新月菱形藻胞外多糖抗病毒活性研究

目的阐明新月菱形藻胞外多糖(exopolysaccharidesofNitzschiaclosterium,EPN)及其硫酸酯(sulfatedexopolysaccharidesofNitzschiaclosteriumSEPN)的体内抗流感病毒活性。方法以流感病毒亚甲型小鼠肺炎适应株(FM1)对小鼠鼻吸入法造模,EPN和SEPN对染毒小鼠灌胃,以对小鼠肺指数抑制率作为体内抗病毒活性指标,同时观察小鼠的胸腺和脾脏指数;以MTT法检测EPN和SEPN对小鼠淋巴细胞增值和对NK细胞杀伤的促进作用。结果EPN和SEPN都显示出体内抗流感病毒作用,其中,中剂量组(100mg·kg-1)作用最为显著。与同等剂量的EPN相比,SEPN对FM1病毒表现出更为显著的体内抗病毒活性。EPN和SEPN均能不同程度地提高染毒小鼠的胸腺指数和脾脏指数,显著地促进小鼠淋巴细胞的增值反应,提升小鼠NK细胞的杀伤活性。结论新月菱形藻胞外多糖及其硫酸酯可能通过促进淋巴细胞增值,增强NK细胞的杀伤活力实现对FM1病毒的抑制作用。其中SEPN还通过自身携带的负电荷与病毒颗粒的正电荷相互作用阻止病毒进入宿主细胞从而抑制其复制来发挥抗病毒作用。     

新月菱形藻胞外多糖的成分及其硫酸酯的制备

目的阐明新月菱形藻胞外多糖(exopolysaccharides of Nitzschia closterium,EPN)的成分、单糖组成及其硫酸酯化条件。方法新月菱形藻胞外多糖以醇沉法从该藻的培养液中制备;DEAE-Sephedex25柱分离,HPLC法测定其质量分数,HPLC测定其相对分子质量;以氯磺酸-吡啶法探索新月菱形藻硫酸酯化反应条件。结果新月菱形藻向胞外分泌3种多糖,相对分子质量分别为EPN11.886×105,EPN21.41×105,EPN31.134×105。3种多糖的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和岩藻糖。甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和岩藻糖的摩尔比在EPN1为4.3∶1∶5.1∶8.9∶5.6,EPN2为4.2∶7.3∶3.7∶12.8∶3.4,EPN3为3.5∶2.1∶4.3∶4.9∶4.7。3种多糖的硫酸酯化条件基本一致,提高氯磺酸比例和延长反应时间均有利于增加酯化产物的硫酸根、提高取代度和酸酯化反应的产率。结论新月菱形藻胞外多糖为酸性多糖,其硫酸酯化产物多糖硫酸酯可能具有潜在的药理活性。     

桦褐孔菌胞外多糖合成的深层发酵条件研究

目的探索桦褐孔菌深层发酵体系中胞外多糖积累的最佳碳、氮源和pH值。方法采用深层发酵法培养桦褐孔菌,通过添加不同的碳、氮源和改变pH值观察胞外多糖的积累。发酵液中的总糖用硫酸-蒽酮法测定,还原糖以DNS法测定,总糖减去还原糖即为胞外多糖的量。结果桦褐孔菌深层发酵体系中有利于胞外多糖合成的最佳碳源为2%的麦芽糖,氮源为0.4%的蛋白胨,最适pH值为5.5。结论最佳单因子组合对桦褐孔菌胞外多糖积累有协同效应,组合后的发酵体系中胞外多糖的量达7.8g/L。     

新月菱形藻胞外多糖的成分及其硫酸酯的制备

目的阐明新月菱形藻胞外多糖(exopolysaccharides of Nitzschia closterium,EPN)的成分、单糖组成及其硫酸酯化条件。方法新月菱形藻胞外多糖以醇沉法从该藻的培养液中制备;DEAE-Sephedex25柱分离,HPLC法测定其质量分数,HPLC测定其相对分子质量;以氯磺酸-吡啶法探索新月菱形藻硫酸酯化反应条件。结果新月菱形藻向胞外分泌3种多糖,相对分子质量分别为EPN11.886×105,EPN21.41×105,EPN31.134×105。3种多糖的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和岩藻糖。甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和岩藻糖的摩尔比在EPN1为4.3∶1∶5.1∶8.9∶5.6,EPN2为4.2∶7.3∶3.7∶12.8∶3.4,EPN3为3.5∶2.1∶4.3∶4.9∶4.7。3种多糖的硫酸酯化条件基本一致,提高氯磺酸比例和延长反应时间均有利于增加酯化产物的硫酸根、提高取代度和酸酯化反应的产率。结论新月菱形藻胞外多糖为酸性多糖,其硫酸酯化产物多糖硫酸酯可能具有潜在的药理活性。     

