不同基原的化橘红UPLC指纹图谱、化学模式识别及含量测定研究

目的 建立化橘红药材的超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱,并进行化学模式识别分析及含量测定,以鉴别不同基原的化橘红差异。方法 通过建立UPLC指纹图谱,确定20批化橘红样品共有峰及峰面积,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012A版）进行相似度分析。以共有峰峰面积数据为基础,采用统计分析软件SPSS 19.0进行聚类分析,SIMCA 13.0进行主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）,并对指认的化学成分进行含量测定。结果 UPLC指纹图谱确定了18个共有峰,指认其中5、6、8、12、15号峰分别为7-羟基香豆素、柚皮苷、野漆树苷、佛手柑内酯、异欧前胡素;相似度评价结果显示样品S2、S3、S6、S8相似度介于0.851～0.891之间,其余16批样品相似度均>0.900。聚类分析可大致区分毛橘红和光橘红,少数批次存在偏差;PCA和OPLS-DA结果显示毛橘红和光橘红有更明显的区分趋势,并筛选出3个可能造成两种化橘红差异的标志物。含量测定结果表明,化橘红近成熟组柚皮苷含量高于幼果组和未成熟组（P<0.05）,未成熟组佛手柑内酯含量明显高于近成熟...     

采用定点整合表达技术构建t-PA表达CHO工程细胞株

运用Flp InTM 定点整合表达系统构建表达组织型纤溶酶原激活剂 (tissue type plasminogenactivator ,t PA)的CHO工程细胞株。将pcDNA5 /FRT载体和携带t PA基因的 pJOD S载体用Hind/KpnI双酶切 ,再将回收的 2 .0kbt PAcDNA片段和pcDNA5 /FRT载体连接 ,构建 pcDNA5 /FRT/t PA质粒 ;应用Flp InTM定点整合表达系统 ,将t PAcDNA定点插入Flp lnTM CHO细胞基因组中的 1个单拷贝位点上 ,以潮霉素B筛选定点整合t PAcDNA的细胞克隆。经筛选和体外纤维蛋白溶解活性检测 ,获得了t PA表达水平为 15 0 0～ 2 0 0 0IU/ (10 6cells·day)的CHO工程细胞株。     

基于UHPLC-MS-MS大通量分析的蜂胶影响PXR/CYP3A4调控血脂质量标志物筛选和评价

目的采用精准、可量化的方法筛选蜂胶影响PXR/CYP3A4通路调控血脂的质量标志物。方法采用人结肠癌LS174T细胞给予一定浓度的咪达唑仑注射液,同时给予不同浓度的蜂胶已知成分对照品溶液,孵育后提取样品,采用UHPLC-MS法测定生成的1′-羟基咪达唑仑含量,根据测定结果筛选出对PXR/CYP3A4通路有显著调控作用的成分,以这些成分为指标,建立同时定量方法,根据结果初步确定蜂胶中影响PXR/CYP3A4通路调控血脂代谢的质量标志物。结果所评价的蜂胶成分中,白杨素、高良姜素、异绿原酸A、槲皮素、咖啡酸苯乙酯均能够显著提高或降低1′-羟基咪达唑仑的量(与对照组和阳性对照组比较),提示上述成分能够显著影响PXR/CYP3A4表达;UHPLC-MS-MS含量测定结果显示,蜂胶中上述成分除异绿原酸A和乔松素外,均具有适宜的含量以达到显效。结论白杨素、高良姜素、咖啡酸苯乙酯和槲皮素可能是蜂胶影响PXR/CYP3A4通路调控血脂的质量标志物,且均具有抑制相关靶标表达,进而调节血脂水平的活性;同时,本研究所用质量标志物筛选、评价方法快速、高效、可量化,能够适应基于PXR/CYP3A4的大通量活性成分筛选研究。     

