛效果显著优于A组和B组(P＜0.05);术后追加镇痛药物用量C组显著小于A组和B组(P＜0.05);发生不良反应例数C组显著少于A组(P＜0.05),C组发生不良反应例数与B组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:塞来昔布联合帕瑞昔布钠超前镇痛方案对胸腰椎后路手术术后早期疼痛效果良好,其镇痛作用强于单纯应用塞来昔布或帕瑞昔布钠,并可显著减少追加镇痛药物的用量,不良反应发生率较低.     

肝性皮质盲二例

肝性皮质盲又称肝脑眼综合征,是由于肝功能衰竭所致代谢紊乱、大脑功能障碍而出现一过性双目失明的表现,临床较少见,我院近期收治2例,现报道如下: 1 病例简介 病例一:患者女,43岁,退休职工.因“头昏伴视物模糊,吐词不清4+h”于2012年12月5日人院.10+年前曾诊断为乙肝肝硬化失代偿期,患病以来多次因消化道出血、腹水住院治疗.     

不同柴胡剂量在方剂中作用规律初探

本文通过对经典方剂中柴胡剂量变化以及功效的分析,总结出其应用中存在一定的量效关系,即大剂量疏散退热,中等剂量疏肝解郁,小剂量引经、升阳举陷;此外,不同柴胡剂量通过特定配伍可使其作用更有效发挥。     

一起不明原因学生食物中毒流行病学调查

2012年3月,金华市某中学校多名学生出现食物中毒症状,金华市疾病预防控制中心接到报告后,迅速组织专业人员赶赴现场进行调查处理.现将调查结果报道如下. 1 基本情况 该中学位于金华市郊,目前在校学生702名(住宿生509名),教职工89名.2月29日18:00起,该校陆续有学生出现腹痛、腹泻症状,截止3月1日18:00,腹泻(≥3次/d)并伴大便性状明显发生改变的学生有12人,之后无新病例发生.多数学生服用校保健医师下发的泻立停后,很快痊愈,无住院病例和危重病例.截止3月2日9:00,全部学生均康复.     

Comparasion of the effects of insulin-like growth factor-1 receptor inhibitor and insulin on renal interstitial macrophage infiltration in mice with type 2 diabetic kidney disease

<正>Objective To compare the effect of insulin-like growth factor-1 receptor (IGF-1R) inhibitor and insulin on renal interstitial macrophage infiltration in mice with type 2 diabetic kidney disease (DKD) mice.Methods Twenty-four male C57BL/6 mice were selected.After 1week of adaptive feeding,6 rats were randomly selected