乙酰肝素酶mRNA在肝细胞癌中的表达及点突变研究

目的 探讨乙酰肝素酶（HPA）mRNA在肝细胞癌（HCC）中的表达及点突变的意义。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测33例HCC中HPA的表达，用T—A克隆测序法检测其扩增产物有无突变，并与HCC临床病理学指标分析。结果 有16例癌组织HPA表达阳性，阳性率（48．5％）显著高于癌周肝组织（P〈0．01）。术后转移复发组HPA阳性率显著高于无转移复发组（P〈0．01）。7例PCR产物测序发现有4例均存在2处点突变，其中一处为有义突变，突变率为57．1％。结论 HCC中HPAmRNA表达率增高，可作为HCC术后预测转移复发的一个重要指标。HPA基因点突变可能是其表达率增高的原因之一。     

胆漏的原因及防治

目的探讨胆漏的原因及防治策略。方法回顾性分析1993年1月至1998年12月收治的22例胆漏病人发生胆漏的原因、治疗方法及效果。结果19例首选非手术治疗，其中1例死亡，3例中转手术治疗，余15例治愈，非手术治愈率79％(15/19)。3例首选急诊手术治愈。3例中转手术病人中，1例再手术时遗漏对胆管结扎伤的处理，余2例治愈。全组总治愈率为91％(20/22)。结论胆漏多发生于胆囊切除术及T管拔除后，主要与炎症、粘连、解剖变异和操作不仔细有关。预防应从首次手术前、中、后三个环节着手。胆漏发生后应根据胆漏大小、病情轻重选择手术治疗和非手术治疗。     

肝素酶通过诱导血管内皮细胞凋亡促进肝癌细胞跨内皮迁移

目的 探索肝癌肝素酶（HPSE）对微血管内皮细胞（MVECs）凋亡及跨细胞迁移的影响。方法 用qRT-PCR和Western blot法从HepG2,BEL-7402和HCCLM3三种肝癌细胞中筛选高表达HPSE的肝癌细胞;构建含有HPSE之RNA干扰序列的慢病毒载体（LV-HPSE -RNAi-1249-2, RNAi组）,用含有阴性对照序列的慢病毒载体（LV-HPSE-Control, Control组）作为对照,分别感染肝癌细胞,并验证感染效率。用人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）代表肝癌MVECs,用Transwell小室行肝癌细胞跨内皮迁移试验;肝癌细胞和HUVECs细胞非接触共培养24 h,应用CCK-8法检测内皮细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡情况,电镜观察细胞形态。肝癌细胞腹腔注射法制作裸鼠肝癌模型,观察肝癌MVECs凋亡及癌细胞跨内皮成瘤情况。结果 从3种肝癌细胞中筛选出高表达HPSE的HCCLM3肝癌细胞。慢病毒载体分别感染HCCLM3细胞72 h后,荧光显微镜显示细胞感染效率达到70%以上,qRT-PCR和Western blot 法检测RNAi组肝素酶 mRNA和蛋白表达下降（P<0.05）。RNAi组肝癌细胞跨内皮迁移率为0.39,显著低于Control组的0.62（P<0.01）。HCCLM3细胞与HUVECs非接触共培养,RNAi 组内皮细胞成活率为1.14,显著高于Control组的0.77（P<0.05）;RNAi组凋亡指数3.94±1.51明显低于Control组（12.53±0.55） （P<0.05）。透射电镜示RNAi组细胞形态大致正常;Control组内皮细胞体积变小、变形,胞膜有发泡现象;染色质浓缩、边缘化,部分分割成块状,并见凋亡小体。实验裸鼠全部成活,Control组6只肝组织中均出现GFP标记的肿瘤细胞,镜下成瘤率100% （6/6）,显著高于RNAi组成瘤率（33.3%,2/6）（P<0.05）。光镜下Control组肝组织内可见肝癌细胞,部分血管内皮细胞坏死,胞浆可见空泡,核质浓缩;RNAi组肝组织内罕见肝癌细胞,内皮细胞基本正常。结论 肝癌肝素酶可能通过诱导血管内皮细胞凋亡而促进癌细胞转移。     

双胆囊管畸形病例报告1例

双胆囊管是非常罕见且缺乏特异性临床症状的畸形,一般于术中确诊,且在术中极易因识别错误而导致胆管损伤,手术过程中需仔细游离胆囊管,应采取胆囊管逆行追踪法,追踪到胆囊管是否开口于胆囊,遵循不明确的组织不电凝、不切断的原则,是避免胆道变异损伤的关键。本文报道了1例因胆囊结石行胆囊切除术的患者,于术中发现存在双胆囊管畸形的临床治疗过程,希望对临床工作有所提示。     

腹腔镜胆总管探查术治疗胆总管结石伴轻、中度急性胆管炎的临床疗效

目的:探讨腹腔镜胆总管探查术(LCBDE)治疗胆总管结石伴轻、中度急性胆管炎的临床疗效.方法:收集2014年1月～2019年10月弋矶山医院肝胆外科收治的366例胆总管结石患者的临床资料.366例患者中,126例伴有轻、中度急性胆管炎者设为研究组,240例无急性胆管炎者设为对照组.比较两组患者手术情况、术后情况及并发症...     