CRISPR / Cas9 基因编辑技术在肿瘤免疫治疗中的应用

近年来肿瘤免疫治疗因其显著疗效和创新性备受关注,是肿瘤治疗中最具有前景的研究方向之一。CRISPR基因编辑系统的发展以及其在多领域的延伸应用让研究者看到了它的巨大潜力,在肿瘤免疫治疗研究中也显示出广泛的应用前景。在过继性细胞治疗中,CRISPR/ Cas9 可对TCR-T 和CAR-T 细胞的内源性TCR 以及HLA-Ⅰ分子的基因进行敲除得到通用型效应细胞;在基于免疫检查点阻断的治疗中,其为免疫检查点的抑制和阻断提供了一种新的方法;同时在抗体靶向疗法中,CRISPR/ Cas9 技术在候选靶点筛选及简化抗体制备流程中有着重要应用。CRISPR 从各方面极大地推动了肿瘤免疫治疗的研究,本文将对CRISPR/ Cas9 基因编辑系统在肿瘤免疫治疗方面的应用进行介绍。     

表面麻醉下经尿道输尿管镜钬激光治疗ESWL不适宜的输尿管结石

目的 探讨表面麻醉下经尿道输尿管镜钬激光治疗不适宜ESWL的输尿管结石的应用价值。方法 选择因ESWL治疗失败、造影提示结石处有肉芽形成、ESWL定位困难及结石太大的24例输尿管结石患者,采用表面麻醉,经尿道输尿管镜钬激光治疗,观察疗效。结果 输尿管镜操作成功22例,成功率91．7％（22／24）,碎石时间25～45min,中下段结石1周内排尽率100％（15／15）,上段结石1周内的排尽率57．1％（4／7）,配合术后ESWL治疗,1个月后结石排尽率100％（7／7）。无严重出血、输尿管穿孔等并发症。结论 表面麻醉下经尿道输尿管镜钬激光治疗不适宜ESWL的输尿管结石,疗效确切,安全可行。     

胎盘植入12例临床分析

胎盘植入是一种少见而严重的产科并发症,因近年来发病率有所上升,故对其诊断及治疗愈来愈受临床医师重视。现将我院1989～1997年12例胎盘植入病例分析报告如下。1　临床资料1.1　一般资料　12例患者,年龄23～36岁,平均28.2岁。经产妇5例,初产妇7例,有人工流产史者11例,其?..     

术中电凝止血致心跳骤停复苏2例报告

例1,男,73岁。贲门癌,行根治术。气管内插管静吸复合全麻。开胸术中电凝止血     

Dieulafoy溃疡的临床研究近况

1987年Dieulafoy首先报告7例健康人突然大量呕血,在贲门下方有微小糜烂区,粘膜下有增粗的异常动脉破裂引起大出血。以后在文献上出现种种命名,如单纯溃疡。浇表性胃溃疡,Diculafoy溃疡,Dieulafoy糜烂,曲张动脉瘤(cirsoid aneurysm),粟粒状动脉瘤,粘膜下动脉瘤,粘膜下动脉畸型,胃粘膜下动脉硬化等等,实为同一疾病。目前已统一命名为Dieulafoy溃疡.据田中等统计欧美各国文献已有100例以上报告。日本1982年以前13年中仅报告25例。但1983～1986年报告急遽增加达67例,在日本文献中已报告128例,其中资料完整者93例,由内镜确诊者占74％。其发病率占上消化道出血0.2～0.3％。     

同种异体肾移植术后并发急性鹅口疮2例

同种异体肾移植术后并发急性鹅口疮２例福建省厦门市第二医院（３６１００２）白天玺陈昭毅赵俊华因同种异体肾移植术并发急性假膜性念珠菌病（即鹅口疮，ｔｈｒｕｓｈ）者国内外文献中迄今尚未见报道，现将我院收治的２例典型病例报告如下。例１，郑某，男性，２８岁，１...     

溃疡病并存胃粘膜糜烂的外科处理

本文对57例溃疡病并存胃粘膜糜烂进行回顾性分析,主要对溃疡病行胃大部份切除术后并发急性粘膜糜烂出血的发病机理、诊断、治疗、预防并结合临床经验进行了探讨。