蒲黄醇提取物对家兔急性心肌缺血的保护作用

目的 :探讨蒲黄提取物对家兔心肌缺血的保护作用。方法 :通过静脉注射蒲黄醇提取物观察由垂体后叶素引起家兔急性心肌缺血的保护作用。以心室内压峰值 (peak) ,心室内压变化上升最大速率 (dp/dtmax) ,心力环面积 (ACFL)及舒张末期左心室内压 (EDP)为指标 ,分析各组分的保护作用。结果 :样品 1 0、2、3、1 1及 1 4可抑制垂体后叶素引起的心室内压峰值下降 ,而在 5min到 2min之间可使心舒张末压恢复正常。结论 :在分离的 1 4个组分中 ,有 5个组分明显对急性心肌缺血产生保护作用     

松花粉醇提物抗肿瘤作用的初步研究

目的 探讨松花粉醇提物的体内外抗肿瘤疗效.方法 体外检测:MTT法测定松花粉醇提物对人结肠癌细胞247、HCT116、人宫颈癌细胞HeLa及人胚肾细胞K293的细胞毒作用;体内检测:建立Lewis肺癌小鼠模型,计算各组小鼠的肿瘤、胸腺、脾脏重量、抑瘤率及免疫器官指数.结果 松花粉醇提物对以上3种肿瘤细胞均表现出明显的抑...     

芫花根HPLC色谱指纹图谱研究

目的建立芫花根HPLE色谱指纹图谱,为芫花根有效成分筛选、药理毒理学、药物代谢动力学以及脱毒提取工艺研究提供可靠的检测方法。方法利用柱层析(硅胶,Sephadex LH-20)从芫花根乙醇提取物中分离代表性化合物;以HPLE方法,梯度洗脱,分别测定不同地区芫花根各样品10批。色谱条件：流动相A为甲醇;流动相B为水(乙酸调pH为3．0)。梯度洗脱A/B体积比：0～20min,35／65;21～40min,45／55;41～60min,50／50;61～85min,65／35,分析时间120mine,流速：1ml／min,柱温：35℃。结果10批芫花根乙醇提取物得到的色谱指纹图谱有23个共有峰,可分为6个区段。保留时间0～11min出现2小峰;保留时间11～23min出现2个峰;保留时间23～35min出现1峰;35～66min出现14个峰,主要特征峰6,7,11,12,13,18,19号峰在此区域,峰13为最强峰;66～72min出现1个峰,72～85min出现3个峰。不同产地的芫花根指纹图谱有一定差异。结论芫花根乙醇提取物HPLE指纹图谱具有很强的特征性及专属性,可作为检测方法用于芫花根黄酮、香豆素类化合物有效成分筛选、协同作用、药代动力学、毒理学以及芫花根脱毒提取工艺研究。     

紫甘薯花青素对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道屏障损伤的修复作用

目的:探究紫甘薯花青素对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道屏障损伤的修复及治疗作用。方法:将健康雄性BALB/c小鼠分正常饮水组、DSS模型组、紫甘薯花青素不同剂量(12.5、25、50及75mg/kg)组和5-氨基水杨酸(5-ASA)阳性药物对照组。口服含2.5%DSS的饮用水建立小鼠溃疡性结肠炎模型。免疫组织化学技术检测小鼠结肠中紧密连接蛋白ZO-1和occludin以及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。糖原PAS染色技术观察结肠组织杯状细胞中黏液素的表达的情况,Western blot检测ZO-1、occludin和TNF-α的蛋白表达,天狼星红染色技术检测小鼠结肠纤维化情况。结果:与正常饮水对照组相比,DSS模型小鼠疾病活动指数,组织学损伤明显增加(P<0.01);与DSS模型组相比,紫甘薯花青素不同剂量组小鼠的疾病活动指数评分降低,结肠组织中ZO-1和occludin的表达及分布均上升,且TNF-α和IL-6的表达及分布均下降;糖原PAS色显示结肠组织杯状细胞中的黏液素分布及表达在紫甘薯花青素治疗组明显增加;天狼星红染色...