血液肿瘤干/祖细胞靶向治疗研究进展

目前血液肿瘤病人在接受常规化学治疗后大多数会复发。人们逐渐认识到其主要原因在于血液肿瘤内部存在一小部分肿瘤干/祖细胞,它具有自我更新和多向分化的潜能,传统的化疗药物只能杀死大部分已分化的肿瘤细胞,不能杀死肿瘤干/祖细胞,因此造成了肿瘤治疗效果不理想,要想彻底根治血液肿瘤,就必须对肿瘤干细胞的内在特性进行研究,采取针对肿瘤干/祖细胞的靶向治疗。针对肿瘤干/祖细胞的表达区别于正常干/祖细胞的表面标志,诱导肿瘤干/祖细胞的分化,扰乱维持肿瘤干/祖细胞自我更新的信号通路和微环境都是可行的策略。本文就近年来血液肿瘤干/祖细胞靶向治疗方面的研究进展进行综述。     

磁性纳米四氧化三铁对小鼠淋巴细胞及巨噬细胞功能影响的初步研究

为了探讨磁性纳米四氧化三铁颗粒(Fe3O4-MNP)对小鼠免疫系统的影响,将ICR小鼠随机分为4组,分别给予生理盐水、低剂量、中剂量和高剂量Fe3O4-MNP,在小鼠经胃灌药后2周处死,测量脾脏重量及小鼠体重并计算脾脏指数;用刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验测定脾淋巴细胞增殖活性,中性红比色法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能。结果表明,与对照组相比,实验组的脾脏指数并没有明显差异(p0.05)。实验组脾淋巴细胞增殖率均高于对照组,尤其在中剂量组(p0.05),且中剂量组腹腔巨噬细胞吞噬率较对照组及其他2个实验组均有明显升高(p0.05)。结论:合适剂量的Fe3O4-MNPs可以增强小鼠淋巴细胞免疫和巨噬细胞吞噬功能。     

磁性纳米Fe_3O_4颗粒对藤黄酸诱导的U937细胞凋亡效应的影响(英文)

本研究探讨联合应用藤黄酸(GA)和磁性纳米Fe3O4颗粒(MNP-Fe3O4)治疗白血病的潜在可能性。采用MTT法检测GA对U937的细胞毒作用及GA联合MNP-Fe3O4对U937细胞生长抑制的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;应用Wright及DAPI染色观察凋亡细胞的形态学变化;采用实时定量RT-PCR及Western blot法分别检测细胞的caspase-3、bcl-2、bax、NF-κB和survivin基因及相应蛋白的表达。结果表明:GA对U937细胞的生长抑制作用呈现时间及剂量依赖性;MNP-Fe3O4本身无细胞毒作用,但能使GA对U937细胞的生长抑制作用增强;联合应用GA和MNP-Fe3O4诱导的细胞凋亡率较单用GA明显增加,细胞呈现典型的凋亡形态改变,同时可见caspase-3及bax表达上调,而凋亡抑制基因如bcl-2、NF-κB和survivin表达下调。结论:MNP-Fe3O4能增强GA对U937细胞的凋亡诱导作用,两者联合应用可能是一种新型而安全有效的白血病治疗方法。     

白血病树突状细胞体外培养影响因素的研究

白血病来源的树突状细胞（dendritic cell,DC）与正常的树突状细胞相比,其表面分子表达相似,但是抗原呈递功能相对较弱。接种于人体后尚不能产生足够的免疫反应,因此如何让DC具有其应有的成熟功能而让其更好的在临床治疗中发挥作用,是临床治疗前首要解决的问题。这也是目前免疫治疗领域研究的热点之一。本文就白血病树突状细胞新近研究的体外培养方法,影响因素以及存在的问题做一综述。     

非清髓性异基因造血干细胞移植的基础实验及临床研究

非清髓件异基因造血干细胞移植现在被广泛应用在由于年龄或合并症而不适应行传统造血干细胞移植的患者身上,采用非清髓性顶处理策略,移植后形成供受体造血细胞混合嵌合状态.淋巴细胞供受体双向免疫耐受,即非清髓性干细胞移植.通过非清髓性预处理方案,移植后形成供受体细胞嵌合状态,发挥移植物抗肿瘤效应,来达到治疗目的,与传统造血干细胞移植相比有较低的移植相关死亡率,术后移植物抗宿主疾病发生减少,且扩大了适应证范围,并且非清髓性颅处理方案的改进、移植后相关疾病发生的防治可以进一步提高治疗效果.目前虽然有许多治疗策略被提出,并在动物模型上取得了成功,但其在人体方面的应用仍需得到进一步的证实和研究.     