有上腹部手术史患者腹腔镜胆总管探查取石术的可行性分析

目的 探讨有上腹部手术史患者行腹腔镜胆总管探查取石术的可行性及临床效果.方法 选取安徽医科大学附属巢湖医院普外科2014年3月至2017年3月43例有上腹部手术史实施腹腔镜胆总管探查术患者作为观察组,同时选取同期60例无上腹部手术史实施腹腔镜胆总管探查术患者作为对照组.观察两组患者术中出血量、腹腔引流量、手术时间及住院时间情况,记录两组术中转开腹情况及术后并发症发生情况;分别于术后1个月经窦道胆道镜检查结石是否残留,术后2～20个月随访结石复发情况,比较两组手术情况、中转开腹率、术后并发症、结石残留率及复发率.结果 与对照组患者比较,观察组患者术中出血量(123.1±21.4)mL、腹腔引流量(121.0±23.3)mL、手术时间(2.0±0.4)h、住院时间(9.3±1.5)d均增加,差异有统计学意义(P<0.05).观察组术中4例(9.30％)中转开腹(其中3例因胆囊三角严重粘连,1例因小肠严重粘连),对照组1例(1.67％)因确诊腹茧症而中转开腹,差异无统计学意义(P>0.05).术后观察组出现并发症3例(6.98％),对照组2例(3.33％);术后1个月,经窦道胆道镜检查两组患者结石均取净;术后随访2～20个月,观察组出现结石复发3例(6.98％),对照组2例(3.33％),差异均无统计学意义(P>0.05).结论 临床上对有上腹部手术史患者行腹腔镜胆总管探查取石术效果显著,虽然术中中转开腹率较高,但手术适应证范围得以扩大且患者术中并发症及术后复发率并未明显增加,临床上可根据患者实际情况合理选择手术方案.     

浅谈光纤通信传输损耗

本文主要对光纤传输损耗产生的原因进行分析,并提出了相应的解决对策。     

精准外科时代胆管结石的诊断与治疗

精准外科不是一种纯粹的技术,而是一种现代外科新理念,也是胆管结石诊断和治疗的需要.胆管结石无论是诊断还是治疗,均应始终体现和贯彻精准理念,努力提高各种诊疗技术水平,对现有技术条件进行升级改造,综合应用多种技术手段进行精准诊断和治疗,并实现诊治方案个体化.     

可调控BMP-2表达的单质粒载体的构建及其在ADSCs中的表达研究

目的:拟构建可调控骨形态发生蛋白（BMP-2）表达的单质粒慢病毒表达载体,为研究骨修复过程中的成骨性能打下基础。方法:通过基因重组技术获取含BMP-2的慢病毒表达载体,通过菌落PCR和基因测序鉴定;将慢病毒表达载体与包装载体pMD2.G和pSPAX在293T细胞中包装,收集病毒液,转染大鼠脂肪基质干细胞（ADSCs）。首先,从细胞形态学和MTT来初步分析诱导剂多西环素（Dox）不同浓度对ADSCs活性的影响;其次,缩小Dox浓度范围,在荧光显微镜下通过荧光表达强度判断Dox对ADSCs中基因表达的诱导效率,相同条件下,qRT-PCR分析BMP-2的mRNA的相对表达量,进一步优化Dox的诱导浓度;最后,通过western blot检测不同Dox浓度下,转染目的基因的ADSCs中BMP-2表达,Image J软件进行灰度值分析判断二者之间的剂量依赖关系。 结果:1%琼脂糖凝胶电泳证实pUC57-BMP-2经双酶切后可获得大小约1 100 bp的目的基因片段,菌落PCR和基因测序证实含目的基因的慢病毒表达载体pLVCT-BMP-2构建成功。ADSCs对Dox最大耐受浓度为6 μg/mL,Dox对ADSCs中目的基因表达的最大诱导浓度为5 μg/mL,western blot证实ADSCs中BMP-2表达与Dox浓度（0~5 μg/mL）存在剂量依赖关系。 结论:成功构建可调控BMP-2表达的单质粒慢病毒表达载体,转染ADSCs后,BMP-2的表达与Dox浓度存在剂量依赖关系。     

胃癌淋巴结清扫范围的现状与进展

我国因胃癌死亡的人数居恶性肿瘤之首[1],关于胃癌的研究已经成为了全社会关注的热点问题.胃癌一般分为早期胃癌与进展期胃癌,淋巴结转移是胃癌的主要转移途径,因此胃癌淋巴结清扫范围与预后直接相关.近年来,随着研究的深入,胃癌的手术方式及淋巴结清扫受到人们的重视,但淋巴结清扫范围一直存在争论[2-3].本文对胃癌淋巴结清扫的现状与进展加以综述.