磁性纳米Fe3O4颗粒协同化疗药物及5溴汉防己甲素在荷瘤鼠体内逆转耐药的研究

本研究探讨5溴汉防己甲素（5-BrTet）、磁性纳米Fe3O4（Fe3O4-MNP）协同化疗药在动物模型体内逆转耐药的作用及其作用机理。建立恶性血液病荷瘤鼠模型,将其随机分为5组。A组：生理盐水;B组：单用DNR;C组：5-BrTet复合DNR;D组：Fe3O4-MNPs复合DNR;E组：Fe3O4．MNPs复合DNR及5-BrTet。观察各组肿瘤生长特征,肿瘤重量、体积。取各组肿瘤以及心、肝、肾等脏器行组织病理观察。Western blot检测耐药肿瘤BCL-2,BAX,以及caspase-3表达。结果表明：对于K562移植瘤,B、C、D、E4个组之间肿瘤抑制率没有明显的差别。对于K562／A02移植瘤,Fe3O4-MNP复合DNR及5-BrTet可明显抑制移植瘤的增殖,促进肿瘤细胞凋亡;肿瘤组织病理观察显示肿瘤坏死明显。5-BrTet联合Fe3O4-MNP抑制K562／A02移植瘤的BCL-2蛋白的表达,下调BAX和caspas-3的表达。结论：在耐药肿瘤动物模型体内,Fe3O4-MNPs协同DNR和5-BrTet具有很强的肿瘤抑制作用。     

骨髓增生异常综合征的实验研究进展

骨髓增生异常综合征（myelodyspla sticsyndrome,MDS）是一种源于造血干／祖细胞水平损伤而产生的克隆增生性疾病,以无效造血和向白血病高倾向性发展为特征。目前在染色体、基因、细胞因子及生化等方面的实验研究为MDS发病机制的研究提供了新的手段。这些研究有利于早期评估患者的预后,最终有可能为此病设计出更为有效的预防策略和治疗方法。本文参考2007年的美国血液学会（ASH）年会论文摘要资料,就该病染色体、基因、细胞因子和生化等方面的实验研究进展作一综述。     

自体造血干细胞移植治疗伴发四肢淀粉样变性的多发性骨髓瘤

为了探讨多发性骨髓瘤伴发淀粉样变性的罕见病例的有效治疗方法。对1例58岁的伴发四肢淀粉样变性的多发性骨髓瘤老年患者进行了包括血液免疫检查在内的多项实验室检查,骨髓穿刺和活检,以及全骨髓显象等检查,在治疗方面给予化疗药物治疗和自体造血干细胞移植。结果显示：自体造血干细胞移植后23天患者骨髓造血恢复,免疫固定电泳正常,骨髓穿刺浆细胞占0．6％。结论：自体造血干细胞移植是治疗伴发四肢淀粉样变性的多发性骨髓瘤的有效方法。     

异硫氰酸苯乙酯对K562／A02细胞阿霉素耐药影响的研究

本实验研究探讨异硫氰酸苯乙酯（phenylhexyl isothiocyanate,PHI）对K562／A02细胞的阿霉素（ADM）耐药性与敏感性的影响,并研究其可能的相关机制。运用MTT法分别检测阿霉素（ADM）以及PHI＋ADM对K562／A02细胞的生长抑制率,计算其耐药倍数;用流式细胞仪检测PHI作用前后细胞的凋亡、细胞内ADM浓度的变化和MRPI蛋白变化;分光光度仪测定细胞内还原性谷胱目肽（GSH）的含量;RT—PCR半定量检测PHI作用前后MRP1 mRNA的水平。结果显示,随着PHI浓度的增加,细胞生存率降低;两药联合应用时K562／A02细胞凋亡率均增加;当PHI≥20μmol／L时其耐药倍数有显著差异（P〈0．05）,两种细胞内ADM浓度增加亦有显著差异（P〈0．05）。单独运用1μg/ml ADM时K562／A02细胞内的GsH含量下降5％,单独运用PHI时K562／A02细胞内的GSH含量随着PHI浓度的增加先是轻度升高尔后下降,GSH含量下降点约在10μmoL／L;当PHI≥20μmol/L与1μg／ml ADM联合应用时,K562／A02细胞内的GSH含量随着PHI浓度的升高而进行性下降;而不同浓度的PHI的作用前后,两种细胞的MRP1的表达无论是蛋白水平还是基因水平都无显著差异（P〉0．05）。结论：PHI对K562／A02细胞的细胞毒作用与细胞内GSH耗竭无直接关系,PHI不但可以增强K562／A02细胞对ADM的敏感性,而且通过耗竭细胞内GSH部分地逆转K562／A02细胞对ADM的耐药。联合使用PHI可减少ADM的用量,从而降低其毒副作用。     

髓腔内造血干细胞移植联合供者淋巴细胞输注对GVHD和GVL的影响

 目的　观察髓腔内供者淋巴细胞输注（IBM-DLI）对急性淋巴细胞白血病小鼠异基因外周造血干细胞移植（allo-PBSCT）后移植物抗宿主病（GVHD）和移植物抗白血病效应（GVL）的影响。方法　雌性C57BL／6小鼠为受鼠建立白血病模型,接受全身照射(TBI)预处理后,输注雄性BABL/C小鼠来源的经rhG-CSF动员后的外周造血干细胞,分别经尾静脉（IV）和髓腔内进行DLI,2天后腹腔注射环磷酰胺（CTX）,观察移植后小鼠的生存状态和GVHD发生情况,应用流式细胞仪检测受鼠体内嵌合体形成和CD+4 CD+25调节性T细胞（Treg）比例。结果　IBM-DLI组的受鼠GVHD发生比例和死于白血病的小鼠比例均较IV-DLI组明显减低（P＜0.01）;移植后第7天各组受鼠骨髓中供鼠来源的细胞比例均在95 ％以上;与IV-DLI组比较,脾细胞中Tregs比例在IBM-DLI组明显升高（P＜0.01）。结论　与IV-DLI相比,IBM-DLI有利于减轻GVHD的发生,并保留GVL效应,其机制可能与受鼠体内Tregs细胞比例增高有关。